生物学生化试剂产品及临床意义介绍

产品分类：1、临床化学检验试剂生化全系列2、临床化学检验仪器蓝宝石600全自动生化分析仪（Sapphire600-----AuditDiagnostics）国内临床生化试剂最齐全之一含已注册和正在申报中：已注册ALTASTALPGGTCHEAFU(试)TBA-ITBA-VTPALBTBILDBILPAADA(试)CR-苦CR-酶BUNUAB2-MG(试)GLU-HKGLU-OXGSPAMYTGTCHHDL-CLDL-CAPOA1APOBLPaCKCKMBLDHHBDHCaMgPCu(试)ZnFeCO2ASO(试)CRP(试)RF(试)申报中5’-NTGPDAAFPNAGCSFCYS-CMALBHbA1cD3-HACELDH1C3C4IgAIgGIgMTRF生化试剂分类：酶类：AMY，CK，CK-MB，HBDH，LDH，LDH1，ALT，AST，ALP，GGT，AFU，CHE，5’-NT，ADA，NAG，ACE，GPDA基质类：TP，ALB，GLU，GSP，TBIL，DBIL，UA，BUN，CR，TBA1,5-AG，D3-H，CSF，CYS-C，TRP，血脂类：TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）电解质：Ca，Mg，P，Cl，Cu，Fe，Zn，CO2免疫类：ASO，RF，CRP，B2-MG，HBA1C，C3，C4，IgA，IgG，IgM，PA，MALB，AFP生化试剂临床应用肝功能TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT;TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5’-NT,GPDA,PA肾功能UA,BUN,CR,B2-MG,NAG，mALB,UP,CSF,CYC心肌酶谱LDH-L，HBDH，CK，CK-MB,LDH1血脂TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）风湿三项ASO,RF,CRP血糖GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H心血管HS-CRP，ACE电解质CA，MG，P，CL，CU，FE，ZN，CO2胰腺AMY其他C3,C4,IgA,IgG,IgM肝胆疾病的生物化学检测1.肝脏的生理功能1.代谢功能：三大物质（糖、蛋白质和脂类）的同化、储存和异化；核酸代谢、维生素的活化和储藏；激素的灭活及排泄；胆红素、胆酸的生成；铁、铜等金属的代谢2.排泄功能：对胆红素和某些染料的排泄3.解毒功能：生物转化功能（同化、异化）4.物质合成功能：凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的灭活清除2.肝功能实验的内容蛋白质代谢功能检查(TP、ALB、PA、AFP)胆红素代谢检查（TBIL、DBIL）胆汁酸代谢检查（TBA）摄取、排泄功能检查血清肝酶谱的检查（ALT、AST、ALP、GGT、）蛋白质代谢功能检查肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的功能降低，蛋白质的合成量就减少；-球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损，间质细胞增生时，球蛋白的生成增加；因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量的改变；其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白的增多等；因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化，可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。1.总蛋白、白蛋白的检测总蛋白的检测双缩脲法蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物，在540nm有吸收峰，并与蛋白含量成正比。蛋白+Cu2+→Cu–蛋白络合物（紫红色）白蛋白的检测溴甲酚绿终点法血清中白蛋白与溴甲酚绿（BCG）在pH4.15环境中结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，在600nm有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，从而测出白蛋白含量。白蛋白+溴甲酚绿→白蛋白-BCG复合物与溴甲酚紫法的比较溴甲酚绿法操作简单、快速，既可手工操作，也能自动化分析，是目前国内最常用方法。溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较溴甲酚紫法稍差溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度临床意义血清总蛋白与白蛋白升高•急性失水、肾上腺皮质功能亢进血清总蛋白与白蛋白降低•肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌•总蛋白＜60g/L,白蛋白＜25g/L，低蛋白血症•营养不良：摄入不足•丢失过多：肾病、烧伤、大出血•消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤血清总蛋白与白蛋白升高•TP＞80g/L（高蛋白血症）•A＞35g/L（高球蛋白血症）•慢性肝病、M蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病血清TP降低•生理性减少（e.g.3y）、免疫功能抑制、先天性低TPA/G倒置•肝功能损伤、M蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多发性骨髓瘤血清前白蛋白测定免疫比浊法标本中PAB与特异性抗体反应形成不溶性复合物，可在340nm测定该复合物的浊度，与同样处理的标准品比较，得出标本中PAB的含量。临床意义•降低：见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，(因为半衰期比ALB短，PA的变化远较ALB敏感)，故对早期肝炎、急性重肝具有特殊诊断价值•升高：Hodgkin病（恶性淋巴瘤的一种独特类型）胆红素代谢检查胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰老RBC的血红蛋白分解后形成生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚未与其它化合物结合，称为非结合胆红素（间接胆红素IBIL或游离胆红素）非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与葡萄糖醛酸结合后称为结合胆红素（直接胆红素DBIL）胆红素代谢检查结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿胆原尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入肠腔，形成“肝肠循环”残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素排出因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中胆红素增高，形成黄疸。