免疫组化指标意义及分子分型

乳腺癌免疫组化指标意义甘肃省妇幼保健院乳腺二科白海亚肿瘤标志物定义：指肿瘤组织或细胞由于癌基因及其产物异常表达所产生的抗原和生物活性物质。反映癌的发生、发展过程中有关基因或癌基因活化程度可在肿瘤病人的组织、体液和排泄物中检出。包括：激素、受体、酶和同工酶、癌基因及其产物，单克隆抗体等。性激素受体雌激素受体（estrogenreceptor，ER）为糖蛋白，生物特性不稳定，受热易破坏只能与雌二醇及结构相似的物质结合受体饱和达到容量限度后，结合与离解呈动态平衡激素与受体结合后，在体内发挥各种激素效应染色结果ER阳性的细胞的核与胞浆中均可见深的棕黑色颗粒判断标准：(-):阳性细胞数10%(+):癌细胞内颗粒呈淡黄色，阳性细胞数占10%～25%(++):棕色颗粒较深，阳性的细胞数占25%～50%(+++):棕色颗粒量多，深棕色，阳性的细胞数50%性激素受体孕激素受体（prosgesteronereceptor，PR）PR是E2和ER结合诱导的产物，其合成必须有雌激素作为启动，缺乏ER时很少能合成PR，PR的出现显示ER功能机制的完整性，大多数乳腺癌呈激素依赖性正常乳腺上皮细胞内存在ER、PR。当细胞发生癌变时，ER和PR出现部分和全部缺失。如果细胞仍保留ER和（或）PR，则该乳腺癌细胞的生长和增殖仍然受内分泌的调控，称为激素依赖性乳腺癌如果ER和（或）PR缺失，则该乳腺癌细胞的生长和增殖不再受内分泌的调控，称为非激素依赖性乳腺癌基因癌基因与抑癌基因：是细胞内控制细胞分裂和分化的基因族，在特定情况下，可使其激活或失活，从而导致细胞癌变。C-erBb-2基因又称neu或HER2定位于17q21，编码分子质量为185kDa(P185)的跨膜蛋白，具有胞内酪氨酸酶活性与表皮生长因子受体(EGFR)具有高度同源性，故它又称人表皮生长因子相关基因意义：参与细胞生长、分化的调节。正常情况下处于非激活状态，当受到体内、外某些因素作用而激活时，具有肿瘤转化活性，通过基因扩增和蛋白过度表达在细胞信号传递系统中起桥梁作用，刺激细胞增殖、浸润和转移。在正常乳腺组织中呈低表达，在乳腺癌组织中表达率可增高，其表达与乳腺癌分级、淋巴结转移和临床分期呈正相关，表达率越高，预后可能也就越差。P53抑癌基因有两种类型：野生型和突变型，野生型能诱导细胞凋亡和促进DNA修复，但其半衰期短，含量低，用免疫组化方法难以检测突变型P53蛋白因构象改变，半衰期长，故临床测定主要是突变型的P53蛋白。突变型P53基因失去了对细胞的监视功能，不能引起细胞增殖的停滞和凋亡，使细胞带着受损和错配的DNA进入S期，结果细胞因遗传不稳定而发生突变和染色体畸形变，最后发生癌变。意义乳腺癌P53基因的突变率约为14%～40%P53基因突变或P53蛋白的过度表达与乳腺癌组织分化低、表皮生长因子受体及Ki-67表达增加、晚期、转移扩散、ER、PR含量低有关P53阳性病例无病生存率和总生存期较短P53基因与淋巴结关系不大，但淋巴结阳性同时P53阳性者预后较差nm23基因由Steeg等在1988年应用消减技术发现的一种肿瘤转移抑制基因，定位于人17号染色体长臂主要分布于细胞质中，胞膜上有少量表达；其基因产物二磷酸核苷激酶(NDPK)参与多种生物学活动，在细胞信号传递、细胞分化、维持细胞的正常骨架等过程中起着重要作用。意义Nm23的表达与肿瘤大小、病理类型无相关性淋巴结无转移者nm23呈高表达，反之呈低表达Ki67抗原是与增殖细胞相关的核抗原，分布于核内，其功能被认为与染色质相连及与细胞的有丝分裂有丝分裂密切相关，与其他细胞周期相关的蛋白不同的是它不表达于DNA修复状态的细胞。Ki67在G1后期开始出现，S、G2期升高，M期达高峰，其后迅速降解，在G0期无表达，半衰期为1小时或更短。意义乳腺癌中Ki67抗原的阳性率与乳腺癌的淋巴结转移有显著关系，而Ki67抗原表达水平与乳腺癌患者生存率的直接关系国内外罕见报道。Ki67抗原表达水平与乳腺癌淋巴结转移密切相关。肿瘤淋巴结转移是与肿瘤细胞的增殖活性密切相关的，Ki67抗原是与增殖细胞相关的核抗原，故Ki67抗原表达水平高者易出现乳腺癌淋巴结转移。