消毒灭菌监测方法

logo中医院医院消毒灭菌效果监测及医院环境卫生学监测医院感染管理科xxx2018.2.7卫生部《医院感染管理规范》医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测；灭菌合格率必须达到100%；不合格的物品不得进入临床使用部门。医院消毒灭菌效果监测的目的：是预防医院内感染的重要措施之一。对消毒效果的监测是评价：其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段。是无菌技术操作及隔离技术的基础。因此消毒灭菌效果监测是保证医院消毒灭菌质量的重要措施。热力灭菌效果监测：包括，压力蒸汽、干热紫外线消毒效果监测；医疗器械消毒灭菌效果监测：使用中消毒剂的监测；医院环境卫生学监测：包括，空气、工作人员手、物体表面医院消毒灭菌效果监测的内容压力蒸汽灭菌器的分类：根据排放空气的方式和程度不同可分为：下排气式压力蒸汽灭菌器预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌器一、压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌效果监测方法包括：A、物理监测B、化学监测C、生物监测工艺监测的主要项目：(必须每锅进行)①物品的包装体积、重量：下排气式：≤30cm×30cm×25cm预真空：≤30cm×30cm×50cm金属包的重量不超过7kg；敷料包不超过5kg快速蒸汽：一般无包装工艺（物理）监测（程序监测）按照经过试验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查，以判断灭菌是否按照规定的条件进行②排气情况：灭菌温度灭菌时间压力每次灭菌应做详细记录包括：每锅锅号、压力、温度、时间、灭菌物品、灭菌操作者签名压力蒸汽灭菌所需压力、温度、灭菌时间灭菌器名称压力温度维持灭菌时间下排气102.9kpa（1.05kg/cm2）121℃20-30min预真空、脉动真空205.8kpa（2.1kg/cm2）132℃4min下排气：装量不超过柜室内容量80%B、化学监测包括：①包内指示卡(121℃、132℃）、②包外指示胶带•要求：指示胶带每包外必贴；指示卡每包包内必放。•结果判断：灭菌包，指示卡（带）由米色变成黑色，表示达到灭菌条件注意事项：包外化学指示胶带：根据变色情况，只能代表物品是否已经灭菌，仅仅起到一个鉴别作用，不能代表灭菌是否彻底。包内化学指示卡：可以准确反映灭菌的时间、温度和饱和蒸汽的综合变化，是鉴定每一个包裹内部的情况，指示卡（米黄色区域）与对照色块颜色相符，表示灭菌彻底。C、生物监测1）压力蒸汽灭菌器：采用“自含式生物指示剂”每周每台灭菌器进行一次（指示菌株采用耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢）2）新灭菌设备和维修后在投入使用前，应进行生物监测，合格后方可以投入使用。【方法】1、使用时，将生物指示剂放入标准检测包（16条41*66cm全棉手术巾叠放成23*23*15cm）的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。2、灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果。生物监测二、紫外线消毒效果监测•紫外线消毒的监测，必须进行：A、日常监测B、化学监测C、生物监测日常监测：使用时记录：新灯管启用日期、灯管使用照射时间、累计照射时间、擦管时间、化学及生物监测结果记录二、紫外线消毒效果监测紫外线灯在使用过程中，应该保持清洁，一般每周一次用75%酒精棉球擦拭一次，发现灯管表面有灰尘、油污时应该及时擦拭；二、紫外线消毒效果监测B、化学监测及方法要求：每季度1次主要监测使用中灯管的照射强度。新灯管要进行抽样监测。监测方法：①采用紫外线消毒灯强度监测化学指示卡（必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用）；注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开5分钟；将紫外线消毒灯强度监测化学指示卡垂直平放于灯管一米处，有图案一面朝上，照射1分钟，（照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色，）观察指示卡色块的颜色与其标准色块比较，读出照射强度。结果判定：普通30W直管型紫外线灯，新灯辐照强度≥90µW/cm2，为合格；使用中紫外线灯辐照强度≥70µW/cm2，为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度≥180µW/cm2，为合格。C、生物监测：经紫外线消毒后的物品或空气中的自然菌应减少90.00%以上，人工染菌杀灭率达到90.00%。⑴空气消毒效果的监测：空气培养⑵表面消毒效果的监测：物体表面采样各种医疗用品消毒灭菌后国家卫生标准：1、进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。2、接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数应≤20cfu/g或≤20cfu/100cm2；不得检出致病性微生物。3、接触皮肤的医疗用品，细菌菌落总数应≤200cfu/g或≤200cfu/100cm2；不得检出致病性微生物。卫生部《医院感染管理规范》规定：必须对使用中的消毒剂、灭菌剂，进行生物和化学的监测。使用中的消毒剂国家卫生标准：细菌菌落总数应≤100cfu/ml，致病性微生物不得检出。三、消毒灭菌剂监测化学监测要求应该根据消毒剂、灭菌剂的性能定期监测。含氯消毒剂、过氧乙酸、戊二醛（作为消毒剂使用）等：应该每日监测浓度，并做好记录；消毒剂使用的时间不得超过产品说明书规定的使用期限戊二醛（作为灭菌剂使用）：每周不少于1次监测浓度；应同时对消毒、灭菌的物品进行消毒灭菌效果的监测消毒物品，不得检出致病性微生物；灭菌物品，不得检出任何微生物①含氯消毒剂浓度测试纸：测定时，半分钟内，在自然光下与标准色块比较，读出溶液所含的有效成分浓度值。时间超过1分钟，颜色即逐渐消退。化学监测①戊二醛浓度测试纸操作方法：从小瓶中取出一条试纸，并旋紧瓶盖；将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，并及时取出；用吸水纸吸取多余的液体；横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下；等候3~8分钟的颜色变化，判读结果。（低于3分钟，颜色变化不彻底结果不正确；超过8分钟，颜色逐渐褪去，也使判读困难）化学监测戊二醛浓度试纸操作操作结果判定：指示色块变成均匀黄色时，说明溶液的有效浓度高于所测最低有效浓度。指示色块全部或仍有部分白色，说明溶液的有效浓度低于最低有效浓度。