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草莓组织培养的影响因素浅析草莓作为一种经济植物具有较高的应用价值,利用植物组培得到草莓的脱毒茁,可以大大降低草莓种植过程中出现的品种老化和品质下降,明显提高经济效益。利用组培快繁技术还可从对草莓脱毒苗进行快速繁殖,出苗整齐,可进行周年生产,不受季节限制,从而实现新品种的工厂化育苗。1．培养程序和培养基5--6月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎尖，大小为0．3--0．4mm，作为组织培养的外植体。用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6--BA0．5mg/L，NAA0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L，pH值调至5．8--6．0。在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA0．5mg/L、NAA0．01mg/L。扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。以IBA0．1mg/L的浓度处理的生根率最高，为100％，平均根条数为2．4条。不加IBA及IBA浓度超过0．2mg/L，多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降低。使用无土育苗基质，要求基质具有良好的保水保肥能力，透气性能好，PH5.5~6.5，物理化学性质稳定，最好经过灭菌。一般用2~3种基质混合使用，如草炭、蛭石按体积比2﹕1混合。在移苗前1d，将混合好、已润湿的基质装入穴盘，轻压；用1000倍的普力克浇透，以杀死基质中残存的病原菌。第二天移苗时，基质含水量大约为80%，即适合移苗。2．操作技术要点及培养条件(1)灭菌与接种预处理灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种湿润剂，我们采用的是75％的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。灭菌处理在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；次氯酸钙(漂白粉)，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟。其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。因此，在草莓组织培养中，如把握好时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。接种以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中。培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟。从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在25±2℃。每日光照12小时，光强发2000Lx为宜。培养室温度在18--26℃范围内，瓶苗可以正常生长及发根，但在28℃以上时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生玻璃化现象。对影响草莓组培繁殖系数的碳源因素进行了探讨研究。结果显示:蔗糖和市售白砂糖为草莓组培快繁的最佳碳源。恒温培养26天,繁殖系数均能达到15以上,从经济角度考虑,可以用白砂糖取代蔗糖;用白砂糖作碳源,当浓度为3％时,草莓脱毒组培苗的繁殖系数最高,长势最好。用不同质量的有根或无根组培苗(285.6mg、201.6mg、153.4mg)在山皮土和合成土中进行扦插试验结果表明,苗木质量越大,成活率越高;苗木质量相同时,在合成土中扦插成活率高.提高移栽成活率的关键选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在3片以上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用0．2％冰乙酸中和使碱性降低。移栽时采取“深栽浅埋”。深栽就是在移栽时根要栽得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于土表。注意控制光照与温度、湿度。小苗移栽后，放在温室内或塑料拱棚内培养，温度控制在15--20℃，湿度维持在80％左右为宜。同时由于刚移栽的小苗茎杆脆嫩，应尽量采用喷雾状浇水，水量也不宜过大，落干后再喷。遮光50％，一周后，可逐渐增强日光照射。感谢观看