2014年体系灵芝栽培方案及数据记录表(12.2修)

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袋料栽培灵芝灵芝最适pH的研究pH值是微生物生长的一个非常重要的参数,合适的pH值能使细胞能持续、快速地生长。pH值在生长过程中对酶的活力的影响极为显著,因为通常各种酶只在一定pH值范围内才表现它的活力,而且同一种酶在不同pH条件下所表现出来的活性不同。为了进一步的了解灵芝栽培中最适pH值的范围,本实验研究了不同pH值对灵芝菌丝生长速度、子实体形态、产量、成分的影响,为灵芝栽培的培养基配方提供科学依据。试验工作方案设计如下。1材料与方法1.1试验地点温江食用菌栽培基地1.2供试材料1.2.1品种或菌株及其来源灵芝菌种ZL13来源于四川省农业科学院。1.2.2栽培原料及准备试验用栽培基质原料包括木屑、棉籽壳、麦麸、石膏、石灰。其有机原料新鲜、干燥、未霉变、未生虫,无机化学原料正品。1.3试验方法1.3.1栽培方式袋式熟料栽培。1.3.2母种制备PDA培养基:土豆200g洗净后去皮,切成块状,加入自来水,煮至水开后30min,4层纱布过滤,滤渣再煮2次,合并滤液;加入琼脂15g,葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.5g、定容至1000mL,115℃高压灭菌20min,冷却至30℃以下后接种,25℃避光培养。1.3.3原种制备杂木屑41%、棉籽壳42%、麸皮15%、石膏1%和石灰1%,含水量60%左右,PH5-6,每瓶装湿料500g左右,121℃灭菌150min(或者常压蒸汽灭菌24h),冷却至后无菌条件下接入母种,25℃避光培养。1.3.4栽培种制备杂木屑15%、棉籽壳60%、玉米芯15%、麸皮8%、石膏1%和石灰1%,含水量60%左右,pH5-6,每瓶装湿料500g左右,121℃灭菌150min(或者常压蒸汽灭菌24h),冷却至后无菌条件下接入原种,25℃避光培养。1.3.5栽培袋制备(1)培养基配方处理木屑(%)棉籽壳(%)玉米芯(%)麸皮(%)石膏(%)石灰(%)115601581124(2)培养基配制玉米芯和棉籽壳加水预湿24h,将木屑、麸皮、石灰和石膏混合均匀,掺入预湿的玉米芯和棉籽壳中拌匀。选用17cm*33cm*0.05cm的聚丙烯袋,每袋装湿料约1500g,121℃高压灭菌2.5h(或常压蒸汽灭菌24h),冷却至室温后于专用接种室内接入栽培种。每个处理30袋(考虑破袋或污染等因素制作40袋栽培菌袋,以便生物统计学分析)1.3.6栽培方法(1)菌丝阶段:25℃;空气相对湿度50%左右;光照0lx。(2)出芝阶段:27℃;空气相对湿度90%左右;原基分化时CO2浓度低于600ppm(400ppm左右),菌盖长到3cm以上时CO2浓度不超过1000ppm;光照1000-2000lx。2观测项目或指标灵芝生长期观测记载各个处理的项目及指标见表1、2和3。灵芝袋料栽培最适pH试验数据记录表表1不同生石灰添加量的培养基灭菌前后pH值的变化(灭菌时间:从月日点至月日点)编号生石灰含量添加前pH添加后pH灭菌后pH11%24%表2发菌2期间各个处理观测记载的项目及指标项目组别编号接种时间(月/日)种块萌发时间1(月/日)定植3时间(月/日)定植期4(d)菌丝生长速度5(mm/d)菌丝满袋时间6(年/月/日)发菌期7(d)菌丝长势8污染9袋数(袋)杂菌种类101%生石灰1123452123453123454123454%生石灰112345212345312345512345备专业术语规范(参照《GB/T12728-2006食用菌术语》并结合生产实际,规范实验中相关专业术1萌发:指接种物或接种块在培养基质中恢复生长。2发菌:又称“走菌”,指菌丝体在培养基物内生长、扩散的过程。3定植:又称“吃料”,指接种块菌丝重新长在新的培养基物上。4定植期:至菌种块接种与栽培基质上至菌丝定植的天数,以d表示。5菌丝生长速度:指菌落菌丝体在栽培基质中日均直线生长的快慢程度。