总胆红素(T-BIL)改良化学氧化法总胆红素在表面活性剂存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定450nm处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。化学氧化剂pH8.2胆红素————————→胆绿素表面活性剂直接胆红素(D-BIL)改良化学氧化法直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定450nm处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成正比。化学氧化剂pH3.0胆红素——————————→胆绿素间胆抑制剂与重氮盐法的比较重氮法中的改良J-G法有较高的灵敏度、精密度和较宽的线性，但试剂无法长期稳定，溶血有负干扰，且叠氮钠作为防腐剂时能破坏偶氮试剂，导致呈色不完全；改良化学氧化法与J-G法有很好的相关性（R=0.994）；抗溶血（Hb≤7.4）；不受脂肪乳、VitC、肝素等干扰因素的影响；双试剂可以长期保持稳定临床意义增高：见于肝脏疾病，如原发性胆汁性肝硬化、急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬化；肝外疾病如溶血性黄疸、新生儿黄疸、胆石症、胰头癌、输血错误等也可见总胆红素也增高。胆汁酸测定酶循环法（第五代胆汁酸测定方法学）胆汁酸被3-羟基类固醇脱氢酶及Thio-NAD特异性地氧化，生成3-酮类固醇及Thio-NADH，3-酮类固醇在3-羟基类固醇脱氢酶及NADH存在下，生成胆汁酸和NAD+，循环往复从而放大微量的胆汁酸量，测定生成的Thio-NADH的吸光度与标准比较，得出胆汁酸含量。酶循环法测定反应式Thio-NAD+Thio-NADH+H+胆汁酸3α-羟基类固醇脱氢酶3-酮类固醇NAD+NADH+H+临床意义总胆汁酸升高•肝损害：肝炎、肝硬化、肝癌•胆道阻塞：胆管梗阻引起的胆汁淤积•小肠污浊综合症与第一代胆汁酸测定试剂相比成倍提高了测定灵敏度，克服了第一代酶比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问题。同时由于灵敏度提高的原因，循环酶法试剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些试剂隔离开来。血清酶学检查肝脏是酶含量最丰富的器官，肝细胞损伤时，许多酶如ALT、AST、GGT、ALP释放入血，导致血浆酶水平升高1.肝脏疾病时酶活力改变的机制酶合成异常肝细胞释放增加2.对肝脏疾病诊断意义的分类反映肝细胞病变和坏死的酶（ALT，AST）反映肝、胆淤滞的酶反映肝纤维化的酶反映肝细胞合成功能的酶（CHE）反映肝细胞病变和坏死的酶谷氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶，ALT）连续监测法（IFCC）ALT催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下反应生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中ALT的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出ALT活性。天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶，AST）连续监测法（IFCC）AST催化L-天冬氨酸的氨基转移与MDH催化的反应偶联，使NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中AST的活性成正比，在340nm处测定NADH下降速率，即可测出AST活性。与赖氏法的比较连续监测法多用于自动化生化分析仪，准确性好、精密度高。赖氏法多用于手工操作，实验条件要求不高，便于基层医疗单位开展，但重复性差，准确性差。临床意义急性病毒肝炎ALT：500-1000U/L，并且ASTALT慢性肝炎、脂肪肝ALT轻度升高100-200U/L肝硬化、肝癌，AST、ALT轻度升高或正常，以ASTALT多见一些药物或毒物所致升高：氯丙嗪、异烟肼、奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒腺苷脱氨酶（ADA）酶比色法ADA腺嘌呤核苷+H2O————→次黄嘌呤核苷+NH3PN次黄嘌呤核苷+Pi————→次黄嘌呤+磷酸核糖XOD次黄嘌呤+2H2O+2O2———→2H2O2+尿酸POD2H2O2+4-AAP+TOOS————→醌化合物在波长546nm处测定醌化合物生成速率，计算出ADA活力。临床意义类似ALT，对反映急性肝损害的残存病变和慢性肝损害比ALT为先，（并且ADA在鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也有应用）。反映肝细胞合成功能的酶胆碱酯酶（CHE)硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成丁酸和硫代胆碱，硫代胆碱再与5、5二硫代-2-硝基苯甲酸反应生成5-巯基-2-硝基苯甲酸，通过在405nm处测定5-巯基-2-硝基苯甲酸的增高速率，可以计算出胆碱酯酶的活力。临床意义CHE活力降低：肝实质细胞损害反映胆道梗阻的酶碱性磷酸酶（ALP）的测定连续监测法（IFCC）无色的对-硝基苯磷酸二钠在ALP作用下，生成在405nm处有特异吸收峰的淡黄色对-硝基苯酚，通过测定在405nm处吸光度的变化速率计算ALP活性。临床意义•肝胆系统疾病：阻塞性黄疸、急、慢性黄疸肝炎、肝癌•黄疸的鉴别•骨骼疾病：纤维性骨炎、佝偻病、骨软化病、骨转移癌、骨折愈合期•生理性升高：生长期的儿童和青少年γ-谷氨酰转肽酶（GGT）连续监测法-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺和双甘肽在-GT作用下，生成对硝基苯胺及-谷氨酰双甘肽，所释放出的对硝基苯胺与-GT活性成正比，通过在405nm处测定对硝基苯胺的变化，可求出-GT活力。临床意义•胆道阻塞性疾病•急、慢性病毒性肝炎、肝硬化•酒精性肝炎•其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺肿瘤其它酶类酶类肿瘤标志物检测–-L-岩藻糖苷酶（AFU）与原发性肝癌诊断标志（81.2%），与甲胎蛋白（AFP）联合检测可提高肝癌检出率肝纤维化的酶学检查–单氨氧化酶–腺苷脱氨酶（ADA）思考题1.肝损害蛋白检查的意义。2.血清酶学在肝胆疾病检查的意义。名词解释1.结合胆红素2.非结合胆红素肾脏疾病的生物化学检测肾脏的生理功能1.排泄水分、代谢产物、废物，保留有用物质2.调节水分和渗透压3.调节电解质及酸碱平