1第四章消毒与灭菌2采用多种物理、化学或生物学的方法来抑制或杀死微生物的方法。物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法3消毒(disinfection)杀灭物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死细菌芽胞。灭菌(sterilization)杀灭物体上所有微生物的方法,包括细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌(bacteriostasis)抑制体内或体外细菌的繁殖。防腐(antisepsis)防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。无菌(asepsis)不存在活的微生物。无菌技术是指在进行外科手术或分离、转种及培养微生物时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。基本概念:4第一节物理消毒灭菌法热力灭菌法辐射灭菌法滤过除菌法超声波灭菌法干燥与低温抑菌法5一、热力灭菌法原理高温使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。方法湿热灭菌干热灭菌61.干热灭菌法一般细菌繁殖体在干燥状态下80~100℃1h,芽胞160~170℃2h死亡。焚烧烧灼干烤红外线7电热干烤箱8巴氏消毒法:63℃30minor72℃15~30sec,用于牛奶、酒类的消毒。煮沸法:100℃5~10min,用于消毒食具、刀剪、注射器等。流动蒸气消毒法:100℃蒸汽15~30min,芽胞不能全部杀灭。间歇蒸气灭菌法:100℃蒸汽15~30min,37℃过夜,再100℃蒸汽15~30min,如此连续三次以上。适于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。高压蒸气灭菌法:103.4kPa蒸汽压,121.3℃15~20min,适于普通培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌。2.湿热灭菌法9手提式高压蒸汽灭菌器立式高压蒸汽灭菌器10立式智能高压蒸汽灭菌器11干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较加热方式传导介质温度(℃)加热时间(h)透过布层温度(℃)结果20层40层100层干热空气130~1404867270以下灭菌不完全湿热饱和蒸汽105.3310110l10l灭菌完全12二、辐射杀菌法(一)紫外线:波长265~266nm杀菌原理:主要作用于细菌DNA,使相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体,从而干扰DNA复制和转录,导致细菌变异和死亡。用途与缺陷:穿透力弱,只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒和不耐热的物品表面消毒。13(二)电离辐射:包括x射线和γ射线,有较高的能量与穿透力。用于食品、一次性医用塑料制品的消毒。(三)微波:可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介质,但不能穿透金属。常用于非金属器械消毒,实验室用品、食品餐具、药杯等消毒。14三、过滤除菌法是用物理阻留的方法除去液体和气体的微生物。主要适合于不耐高温的血清、抗生素、抗毒素、药液以及空气除菌。不能去除病毒、支原体、衣原体等。15滤菌器杯式过滤器圆筒式过滤器1617四、超声波杀菌法目前主要用于粉碎细胞,以提取细胞组分或制备抗原等。18五、干燥与低温抑菌法干燥法常用于保存食物。低温可使细菌的新陈代谢减慢,故常用作保存细菌菌种,冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。19第二节化学消毒灭菌法20一、消毒剂的主要种类根据杀灭微生物作用的能力高效消毒剂:戊二醛、甲醛中效消毒剂:乙醇、碘伏低效消毒剂:新洁尔灭、洗必泰21根据杀菌机制促进菌体蛋白质变性或凝固酚类(高浓度)、醇类等干扰细菌的酶系统和代谢某些氧化剂、重金属盐类等损伤细菌细胞膜酚类(低浓度)、表面活性剂等22根据化学结构与性质酚类--石炭酸(苯酚)、来苏(甲酚皂)、洗必泰(氯已定)等醇类--70%~75%乙醇杀菌力最强重金属盐类--红汞等氧化剂--过氧化氢、过氧乙酸等表面活性剂--增加菌细胞表面张力,并增加其通透性使细菌破裂,如新洁尔灭(苯扎溴铵)等烷化剂--甲醛等,杀菌力强,但毒性大23二、消毒剂的应用241.患者排泄物与分泌物粪、尿、脓、痰等,多用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%来苏儿搅拌均匀,作用2h再倾去。厕所、阴沟的消毒多采用生石灰。252.皮肤(手)外科手术常采用0.1%新洁而灭、0.01%洗必泰泡手。传染科医护人员手的消毒常用0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡,可以杀灭乙肝病毒。注射或手术部位局部消毒用2.5%碘酒、70%酒精。皮肤浅表创伤可用2%红汞。263.粘膜预防新生儿淋球菌性眼结膜炎:1%硝酸银滴眼口腔粘膜消毒:3%过氧化氢冲洗尿道、阴道、膀胱:0.1%高锰酸钾或0.01%洗必泰等。274.水煮沸法自来水用氯气消毒漂白粉285.空气常用甲醛加热或甲醛混合高锰酸钾熏蒸:甲醛40ml加高锰酸钾30g/m3,熏蒸12~24h。居室空气消毒可用5-10ml醋酸/m3加等量水加热蒸发。肝炎病房可用3g/m3过氧乙酸熏蒸90min。296.食具的消毒煮沸15-30min0.5%~1%漂白粉或过氧乙酸液浸泡30~60min。7.蔬菜、瓜果采用0.1%高锰酸钾浸泡15min。308.温度计70%~75%酒精浸泡30min。肝炎者用2%碘酒浸泡5min后用70%酒精脱碘。31第三节影响消毒灭菌效果的因素消毒剂的性质、浓度与作用时间微生物的种类与数量温度与湿度酸碱度有机物化学拮抗物质32本章主要复习内容消毒、灭菌等基本概念各种消毒灭菌方法的应用及常见物品的消毒灭菌方法。