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硫酸化茯苓多糖的合成、表征和活性研究答辩人：赵炯指导教师：王永江2011年6月毕业论文答辩2010.06红外表征3背景1硫酸化茯苓多糖的合成2分子量的测定4生物活性研究5总结和展望6毕业论文答辩目录1.背景2011.06毕业论文答辩茯苓硫酸化茯苓多糖的合成N+SO3HOOOORORROROROH2CROH2COnOOOOHOHHOHOHOH2CHOH2COn2.硫酸化茯苓多糖的合成3g茯苓多糖和250ml二甲亚砜混合搅拌过夜加45ml吡啶室温搅拌2小时冰浴加入18.5ml氯磺酸磺化自来水透析5天，蒸馏水透析4天碱透析过夜调PH为785度反应4小时旋转蒸发，在冷冻干燥3.硫酸化茯苓多糖的红外表征两图谱相比:在810.62cm-1和1228.97cm-1处出现两个新峰，它们分别归属为C-S-O和S=O基团的吸收峰,由此表明成功合成出硫酸化茯苓多糖。4.硫酸化茯苓多糖的分子量的测定2011.06毕业论文答辩PolydispersityMw/Mn1.326MolarmassmomentsMn1.030*104Mw1.366*1044.硫酸化茯苓多糖的分子量的测定2011.06毕业论文答辩5.硫酸化茯苓多糖的生物活性研究清除羟基自由基的原理利用Feton反应产生羟基自由基，采用水杨酸显色法测定茯苓多糖硫酸酯对羟基自由基的清除效果E=（A对照-A样品）/A对照羟基自由基清除率的测定表4硫酸化茯苓多糖对羟基自由基的清除作用结果浓度（mg/mL）A本底吸收A对照清除率（%）10.6610.0510.7510.18720.5300.0750.7510.39440.4350.0900.7510.54160.3570.0970.7510.65480.3150.1010.7510.715羟基自由基清除率的测定01234567890.10.20.30.40.50.60.70.8清除率浓度（mg/ml）B羟基自由基清除率的测定羟基自由基清除率和浓度的关系：Y=-0.0012X4+0.0237X3-0.1682X2+0.5630X-0.2296R=0.9999其中：Y代表清除率，X代表硫酸酯多糖的浓度多糖的硫酸化衍生物对羟基自由基有清除能力，清除效果与多糖浓度成正比。数据显示：茯苓多糖硫酸酯具有较好的清除羟基自由基的活性，50％清除量为3.9mg/mL。当浓度达到8mg/mL时，曲线趋于平缓。超氧自由基清除的原理。采用邻苯三酚自氧化法，在碱性条件下，邻苯三酚能够自氧化产生·O2-，加入一定量的硫酸化的茯苓多糖溶液可对·O2-产生不同的清除作用,进而导致光吸收值的变化。超氧自由基计算公式为：E=（A对照-A样品）/A对照×100%超氧自由基清除率的测定表5硫酸化茯苓多糖对超氧自由基的清除作用结果浓度（mg/ml）A本底吸收A对照清除率（%）10.4980.0170.5350.10120.4610.0350.5350.20340.4300.0720.5350.33160.3890.0850.5350.43180.3530.0970.5350.521100.3410.1070.5350.562120.3400.1120.5350.573140.3380.1140.5350.582超氧自由基清除率02468101214160.10.20.30.40.50.6硫酸化多糖浓度（mg/ml）清除率超氧自由基清除率的测定超氧自由基和浓度的关系：Y=1.6*10-7*X4+7.7*10-5*X3-0.0054X2+0.1014X+0.0108R=0.9995其中：Y代表清除率，X代表硫酸酯多糖的浓度数据显示：茯苓多糖硫酸酯具有清除超氧自由基的能力，50％清除量为7.8mg/ml。当浓度达到10mg/ml时，曲线趋于平缓。6.总结2010.06毕业论文答辩1）用氯磺酸进行硫酸化，产物在890.26cm-1的β-D-葡聚糖特征吸收峰减弱，而在810.62cm-1和1228.97cm-1处出现两个新峰，它们分别归属为C-S-O和S=O基团的吸收峰，由此表明成功合成出硫酸化的茯苓多糖。2）硫酸化的茯苓多糖的质均分子量为13660道尔顿，与未硫酸化的茯苓多糖相比明显下降。3）硫酸化的茯苓多糖对羟基自由基有明显的清除率，且浓度越大，羟基自由及的清除率越高，50%清除率为3.9mg/ml。4）硫酸化的茯苓多糖对超氧自由基也有一定的清除率，也随着浓度的增加有明显的增加，50%清除率为7.8mg/ml。7.展望①毒理学以及其安全性问题必须通过严格的动物试验及一定的临床试验，确定产品的细胞毒性及其安全性，方可广泛地应用于生产、生活中。②取代度必须探明，多少的取代度才是适合的，可以做到既不影响人的身体健康，又能适应不同的生理活性要求，为此必须继续研究，总结出一套比较系统的制备方法，这样就可以根据实际的需要采取相应的制备工艺。谢谢！2011.06毕业论文答辩