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微生物习题集第一章绪论一、术语或名词1．微生物(microorganism)因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。2．微生物学(microbiology)研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。3．分子微生物学(molecularmicrobiology)在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。5．微生物基因组学(microbicgenomics)研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。6．自生说(spontaneousgeneration)一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其免疫学说，为人类防病、治病做出了重大贡献；分离到了许多引起发酵的微生物，并证实酒精发酵是由酵母菌引起的，也发现乳酸发酵、醋酸发酵和丁酸发酵都是不同细菌所引起的，为进一步研究微生物的生理生化和工业微生物学奠定了基础。9．罗伯特．柯赫(RobertKoch，1843—1910)德国人，著名的细菌学家，曾经是一名医生，对病原细菌的研究做出了突出的贡献：A具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌；B分离、培养了肺结核病的病原菌，这是当时死亡率极高的传染性疾病，因此柯赫获得了诺贝尔奖；C提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫氏定律。他也是微生物学的奠基人。10．伍连德(1879—1960)我国广东香山人，著名公共卫生学家，我国海港检疫创始人。他用微生物学理论和技术对鼠疫和霍乱的病原进行研究和防治，在中国最早建立起卫生防疫机构，培养了第一支预防鼠疫的专业队伍，在他的领导和组织下，有效地战胜了1910—1911和1920—1921年间我国东北各地鼠疫的大流行，被国际上誉为著名的防疫专家，世界鼠疫会议1911年4月在我国沈阳举行时，他任大会主席和中国首席代表。著有“论肺型鼠疫”、“鼠疫概论”和“中国医史”等。11．汤飞凡(1879—1958)我国湖南醴陵人，著名的医学微生物学家，在医学细菌学、病毒学和免疫学等方面的某些领域做出·了显著的贡献，特别是首次应用鸡胚卵黄囊接种法从病人的眼结膜刮屑物中分离、培养沙眼衣原体的成功，确证了沙眼衣原体的存在，为世界上首创，成为医学微生物学方面的重大成果。12．SARSSevereAcuteRespiratorySyndrome的简称，严重急性呼吸道综合征，即我国称为的非典型肺炎，也简称为非典。第二章微生物的纯培养和显微镜技术一、术语或名词1．菌落(c010ny)单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到——定程度形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。2．菌苔(lawn)固体培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群体。3．平皿(Petridish)由玻璃或透明塑料制成的圆形皿底和皿盖组成，皿盖可覆盖于皿底之上，防止空气中微生物的污染。其英文名称是为纪念其发明者RichardPetri。4．纯培养物(pureculture)由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。5．培养基(culturemedium)供微生物生长、繁殖的营养基质，根据其中固化剂含量的不同可分为固体、半固体、液体3种。6．无菌技术(aseptictechnique)在分离、转接及培养纯种微生物时，防止其被环境中微生物污染或其自身污染环境的技术。7．培养平板(cultureplate)常简称为平板，指固体培养基倒人无菌平皿，冷却凝固后所形成的培养基平面。8．稀释倒平板法(pourplatemethod)将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后制成可能含菌的培养平板，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在固体培养基表面和里面。9．涂布平板法(spreadplatemethod)在培养平板表面均匀涂布经过稀释的微生物悬液后，保温培养，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。10．平板划线法(streakplatemethod)用接种环在培养平板表面划线接种微生物，使微生物细胞数量随着划线次数的增加而减少，并逐步分开。保温培养后，在固体培养基表面得到生长分离的微生物菌落。11．稀释摇管法(dilutionshakeculturemethod)将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50~C左右的琼脂培养基混合，摇匀后用石蜡封盖，保温培养后分离得到的微生物菌落生长在琼脂柱中间。12．单细胞分离法(singlecellpickupmethod)采用显微操作技术直接挑取微生物的单细胞(孢子)，培养后获得纯培养物。13．富集培养(enrichmentculture)利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应于该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，从自然界中分离到所需的特定微生物。