菌丝生长速度(mm/d)=菌丝在菌袋中直线伸长长度(mm)/菌丝生长天数(d)6菌丝满袋:指菌丝体长满栽培料袋。7发菌期:又称“满袋期”,指菌种块总接种于栽培基质上至菌丝体长满栽培基质的天数,以d表示。注语)8菌丝长势:将菌株间的菌丝互相比较,菌丝长势分为三级(以“+”多少表示长势的强弱程度:“+”表示菌丝长势一般,“++”表示菌丝长势较强,“+++”表示菌丝长势强)。9污染:指在培养过程中混有其他微生物。10杂菌种类:指食(药)用菌培养过程中引起污染的微生物种类。菌丝直线伸长长度测量方法采用划线法测量。当菌丝在料袋中生长刚过“袋肩”时,先用记号笔在菌袋表面中央纵向画一条直线,再在菌丝前端沿直线画垂直线,次垂直线作为测定菌丝直线生长的起始线,过30天后(10天划一次)再在菌丝前端划一垂直线,测量两垂直线之间的距离,即为30天内菌丝直线伸长生长的长度。每个处理随机测量10袋,取其平均值除以30天即可计算出菌丝生长速度(mm/d)。表3第一潮灵芝观测记载的项目及指标项目组别编号物候期观察子实体形态第一潮芝第二潮芝原基生长期(d)开片期(d)子实体成熟期(d)颜色芝大小(cm2)芝片厚度(cm)鲜芝产量(kg/袋)干芝产量(kg/袋)鲜芝产量(kg/袋)干芝产量(kg/袋)1%生石灰1123452123453123454123454%生石灰112345212345312345412345注:芝片大小=横径(cm)×纵径(cm)袋料栽培灵芝最适颗粒度的研究灵芝生产中使用的栽培原料,其原料大小会菌袋的通气性,从而影响到菌丝的生长速度,为研究袋料颗粒度在灵芝发育的影响,本实验研究了不同袋料颗粒度对灵芝生产成本的影响,试验工作方案设计如下。1材料与方法1.1试验地点温江食用菌栽培基地1.2供试材料1.2.1品种或菌株及其来源灵芝菌种ZL13来源于四川省农业科学院。1.2.2栽培原料及准备试验用栽培基质原料包括木屑、棉籽壳、麦麸、石膏、石灰。其有机原料新鲜、干燥、未霉变、未生虫,无机化学原料正品。1.3试验方法1.3.1栽培方式袋式熟料栽培。1.3.2母种制备PDA培养基:土豆200g洗净后去皮,切成块状,加入自来水,煮至水开后30min,4层纱布过滤,滤渣再煮2次,合并滤液;加入琼脂15g,葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.5g、定容至1000mL,115℃高压灭菌20min,冷却至30℃以下后接种,25℃避光培养。1.3.3原种制备杂木屑41%、棉籽壳42%、麸皮15%、石膏1%和石灰1%,含水量60%左右,PH5-6,每瓶装湿料500g左右,121℃灭菌150min(或者常压蒸汽灭菌12h),冷却至后无菌条件下接入母种,25℃避光培养。1.3.4栽培种制备杂木屑15%、棉籽壳60%、玉米芯15%、麸皮8%、石膏1%和石灰1%,含水量60%左右,pH5-6,每瓶装湿料500g左右,121℃灭菌150min(或者常压蒸汽灭菌12h),冷却至后无菌条件下接入原种,25℃避光培养。1.3.5栽培袋制备(1)培养基配方试验根据筛目大小,设计3个处理,处理1(大于或等于0.5cm的筛目),处理2(0.5cm到1cm的筛目),处理3(大于1cm的筛目)。每个处理30袋,(考虑破袋或污染等因素制作40袋栽培菌袋,确保30袋/处理,以便生物统计学分析)。编号主料颗粒直径主料辅料木屑(%)棉籽壳(%)玉米芯(%)石灰(%)石膏(%)麸皮(%)10<D≤0.5cm1560151182D>1cm(2)培养基配制玉米芯和棉籽壳加水预湿24h,将木屑、麸皮、石灰和石膏混合均匀,掺入预湿的玉米芯和棉籽壳中拌匀。选用17cm*33cm*0.05cm的聚丙烯袋,每袋装湿料约1500g,121℃高压灭菌2.5h(或常压蒸汽灭菌24h),冷却至室温后于专用接种室内接入栽培种。每个处理30袋(考虑破袋或污染等因素制作40袋栽培菌袋,以便生物统计学分析)1.3.6栽培方法(1)菌丝阶段:25℃;空气相对湿度50%左右;光照0lx。(2)出芝阶段:27℃;空气相对湿度90%左右;原基分化时CO2浓度低于600ppm(400ppm左右),菌盖长到3cm以上时CO2浓度不超过1000ppm;光照1000-2000lx。