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尿液化学检查（尿蛋白的检验）河南科技大学第二附属医院王善龙尿液化学检查•尿液化学检验包括酸碱度、蛋白质、糖、酮体、胆色素、酶、激素等检查•pH、PRO、GLU、KET、BIL、URO本节要点•了解尿液特殊化学检验的项目方法及临床意义•掌握尿液一般化学检验的原理•重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、糖、酮体及三胆等的注意事项及临床意义尿液蛋白质尿液蛋白质检查•健康人尿中的蛋白质含量甚微（30~130mg/24h),•当尿液中蛋白质100mg／L或150mg/24h时,蛋白定性为阳性，称为蛋白尿尿蛋白定性检测方法1.加热乙酸法2.磺基水杨酸法3.干化学试带法干化学法•ＰＨ指示剂蛋白质误差原理，1909年Soerensen发现•成分1.主要酸碱指示剂溴酚蓝（ＰＨ阈值３.2）2.柠檬酸缓冲系统3.表面活性剂•1971年日本生产对白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白均反应•1993年生产出免疫学方法干化学法---指示剂蛋白质误差原理1909年Soerensen发现3，3׳，5，5′-四溴苯酚磺酰酞尿蛋白试剂带组成及特性试带法检测尿蛋白的干扰因素仅作为过筛实验不同ＰＨ对尿蛋白的影响青霉素对蛋白质测定影响大剂量青霉素滴注后对试带法测定尿蛋白的影响５～６h后检测尿蛋白加热醋酸法测定尿蛋白•加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，在含有适量无机盐的情况下，蛋白沉淀标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长可引起假阳性,其他分泌物也可能出现假阳性加酸过多或过少远离蛋白质等电点,可呈假阴性无盐或低盐饮食的病人，因尿内电解质含量少，不利蛋白质沉淀，可致假阴性。可先加１-２滴饱和氯化钠液后再操作严格按照加热＼加酸＼再加热程序，否则假阴性加热乙酸法－－注意事项磺基水杨酸法•试管法•玻片法磺基水杨酸法--干扰因素•假阳性1.尿液混浊含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐2.一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、降血糖药可呈假阳性3.混入生殖系统分泌物•假阴性1.尿液过碱（PH9)或过酸（PH3)大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法测定尿蛋白的影响尿蛋白定性实验方法学评价在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的，建议使用磺基水杨酸（加热醋酸）和双缩尿法对单纯球蛋白有特殊反应尿液蛋白质的定量检验比浊法磺基水杨酸三氯乙酸钨酸氯化苄甲乙氧胺氯化苯甲烃胺双缩脲法：经典方法通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀染料结合法直接法考马斯亮蓝G-250邻苯三酚红染料和蛋白质结合时，其最大吸收峰发生漂移沉淀法丽春红S苯胺蓝蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀。然后碱性环境使沉淀复溶，测定吸光度•免疫法•电泳法尿液蛋白质定量检验方法评价临床意义•定性试验（—）•定量试验：≤150mg/24h(100mg/L)临床意义•生理性蛋白尿•功能性蛋白尿•直立性蛋白尿•摄入性蛋白尿•老年性蛋白尿•妊娠性蛋白尿临床意义•病理性蛋白尿1.肾前性蛋白尿2.肾性蛋白尿①肾小球性蛋白尿②肾小管性蛋白尿3.肾后蛋白尿临床意义•肾前性蛋白尿---溢出性蛋白尿–血液中低分子量蛋白质如血红蛋白、肌红蛋白、本周氏蛋白等增加超出肾小管重吸收能力临床意义•肾性蛋白尿1.肾小球性蛋白尿①选择性蛋白尿②非选择性蛋白尿2.肾小管性蛋白尿3.混合性蛋白尿肾小球性蛋白尿•选择性蛋白尿1.4~9万中分子量蛋白，以清蛋白为主2.可见分子量接近的AT、Tf、PA，α1-AG、α1-AT以及低分子量蛋白β2-M\FC片段等3.不见分子量大的蛋白如IgG、IgA、IgM、C34.尿免疫球蛋白／清蛋白的比值0.1，尿蛋白+++~++++，定量3.5g/L5.主要见于肾病综合症肾小球性蛋白尿•非选择性蛋白尿1.可见9万的蛋白如IgG、IgA、IgM、C3和中分子量以及小分子量蛋白β2-MG2.免疫球蛋白／清蛋白比值0.53.尿蛋白+~++++，定量0.5~3g/L4.多见于1.原发性肾小球疾病：激进性肾炎、慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎2.继发性肾小球肾炎：糖尿病、红斑狼疮•提示预后差肾小管性蛋白尿1.尿中蛋白以α1-M、β2-M、LZM、RNase增多为主，清蛋白正常或轻度增多2.尿蛋白+~++，定量2g/L3.试带法可出现假阴性，其他方法阳性肾小管性蛋白尿1.肾小管间质病变a)间质性肾炎、肾盂肾炎、遗传性肾小管疾病、慢性失钾性肾病b)中毒性肾间质性肾病①重金属中毒②苯、四氯化碳有机溶剂③抗生素④中草药：马兜铃、木通c)器官移植马兜铃混合性蛋白尿•肾脏病变累及肾小球和肾小管，由此产生的蛋白尿称为混合性蛋白尿•标题–1非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链;–2肾小管性蛋白尿伴游离轻链–3生理性蛋白尿–4混合性蛋白尿–5选择性肾小球性蛋白尿图1SDS-PAGE电泳图谱肾后蛋白尿1.组织性蛋白尿在尿液代谢过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破坏分解的蛋白，以及炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白（T-H）2.偶然性蛋白尿尿道炎、出血、混有阴道分泌物或精液想一想•患者尿蛋白长期持续增高会有什么临床表现？谢谢！！