医院环境卫生学监测内容包括：A、定期进行空气培养B、定期进行物体表面培养C、定期进行工作人员手培养四、医院环境卫生学监测医院环境分类：Ⅰ类：层流手术室、层流洁净病房Ⅱ类：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、重症监护病房Ⅲ类：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、检验科、各类普通病房和房间Ⅳ类：传染病科及病房四、医院环境卫生学监测卫生部《医院感染管理规范》规定：医院应每月（季度）对手术室、产房、母婴室、供应室无菌区、治疗室、换药室等重点部门进行环境卫生学监测。当有医院感染流行时，怀疑医院环境卫生学因素有关时，应该及时进行监测。四、医院环境卫生学监测A、空气消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。2、采样方法：平板暴露法；（或空气采样机）1）布点方法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁1M处；室内面积＞30m2，设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1M处。2）采样方法：将普通营养琼脂肪平板（直径9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面1.5m，采样时将平板打开，扣放于平板旁，暴露5分钟，盖好立即送检。四、医院环境卫生学监测空气监测：（用直径9cm平皿）空气监测：（平皿打开方式）四、医院环境卫生学监测3、检测方法：经采样的平板直接放入36℃培养箱中培养48小时，观察最后结果平板暴露法结果计算公式：空气中的菌落数（cfu/m3）=采样器各平皿菌落数之和采样光速𝑳/min∗采样时间min∗𝟏𝟎𝟎𝟎4、判断结果：非洁净手术室、产房、烧伤病房≤4cfu/（15min•直径9cm平皿）儿科、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、消毒供应室、急诊室、化验室、各类普通病室及其病房空气中的细菌菌落数总数≤4cfu/（5min•直径9cm平皿）5、注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样B、物体表面消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒处理后进行采样。2、采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个；用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子；剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml的无菌洗脱液试管中，立即送检。门把手等不规则物体表面直接用棉拭子涂擦采样。四、医院环境卫生学监测四、医院环境卫生学监测B、物体表面消毒效果监测方法3、检测方法：1）细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次；用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿；平皿内加入已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；置36℃±1℃温箱培养48小时，计算菌落数。四、医院环境卫生学监测B.物体表面消毒效果监测方法2）致病菌检测：原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。(常规检测如：金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌）四、医院环境卫生学监测B、物体表面消毒效果监测方法4、结果判定：儿科、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、消毒供应室、急诊室、化验室、各类普通病室及其病房物体表面的细菌菌落数总数≤10cfu/（5min•直径9cm平皿）并不得检出致病性微生物为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。C、工作人员手消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒后立即采样。2、手采样方法：被检人五指并拢，用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2）；并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位；将棉拭子投入10ml的（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管内，立即送检。四、医院环境卫生学监测四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法3、检测方法：1）细菌总数检测：将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次；用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿；内加入已熔化的45℃~48℃的营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；置36℃±1℃温箱培养48小时，计算菌落数。四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法3、检测方法：2）致病菌检测：原则：致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。四、医院环境卫生学监测C、工作人员手消毒效果监测方法4、结果判断：母婴同室、婴儿室、新生儿及儿科病房的工作人员手不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌，为消毒合格。D、皮肤粘膜消毒效果监测方法1、采样时间：在消毒后立即采样。2、皮肤粘膜采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处；用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子；剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管中，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。四、医院环境卫生学监测D、皮肤粘膜消毒效果监测方法3、检测方法：同工作人员手。4、判断结果：参照工作人员手的卫生学标准5、注意事项：皮肤粘膜采样处，若表面不足5cm×5cm可用相应面积的规格板采样。四、医院环境卫生学监测谢谢大家！