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一、广义的肝功能试验（一）肝脏本身的功能试验（二）肝胆疾病的血清标志物肝脏本身的功能试验1、有机阴离子运输：①色素试验：BSP（磺溴酞钠）,ICG（靛青绿）②胆红素试验③血清胆汁酸2、肝脏代谢功能①药物代谢②半乳糖廓清③尿素合成3、肝脏合成功能①凝血因子②白蛋白、球蛋白③脂蛋白肝胆疾病的血清标志物1、肝细胞损害:①转氨酶：AST、ALT②腺苷酸脱氨酶（ADA）③LDH52、胆汁郁积①ALP②5‘-NT（5’核苷酸酶）③LAP（亮氨酸氨基肽酶）④GGT（γ-谷氨酰转肽酶）3、疾病特异性标志物①病毒性肝炎：甲型肝炎病毒Ab（IgG与IgM型）乙肝：HBsAg,eAg,抗S、抗e、抗c②原发性胆汁性肝硬化：抗线粒体抗体（AMA）③慢性自身免疫性肝炎：抗平滑肌抗体（SMA）④原发性肝癌：AFP、GGTⅡ、ALP同工酶⑤肝豆状核变性：铜蓝蛋白二、血清胆红素的测定•结合胆红素：胆红素-葡萄糖醛酸，可与重氮试剂直接反应（直接胆红素,1’IBL）•未结合胆红素：需用加速剂（咖啡因）打开氢键，才与重氮试剂反应（间接胆红素）•是发现肝病、诊断黄疸、判断预后的简便又不可缺少的试验。一般是测血清TBil与尿三胆，还可以测1’Bil.测定方法：①咖啡因法（改良J-G法）②胆红素氧化酶法•常规方法•原理：①对氨基苯磺酸+亚硝酸钠→重氮苯磺酸（不稳定）②重氮苯磺酸以咖啡因为加速剂改良J-G法+胆红素→显色：酸性呈红色不稳定加碱（碱性酒石酸钠）后呈绿色更灵敏稳定改良J-G法•评价：①测定TB在10~37℃条件下不受温度影响。呈色在2h内非常稳定。②灵敏度高。③色素、轻度溶血无干扰④叠氮钠防腐的质控血清可引起偶氮反应不完全。⑤Bil对光敏感，标准及标本应避光。⑥脂血对测定有干扰，应取空腹血⑦线性范围﹤100mg/L。⑧结合胆红素的测定至今无侯选参考方法。⑨问题：胆红素（尤其是结合胆红素）的标准品不纯。胆红素氧化酶（BOD）法•原理：胆红素+1/2O2胆绿素+H2O胆绿素+O2淡紫色化合物（460nm△A↓）•评价：①简便、特异性高、能用于全自动生化分析仪，已有商品试剂盒供应。②Hb﹥1.5g/L使测定结果明显降低③线性范围至少可达513μmol/LBOD三、血清总胆汁酸测定•意义:胆盐由肝合成，经胆道排入肠内。小肠内胆盐大部分重吸收入肝，再分泌入胆汁，称肠肝循环。正常肝每天从门脉血摄取胆盐15-20克，负荷极大（肝每日仅摄取BIL250-300mg）。因此，轻微肝损害时胆盐代谢即可发生变化。方法：气-液色谱法HPLCRIA酶法：简便，易于推广。酶法测血清总胆汁酸原理：3α-羟基胆汁酸+NAD+3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）3-酮基胆汁酸+NADH+H+NADH+H++NBT黄递酶NAD+甲替540nm有吸收峰评价：线性范围：250μmol/L高浓度的LDH、Bil、VitC、Prot有干扰。四、血浆氨的酶两点法测定原理：α-酮戊二酸+NH4++NAD（P）H谷氨酸脱氢酶（GLDH）谷氨酸+NAD（P）++H2O△A340nm↓△A=A10S－A70s评价：简便，特异性高，广泛应用。其他方法：离子交换树脂法、直接法、电极法。五、转氨酶测定ALT（GPT）：谷丙转氨酶或丙氨酸氨基转移酶α-KG+丙氨酸ALT谷氨酸+丙酮酸丙酮酸测定：比色法:+2,4-二硝基苯肼→赖氏法(卡门氏单位)速率法：+NADH+H+LDH乳酸+NAD+各种方法单位定义、保温时间不同.340nm△A↓AST（GOT）：谷草转氨酶或天门冬氨酸氨基转移酶α-KG+天门氨酸AST草酰乙酸+谷氨酸速率法：+NADH+H+MDH苹果酸+NAD+草酰乙酸测定：比色法:+2,4-二硝基苯肼→赖氏法(卡门氏单位)六、血清蛋白试验•1、白蛋白（Alb）一般认为肝病时Alb↓是因为合成↓或分泌异常。测定Alb的主要价值在于判断预后：无腹水的肝硬化Alb↓预后不好。•2、蛋白电泳主要对慢性肝病有一定诊断价值①肝硬化的典型改变为：Alb↓、γ-G呈多克隆性↑，其中以快γ-G↑为主，以致βγ区之间分不开，形成特征性的β-γ桥②α1-AT酶缺乏性肝病时α1-G↓③胆汁郁积时β-G↑•3、总蛋白测定：•4、A/G比值：七、血清脂质和脂蛋白测定1、急性肝损害时：TG↑、CE↓，α1-脂蛋白消失2、胆汁郁积时：TC和CE↑，出现特殊的脂蛋白X八、凝血酶原时间（PT）测定•评价：能良好地反映肝合成功能，可作为肝病预后的指标1、凝血酶原活动度↓至正常的10%以下时预后险恶2、胆汁郁积时VitK吸收↓→PT↑，注入VitK后可纠正常见肝功检查项目选用空腹血清标本为宜。•TP(总蛋白）•Alb•A/G•转氨酶：ALT、AST•TBil、1’Bil•GGT•ALP•总胆汁酸•评价：最敏感的肝功能试验之一•意义：BSP45min滞留率≤5%，可排除肝硬化BSP45min滞留率＞14%，可肯定为异常•干扰：BSP↑如肥胖、高龄、血容量不足、胆囊造影剂等BSP↓如低蛋白血症（以白蛋白为主）•应用：①Dubin-Johnson综合症时，呈先低后高的双峰，主要为结合型BSP；②测定腹水量BSP试验：