14．二元培养物(two—componentculture)由两种具有特定关系(例如寄生或捕食)的微生物组成的混合培养物。15．原子力显微镜(atomicforcemicroscope)扫描探针显微镜的一种，利用细小的探针对样品表面进行恒定高度的扫描，同时通过一个激光装置来监测探针随样品表面的升降变化来获取样品表面形貌的信息。16．明视野显微镜(bright—fieldmicroscope)这种显微镜的照明方式为透射照明，即光线直接进入视野，在一个相对明亮的背景中形成一个暗的物像。17．聚焦扫描激光显微镜(confocalscanninglasermicroscope，CSLM)这种显微镜采用激光作为光源，每次仅对一个点进行照射，从而大大减少样品其他部分发出的杂散光的干扰。观察时通过激光器或载物台扫描，计算机处理，最终获得反差鲜明、高分辨率的三维立体数字图像。18．荧光显微镜(fluorescencemicroscope)这种显微镜用紫外线或蓝紫光照射经过荧光染料染色的样品，然后观察激发出的荧光所形成的物像。19．数值孔径(numericalaperture)决定显微镜物镜分辨率性能物理指标，取决于物镜的镜口角和玻片与镜头间介质的折射率。20．相差显微镜(phase—contrastmicroscope)这种光学显微镜通过特殊的装置把样品不同部位间折射率和细胞密度的微弱差异转变为人眼可以察觉的明暗差，可在不染色的情况下对透明的活细胞及其内部结构进行直接观察。21．分辨率(resolution)能辨析两点之间最小距离的能力，距离越小，分辨率越高。22．扫描电子显微镜(scanningelectronmicroscope，SEM)这种电子显微镜用电子束扫描样品表面，收集从表面发出的二次电子形成样品的表面图像。23．扫描探针显微镜(scanningprobemicroscope)通过在物体表面移动一种敏锐的探针来研究表面特征的显微镜(如扫描隧道显微镜)。24．扫描隧道显微镜(scanningtunnelingmicroscope)扫描探针显微镜的一种，用细小的探针在样品表面进行扫描，通过检测针尖和样品间隧道效应电流的变化形成物像。25．透射电子显微镜(transmissionelectronmicroscope)这种显微镜用电子束透射样品，用磁透镜使散射的电子聚焦成像。26．反差(contrast)被观察物区别于背景的程度。27．暗视野显微镜(dark—fieldmicroscope)这种显微镜利用特殊的聚光器进行斜射照明，经样品反射或折射的光线进入物镜成像。28．固定(fixation)制样过程中使整个机体及其细胞的内、外结构被保存并固定在适当位置的过程。29．负染色(negativestaining)染料使背景颜色加深而样品没有着色的染色法。30．菌丝体(mycelium)聚成一团的分支菌丝，见于真菌和某些细菌。31．菌丝(hypha)大多数霉菌和某些细菌的结构单位，管形丝状体。32．双球菌(diplococcus)分裂后成对排列的球菌。33．球菌(COCCUS)细胞大致呈球状的细菌。34．螺菌(spirillum)刚性的螺旋状细菌。35．螺旋体(spirochete)柔韧的螺旋状细菌，具有周质鞭毛。36．杆菌(rod)细胞呈杆状的细菌。37．柄细菌(prosthecatebacteria)细胞上有柄、菌丝、附器等细胞质伸出物，细胞呈杆状或梭状，并有特征性细柄的细菌。38．霉菌(mold)以多细胞丝状群体形式生存的真菌。39．真菌(fungi)有线粒体，无叶绿体，没有根、茎、叶分化，以无性和有性孢子进行繁殖的真核微生物。40．酵母菌(yeast)单细胞真菌。41．藻类(algae)能进行光合作用的真核微生物。42．原生动物(prokaryote)缺少真正细胞壁，具有运动能力，进行吞噬营养的单细胞真核微生物。附：显微镜种类比较显微镜类型基本原理及特点应用光学显微镜明视野显微镜光线透射照明，物像处于亮背景中。为光学显微镜的最基本配置，价格便宜、容易使用各种情况下染色样品或活细胞个体形态的观察暗视野显微镜通过特殊的聚光器实现斜射照明，亮物像形成于暗背景中明视野显微镜下不易看清的活细胞的观察；不易被染色或易被染色过程破坏的细胞的观察(例如对梅毒密螺旋体的检测)；观察活细胞的运动性相差显微镜通过特殊的聚光器和物镜提高样品不同部位间的反差(明暗差异)活细胞及其内部结构的观察荧光显微镜经荧光染料染色或荧光抗体处理的样品在紫外线照射下激发出各种波长的可见光，在黑暗的背景中形成明亮的彩色物像环境微生物的直接观察；病灶或医学样品中特定病原微生物的直接检测(使用特定的荧光抗体)共聚焦显微镜激光作为光源，每次照明样品的一个点，连续扫描后经计算机处理获得样品的二维或三维图像。显微镜价格昂贵对完整细胞的细微立体结构进行观察和分析电子显微镜透射电镜用电子束作为“光源”聚焦成像，分辨率较光学显微镜大大提高。仪器庞大、昂贵、对工作环境和操作技术有较高要求对病毒颗粒或超薄片处理后对细胞的内部结构进行观察扫描电镜电子束在样品表面扫描，收集形成的二次电子形成物像。分辨率远高于光学显微镜。仪器庞大、昂贵、对工作环境和操作技术有较高要求一般用于观察样品的表面立体结构探针扫描显微镜隧道扫描显微镜用细小的探针在样品表面进行扫描，通过检测针尖和样品间隧道效应电流的变化形成物像与电子显微镜相比，这类显微镜能提供原子力显微镜利用细小的探针对样品表面进行恒定高度的扫描，同时通过一个激光装置来监测探针随样品表面的升降变化来获取样品表面形貌的信息更高的分辨率，可在生理状态下对生物大分子或细胞结构进行观察。同时仪器体积较小，价格也相对便宜项目形态构造数量功能内质网囊腔，细管形有膜。分两种：糙面内质网的膜上有核糖体粒，光面内质网的膜上无核糖体粒数量少糙面内质网合成、运送蛋白质，光面内质网合成磷脂核糖体小颗粒状无膜。表层为蛋白质，内芯为RNA数量极多，变化大合成蛋白质高尔基体扁平膜囊和小囊泡有膜。由数个扁平