SF-3000在血液分析中的应用

SF-3000在血液分析中的应用白细胞分类计数的原理•SF-3000采用半导体激光的流式细胞结合聚次甲基染料进行染色技术来对白细胞进行分类，即用一束激光照射经过处理的细胞，根据每个细胞产生的前向散射光，侧向散射光及侧向荧光信号来相互区分。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物，如核和颗粒；侧向荧光反映DNA和RNA含量。•SF-3000可将白细胞分为淋巴，单核，中性，嗜酸和嗜碱五类，它是通过WBC/BASO通道检测白细胞数和BASO,通过4DIFF通道进行4分类，即分辨出Lymp,Mono,Neut+Baso和Eo;通过计算得出Neut,即•Neut＝（Neut+Baso）-Baso•(1)WBC／BASO检测通道：在此通道中，特殊嗜碱性粒细胞溶血素试剂(STROMATOLYSER—FB)将血液中的红细胞和血小板溶解，形成影红细胞：将除嗜碱性粒细胞外的白细胞破坏．形成裸核白细胞。通过流式细胞检测，利用前向和侧向散射光信号，使嗜碱性粒细胞与其它细胞因体积差异而区分。以前向散射光强度为纵坐标，侧向散射光为横坐标，在WBC／BASO散点图中则显示出影红细胞(Ghost)、嗜碱性粒细胞和其它白细胞等3个分群。其它白细胞即是除嗜碱性粒细胞的裸核白细胞(也将其称为WBC分群)。白细胞数为嗜碱性粒细胞数与其它白细胞数之和。有核红细胞也包括在内。WBC/BASO通道•(2)4DIFF检测通道：在4DIFF通道•中。溶血素试剂(STROMATOLYSER一•4DL)使得血液中的红细胞和血小板被•溶解，成为影细胞；并将白细胞膜轻微•破坏．即在白细胞膜上打出小孔。造成•其通透性增加。FFS试剂(STROMA．•TOLYSER一4DS．XE2100D也称为FFS试•剂)中的聚次甲基荧光染料就能进入破•损的白细胞内，与细胞内的核酸和细胞•浆的细胞器结合。染色后的细胞经波长633nm的激光照射，使侧向荧光强度与细胞内核酸含量成正比。FFS试剂中还含有一种有机酸，可与白细胞中酸性颗粒特异性结合，依据侧向散射光信号，得以区分嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。从而通过流式细胞检测，用侧向荧光和侧向散射光信号就能区分出4类白细胞。•以侧向荧光强度为纵坐标，侧向散射光为横坐标，4DIFF散点图中显示出影红细胞，淋巴细胞，单核细胞，中性+嗜碱性粒细胞和酸性粒细胞等几个分群。DIFF通道异常白细胞散点图•L,m，N，EY异常增高或降低时，表现为其散射点所在区域德散点明显密集或稀疏。•急性淋巴细胞细胞白血病：L及ALY区域散点多而密集，部分M区散点增多。•急性非淋巴细胞白血病（ANLL）：N,M,LIC,ALY区域散点依白血病类型的不同而有不同程度的增多。•慢性粒细胞白血病（CML）：散点图显示各区域细胞点多而密集，界限不清楚。•慢性淋巴细胞白血病（CLL）：常只表现为L区域散点德增加，其他细胞散点多分布正常。白细胞散点图变化的意义•主要是指导实验室工作人员做好仪器计数的质量控制及判断是否涂片镜检。•判断白细胞计数是否受到其他因素的干扰：当外周血有较多的有核红细胞或肉眼未见的血小板聚集时，白细胞结果会假性增高，此时白细胞散点图L区域的左侧，可见异常增多的散点；当标本溶血时，在散点图L区域左上处可见异常散点；部分黄疸血标本图形十分散乱，散点多且各区域无明显界限。因此当试验结果出现这些图形时，不但提示白细胞计数和分类结果不准确，有时也可发现血小板结果同样受到干扰。•判断散点图是否符合白细胞计数结果及是否需要涂片镜检分类：正常情况下，白细胞各分类结果大致在参考范围内且散点图各散点的分布与之相符，若在M,ALY,LIC区域异常增多，结合仪器的异常报警需要涂片镜检。白细胞IP信息•Blasts/A-Ly？表示有出现胚细胞，非典型淋巴细胞或异常淋巴细胞的可能;•LmmGran?表示有出现未成熟粒细胞白血病的可能性；•LeftShift表示有出现核左移的可能性；•Aty/AbnLy？表示有出现非典型淋巴细胞或胚细胞的可能；•NRBC/PLT？出现集结的RBC或PLT凝块的可能。综上所述，认真分析仪器的提示信息和散点图可以减少工作量，提高报告质量。谢谢!