第4章_油脂的测定

第四章籽粒中油脂的测定一、概述油脂是脂肪和油的统称。在室温下呈液态，叫做油（植物油），如菜籽油等，呈固态的叫做脂肪（动物油），如猪油等。它们在化学成分上都是高级脂肪酸和甘油所生成的酯。一、概述一、概述压榨一、概述提炼不同植物油中所含的脂肪酸根不同，所以它们理化性质也不一样，但是它们都不溶于水，而溶于有机溶剂，如乙醚等，因此，可以将油脂溶解出来与其他成分分离，然后赶去溶剂即为油脂，可求得油脂含量。结合态脂类用乙醚提取法不能完全提取出来。因此，将试样与盐酸溶液一同加热，淀粉、蛋白质等加水分解，使脂类呈游离状态，因而容易用溶剂提取。如大豆，脂类含量相当高，其中含有较多的磷脂及结合脂类，为了有效地提取并定量全部脂类，采用氯仿—甲醇(CM)混合溶液提取法比较适合。一、概述在农业利用上作为提取油的原料来评价谷类和油料作物种子的品质时，测定游离态油脂具有重要意义。作物种子中游离态的油脂测定法有油重法(直接法)和残余法(间接法)。乙醚提取—直接测定油重法是国家标准方法，不适宜于大批样品的测定。间接测定残余法适合于大批样品的分析，分析效率较高，测定结果与油重法较为一致。在有折光仪的条件下，大批同种油料作物种子样品含油量的测定，采用简单快速而准确的折光法。一、概述二、油脂测定方法——索氏提取法残余法：用能与脂肪溶混的有机溶剂除去脂肪，从样品质量和残渣质量之差计算粗脂肪的含量。油重法：利用有机溶剂，如乙醚等，将油脂溶解出来与其他成分分离，然后赶去溶剂即为油脂，从而求得油脂含量。索氏提取器342索氏提取器原理溶剂回流及虹吸原理，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取。将研碎的固体物质放在滤纸套内，置于提取器2中，提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管3上升，被冷凝后滴入提取器2中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管4的最高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶，因而萃取出一部分物质，如此重复，使固体物质不断为纯的溶剂所苹取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。三、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（残余法）*1、原理即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣质量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少有游离脂肪酸、醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。2、实验材料、仪器和试剂实验材料：油料作物种子仪器：索氏脂肪抽提器、干燥器、不锈钢镊子培养皿、分析天平、称量瓶、恒温水浴锅、烘箱、样品筛、中速滤纸试剂：无水乙醚（分析纯）3.操作步骤（1）将滤纸切成8cm×8cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温。按顺序将各滤纸包放入同一称量瓶中称重（a），称量时室内相对湿度必须低于70%。（2）包装和干燥：在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品，封好包口，放入105℃的烘箱中干燥3h左右，移至干燥器中冷却至室温。按顺序号依次放人称量瓶中称重（b）。（3）抽提：将装有样品的滤纸包用长镊子放入提取管底部，注入一次虹吸量2倍的无水乙醚，使样品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水流，在恒温水浴45℃中进行抽提。抽提至抽取管内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6~12h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风厨使乙醚挥发（抽提室温以12~25℃为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。（4）称重：等乙醚挥发之后，将滤纸包置于105℃烘箱中干燥2h，放入干燥器中冷却至室温，按顺序将各包放在称量瓶中称重。重复干燥、冷却，称至恒重为止。3.操作步骤（5）计算3.操作步骤注意事项乙醚需提纯，去掉水分和乙醇。无水乙醚有易着火爆炸等缺点，测定时务须严防着火爆炸。乙醚要挥发完全，乙醚稍有残留，放入烘箱时也有发生燃烧爆炸的危险。试样包要完全津入乙醚中，可捆绑一个玻璃杯防止其上浮。四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）原理：将样品置索氏脂肪抽提器中，反复经乙醚(或其他脂溶剂)抽提，使脂肪完全溶解于溶剂中，然后加热除去溶剂，称重，即可算出样品中粗脂肪百分含量。由于样品中类脂物质亦溶解于此溶剂中，故称粗脂肪含量，也是国际标准推荐法，仲裁时以此油重法为准。主要仪器：(1)分析天平：感量0.0001g(2)(3)电热式恒温水浴：(6或8孔式)(4)(5)滤纸筒：直径22mm,长100mm(6)(7)索氏脂肪抽提器四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）(1)样品的选取和制备：选取有代表性。小粒种子，如芝麻、油菜等，取样量不得少于25g；大粒种子如大豆、花生仁等，取样量不得少于30g。粉碎，并通过40目筛；带壳油料种子，如花生果，蓖麻籽，向日葵籽等，需将壳与籽粒分开，分别称量，计算出仁率。然后测定籽粒的油制备完毕，立即混合均匀，装入磨口瓶中备用。四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）操作步骤(2)研磨与称样：称取备用样品2—4g两份，(含油0.7—1.0g)，准确至0.001g。置105±2℃烘箱中干燥1小时，取出，放入干燥器内冷却至室温。同时测试样的水分。3)提取：在已烘至恒重的洁净的抽提瓶内，加入约瓶体积2/3的无水乙醚，把抽提器各部分连接起来，连接好冷凝水流，调节水浴温度，使冷凝下滴的乙醚速度180滴/分(水浴温度约在55℃以下）。谷物、大豆样品抽提8小时，一般油料抽提10小时。四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）操作步骤(4)抽提完毕后，从抽提管中取出滤纸筒，再连接好抽提器，在水浴上蒸馏回收抽取瓶中的乙醚。然后取出抽提瓶，在沸水浴上蒸去残余的乙醚。(5)将盛有粗脂肪的抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干1小时，放入干燥器中冷却至室温(约45—60分钟)后称重，准确至0.0001g，再烘30分钟，冷却、称重，直至恒重。抽提瓶增加的重量即为粗脂肪的重量。抽出的油应是清亮的，否则应重做。四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）操作步骤（6）计算：四、粗脂肪含量的测定-索氏抽提法（油重法）五、油脂测定法——折光法原理本法是利用种子中的油的折光率与溶剂的折光率具有显著差异这一特性来进行样品含油量的测定。即用折光率高的非挥发性有机溶剂浸提样品，由于油的折光率较低，所以，溶剂溶解样品中的油后，溶液的折光率即低于溶剂，降低的值与溶解的油量成正比。因此，可由折光率的下降程度来测量样品的含油量。此法不如索氏提取法准确，但由于分析速度快，适宜于育种工作中大量样品筛选，提高作物品质具有重要意义。五、油脂测定法——折光法步骤：教材P338。思考题1．油脂测定方法有哪些？各有什么优缺点？2.理解和掌握索氏提取法（残余法和油重法）测定脂肪的原理、方法，测定时应注意的事项。