Ki67蛋白的表达，可反映肿瘤细胞活性，与恶性肿瘤的发展、转移和预后高度相关E-cadherin属于钙粘蛋白家族中典型的钙粘蛋白亚族的一员。分布在所有上皮组织中，是建立与保持上皮细胞极性和细胞-细胞间紧密连接的关键分子。E-cadherin是一分子量约120kD的跨膜糖蛋白，分为细胞外区、跨膜区、胞浆区。意义E-cadherin的表达与乳腺癌的分化程度、淋巴结转移及预后均有一定的关系。乳腺癌起源于乳腺的导管和小叶上皮细胞，E-cadherin在小叶癌和导管癌中表达是不同的，大多数导管癌表达E-cadherin阳性，而小叶癌E-cadherin表达很少用免疫组织化学方法标记E–cadherin，用作导管癌和小叶癌的鉴别诊断。表皮生长因子受体（EGFR）又称C-erBb-1或Her-1能引起细胞的过度分裂、增殖，最后引起细胞癌变。意义EGFR阳性率与乳腺癌的组织学分级呈显著相关性，分化差的乳腺癌EGFR阳性率表达高，分化好的肿瘤细胞则较低EGFR的高表达提示有较强的侵袭转移力、生存率降低、预后差。p63基因是一个抑癌基因，免疫组化染色主要定位于细胞核，判断肌上皮完整性的指标p63在乳腺癌的发生、发展过程中起着重要的作用可为乳腺癌的早期诊断、及时治疗及预后判断提供必要的理论依据。BRCA1(breastcancersusceptibilitygene1)是遗传性乳腺癌和卵巢癌的易感基因，BRCA1基因的结构和功能1990年Hall等研究发现，染色体17q21与早期发生的家族性乳腺癌相关。血管内皮细胞生长因子VEGF是一种重要的血管生成因子，又称血管通透因子(vascularpeameabilityfactor，VPF),是近年来发现的一种多肽类细胞因子功能:通过其受体直接刺激血管内皮细胞增殖，并诱导产生蛋白水解酶、间质胶原酶和组织因子来促进血管形成；提高血管通透性，促进血浆蛋白、纤维蛋白原外渗导致肿瘤间质水肿，引起细胞外基层改变，从而为肿瘤浸润及转移提供适合的基础。SMA（smoothmuscleactin）：称为平滑肌肌动蛋白，是可靠的标记抗体。从乳腺正常组织、良性病变到原位癌，早期浸润和浸润性癌，它的消失是一逐渐发展的过程。COX-2(cyclooxygenase-2)COX-2是前列腺素合成途径中的关键酶，乳腺癌组织中存在COX-2的表达。在肿瘤生成的多个关键步骤，如细胞抗凋亡、增强细胞运动性及血管生成中发挥重要作用。COX-2高表达与乳腺癌脉管侵犯、淋巴结侵犯、分期、PR表达、CerbB2表达及p53表达具有相关性。全球状况100%乳腺癌患者绝经前26%绝经后74%ER–46%ER+54%ER–27%ER+73%晚期:19%早期:81%DecisionResourcesEpidemiologyData&PrimaryMR.中国状况100%乳腺癌患者绝经前60%绝经后40%ER–50%ER+50%ER–40%ER+60%晚期:19%早期:81%流行病学调查发现，中国妇女发病的高峰年龄较美国提前10年，为40－49岁，30－39岁年龄组乳腺癌所占比例超过20％乳腺癌分子分型乳腺癌术后复发风险的分组危险度判别要点转移淋巴结其他低度阴性同时具备以下5条标本中病灶大小（pT）≤2cm，且分级a1级且瘤周脉管未见肿瘤侵犯b且Her-2/neu基因没有过度表达或扩增c且年龄≥35岁（且ER和/或PR表达）中度以下5条至少具备一条：标本中病灶大小（pT）＞2cm，或分级2-3级或有瘤周脉管肿瘤侵犯Her-2基因过度表达或扩增或年龄35岁（或ER和PR表达缺失）1-3个阳性未见Her-2过度表达和扩增。（并且ER和/或PR表达）高度（并且ER和PR表达缺失）或Her-2过度表达或扩增。≥4个阳性乳腺癌内分泌治疗的选择危险级别ER/PgR阳性内分泌治疗反应不确定ER和PgR阴性低危内分泌治疗或不用内分泌治疗或不用不适用内分泌治疗中危单用内分泌治疗或化疗→内分泌治疗化疗→内分泌治疗化疗高危化疗→内分泌治疗化疗→内分泌治疗化疗谢谢！