2观测项目或指标灵芝生长期观测记载各个处理的项目及指标见表1和2。灵芝袋料栽培最适颗粒度试验数据记录表表1发菌2期间各个处理观测记载的项目及指标项目组别编号接种时间(月/日)种块萌发时间1(月/日)定植3时间(月/日)定植期4(d)菌丝生长速度5(mm/d)菌丝满袋时间6(年/月/日)发菌期7(d)菌丝长势8污染9袋数(袋)杂菌种类10颗粒度1112345212345312345412345颗粒度2112345212345312345512345备注专业术语规范(参照《GB/T12728-2006食用菌术语》并结合生产实际,规范实验中相关专业术语)1萌发:指接种物或接种块在培养基质中恢复生长。2发菌:又称“走菌”,指菌丝体在培养基物内生长、扩散的过程。3定植:又称“吃料”,指接种块菌丝重新长在新的培养基物上。4定植期:至菌种块接种与栽培基质上至菌丝定植的天数,以d表示。5菌丝生长速度:指菌落菌丝体在栽培基质中日均直线生长的快慢程度。菌丝生长速度(mm/d)=菌丝在菌袋中直线伸长长度(mm)/菌丝生长天数(d)6菌丝满袋:指菌丝体长满栽培料袋。7发菌期:又称“满袋期”,指菌种块总接种于栽培基质上至菌丝体长满栽培基质的天数,以d表示。8菌丝长势:将菌株间的菌丝互相比较,菌丝长势分为三级(以“+”多少表示长势的强弱程度:“+”表示菌丝长势一般,“++”表示菌丝长势较强,“+++”表示菌丝长势强)。9污染:指在培养过程中混有其他微生物。10杂菌种类:指食(药)用菌培养过程中引起污染的微生物种类。菌丝直线伸长长度测量方法采用划线法测量。当菌丝在料袋中生长刚过“袋肩”时,先用记号笔在菌袋表面中央纵向画一条直线,再在菌丝前端沿直线画垂直线,次垂直线作为测定菌丝直线生长的起始线,过30天后(10天划一次)再在菌丝前端划一垂直线,测量两垂直线之间的距离,即为30天内菌丝直线伸长生长的长度。每个处理随机测量10袋,取其平均值除以30天即可计算出菌丝生长速度(mm/d)。表2第一潮灵芝观测记载的项目及指标项目组别编号物候期观察子实体形态第一潮芝第二潮芝原基生长期(d)开片期(d)子实体成熟期(d)颜色芝大小(cm2)芝片厚度(cm)鲜芝产量(kg/袋)干芝产量(kg/袋)鲜芝产量(kg/袋)干芝产量(kg/袋)颗粒度1112345212345312345412345颗粒度2112345212345312345412345袋料栽培灵芝最适含水量的研究水分是真菌生长最重要的条件之一,基质含水量不足,菌丝无法吃料或者吃料后生长缓慢,并且容易污染杂菌,而水分过多,会降低基质的透气性,基质的透气性不够,不利于气体交换,会抑制菌丝生长,菌丝容易老化变黄。为研究基质含水量在灵芝发育过程中的影响,本实验研究了不同基质含水量下对灵芝菌丝生长速度、子实体形态、产量、成分的影响,为灵芝栽培的条件提供科学依据。试验工作方案设计如下。1材料与方法1.1试验地点温江绿宝食用菌栽培基地1.2供试材料1.2.1品种或菌株及其来源灵芝菌种ZL13来源于四川省农业科学院。1.2.2栽培原料及准备试验用栽培基质原料包括木屑、棉籽壳、麦麸、石膏、石灰。其有机原料新鲜、干燥、未霉变、未生虫,无机化学原料正品。1.3试验方法1.3.1栽培方式袋式熟料栽培。1.3.2母种制备PDA培养基:土豆200g洗净后去皮,切成块状,加入自来水,煮至水开后30min,4层纱布过滤,滤渣再煮2次,合并滤液;加入琼脂15g,葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾1.5g、定容至1000mL,115℃高压灭菌20min,冷却至30℃以下后接种,25℃避光培养。1.3.3原种制备杂木屑41%、棉籽壳42%、麸皮15%、石膏1%和石灰1%,含水量60%左右,PH5-6,每瓶装湿料500g左右,121℃灭菌150min(或者常压蒸汽灭菌12h)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