微生物实习论文西北农林科技大学动物医学院前言:微生物的历史比人类长了几亿年,地球最初的生命就是微生物。在以后漫长的历史中,微生物繁衍变化出了各种各样的物种。尽管我们人类对微生物的认识历史很短,但是对微生物的利用却是有很长的历史。从酿酒,保存食物,到后来的木乃伊,都是对微生物的利用和防治。从虎克发明显微镜后,微生物才算真正的进入了人们的视野,又经过巴斯德等大师的研究,微生物的知识才真正的深入人心。而除了对人类有益的地方,一些微生物对动物的健康和畜产品的生产都有很大的影响。因此,从病变部位分离相关的有害微生物就特别有必要。奶牛的产奶过程中,如果被微生物感染,不但会导致乳房发言,而且会导致奶产品质量下降。因此对此类微生物的研究很有实用价值。正文:1.器材和试剂葡萄糖(批号:20090814;厂家:天津市博迪化工有限公司)蛋白胨(批号:20120708.厂家:北京奥博星生物科技有限责任公司)琼脂粉(批号:20090405.厂家:北京奥博星生物科技有限责任公司)磷酸氢二钾(批号:2012年11月28日。厂家:天津博边化工股份有限公司)氯化钠、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水、酒精灯、火柴、玻片、显微镜、革兰氏染液、烧杯、玻璃棒、电子天平染病的牛乳2.培养基的配制蛋白胨水培养基(100ml):蛋白胨1gNaCl0.5g加水至100ml普通肉汤培养基(100ml):蛋白胨1g牛肉膏0.5gNaCl0.5gK2HPO40.1g加水至100ml蛋白胨培养基配制300ml。200ml做糖酵解实验,加琼脂粉(0.5g/100ml)和指示剂溴甲酚紫(4~5滴/200ml)。然后混匀熔化,分成四份,加糖(0.5g/100ml),加热调pH。制成葡乳麦蔗四种糖培养基。IMViC培养基配制15管,剩余50ml培养基加0.25g葡萄糖分装20管3.方法3.1将可疑菌落涂片,染色,镜检,进行初步判定,然后做纯培养,接与6个血琼脂平板上和斜面上,放37℃温箱培养。3.2取昨日血琼脂斜面纯培养物,作以下生化实验。(1)靛基质试验:取纯培养物接种于5个I试管中,次日观察结果(2)M、Vi实验:取纯培养物接种于5个M、Vi试管中,次日观察结果(3)作CAMP实验,由实验室提供用金黄色葡萄球菌(3个CAMP血平板)(4)取纯培养物接种肉汤3管(5)接种完成后,37℃温箱培养3.3观察并记录昨天的生化实验结果3.4动物治病性试验:24h肉汤培养物,0.1ml注射小鼠腹腔,4只小鼠,隔夜观察3.5药敏实验:将菌种均匀涂布与培养皿上,然后将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停,取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴,可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果,要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上;一般可在平皿中央贴一片,外周可等距离贴若干片。然后温箱37℃温箱24h培养。观察结果。药敏片:青霉素G13051010ug/片链霉素13042410ug/片克林霉素1305202ug/片苯挫西林1305091ug/片氯霉素13052130ug/片复方才诺明1306323.7ug/片头孢吡啶13041930ug/片诺氟沙星13052710ug/片米诺环素13052430ug/片头孢他啶13020930ug/片庆大霉素13050810ug/片多粘菌素B120209300ug/片红霉素(红)3021615ug/片四环素(四)13020930ug/片4.结果与分析4.1经过镜检发现其成链状球菌,被染成蓝色。4.2纯培养的菌落呈灰白色、表面光滑、圆形、β溶血。4.3生化实验:实验项目现象阴阳性靛基质试验产生红色吲哚环+Vp实验无明显现象—MR实验产生红色显色反应+cAMP实验靠近金黄色葡萄球菌的地方出现β溶血4.4剖检实验动物,取脾脏,将脾脏抹片镜检,被吞噬细胞吞噬的细菌不成链状,细菌一般单个存在。4.5药敏试验:青霉素G13051010ug/片1.3cm链霉素13042410ug/片2.4cm克林霉素1305202ug/片2.1cm苯挫西林1305091ug/片2cm氯霉素13052130ug/片1.7cm复方才诺明1306323.7ug/片0头孢吡啶13041930ug/片0诺氟沙星13052710ug/片1.7cm米诺环素13052430ug/片1.1cm头孢他啶13020930ug/片2cm庆大霉素13050810ug/片0.9cm多粘菌素B120209300ug/片2.5cm红霉素(红)3021615ug/片1.7cm四环素(四)13020930ug/片05.结论:鉴定菌种为无乳链球菌,对复方才诺明、头孢吡啶、四环素不敏感,对敏感。