生药质量标准的制订与控制

1第十四章生药质量标准的制订与控制2第一节影响生药品质的自然因素生药品种对品质的影响植物生长发育对品质的影响植物的遗传与变异因素对品质的影响环境因素对品质的影响3第一节影响生药品质的自然因素生药品种对品质的影响HPLC对国产23种61个样品柴胡中柴胡皂苷a、c、d的测定结果表明，19个产地的柴胡中柴胡皂苷a、c、d之和在0.62％~3.04％，两个产地的狭叶柴胡为0.86％~0.91％，产于云南会泽的多枝柴胡为7.44%，产于云南昆明的韭叶柴胡为4.39%，产于四川汶川的汶川柴胡为4.45％，产于云南会泽的川滇柴胡仅含痕量的柴胡皂苷a、c、d。4植物生长发育对品质的影响HPLC法分析日本和朝鲜的1～6年生100多个人参样品，结果表明，人参皂苷的含量随着生长年限的增加而不断升高，第5年夏末为人参的最佳采收期。在生长第1年，朝鲜和日本产的人参中人参总皂苷含量分别为1.32%和1.54%，随着生长年限的增加，第6年总皂苷含量分别增至3.11%和1.90%。人参根重也随生长年限的增加而增加，特别是在第4和第5年间变化非常明显，根重增加了1倍。5植物的遗传与变异因素对品质的影响UV法和HPLC法对在山西、新疆两个生态地区栽培的22个红花品种中红花总黄酮及其中的芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量测定。结果表明，不同红花品种间总黄酮及芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量存在显著差异，总黄酮含量为1.62%～7.82%，其中以合肥红花、亳州红花、鱼台红花含量较高；山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量为0.085%～0.895%，其中以合肥红花、亳州红花、鱼台红花含量较高。6环境因素对品质的影响光、温度、降水量、土壤、海拔、纬度7第二节生药质量的控制与生药质量标准的制订一、生药质量控制的依据生药质量控制依据三级标准：国家药典标准；局（部）颁标准；地方标准。81.国家药典《中华人民共和国药典》由国家食品药品监督管理局药典委员会编纂出版，经国务院同意由国家食品药品监督管理局颁布执行。现版药典为2005年版，分一部、二部和三部。其中一部收载中药，包括药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。国家药典标准具有法律约束力，是我国药品生产和经营的一级标准。2005年版药典：一部载中药材、油脂等571种，成方制剂575种，共1146种。9部颁标准：收录药典尚未收载的常用而有一定疗效的药品，作为药典的补充。局颁标准：由药典委员会编纂出版，由国家食品药品监督管理局颁布执行。包括中药材局颁标准，蒙、藏、维药局颁标准等。亦有药典的性质，具有法律约束力。10地方标准：各省、直辖市、自治区卫生厅局审批的药品标准，具有地区性约束力。地方标准不能同《药典》或部颁标准相抵触，但在保证执行此两种标准的原则下，报经上级同意可补充制定某些规定。市场上经销的药材必须经各省、市、县药检所鉴定才有效，各级卫生行政部门和市场管理部门只有监督权，而无鉴定权，各地研究机构和大专院校只能帮助鉴定，也无决定权。11二、生药质量控制的主要内容及方法生药检查的内容：性状，鉴别（显微鉴别、理化鉴别、色谱鉴别），检查（杂质、干燥失重、水分、灰分、重金属及有害元素和农药残留），浸出物，含量测定（指标成分、挥发油）。限量检查和定量检查12生药检验的方法：药材取样法、性状鉴别法、显微鉴别法、分光光度法、色谱法、重金属检查法、农药残留量检查法、挥发油测定法、水分测定法、灰分测定法、浸出物测定法、杂质检查法和铅、镉、砷、汞、铜测定法等。13水分测定法生药在测定水分时一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片；直径和长度在3mm以下的可不破碎；减压干燥法需通过二号筛。《中国药典》（2005年版）共有四种标准的水分测定方法，即烘干法、甲苯法、减压干燥法和气相色谱法。14烘干法适用于不含或少含挥发性成分的药品。测定法取供试品2～5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖，在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中的含水量（%）。15甲苯法适用于含挥发性成分的药品。测定法取供试品适量（约相当于含水量1～4ml），精密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满B管的狭细部分。将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。检读水量，并计算供试品中的含水量（%）。16减压干燥法适用于含挥发性成分的贵重药品。测定法取供试品2～4g，混合均匀，分取约0.5～1g，置于已在供试品同样条件下干燥并称重的称量瓶中，精密称定，打开瓶盖，放入上述减压干燥器中，减压至2.67kPa(20mmHg)以下持续半小时，室温放置24小时。在减压干燥器出口连接无水氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称量瓶迅速精密称定重量，计算供试品中的含水量（%）。17气相色谱法色谱条件与系统适用性试验测定法取无水乙醇、对照溶液及供试品溶液各l～5ml，注入气相色谱仪测定。外标法计算供试品中的含水量。方法如下：对照溶液中实际加入的水的峰面积＝对照溶液中总水峰面积－K×对照溶液中乙醇峰面积供试品中水的峰面积＝供试品溶液中总水峰面积－K×供试品溶液中乙醇峰面积。K＝A无水乙醇中水/A无水乙醇中乙醇18灰分测定法总灰分测定法供试品须粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取供试品2～3g(如须测定酸不溶性灰分，可取供试品3～5g)，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至0.0lg)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量(％)。如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或10％硝酸铵溶液2ml，使残渣湿润，然后置水浴上蒸干，残渣照前法炽灼，至坩埚内容物完全灰化。19酸不溶性灰分测定法取上项所得的灰分，在坩埚中小心地加入稀盐酸约l0ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量(％)。20浸出物测定法水溶性浸出物测定法冷浸法取供试品约4g，精密称定，置250～300ml的锥形瓶中，精密加水l00ml，密塞，冷浸，前6小时内时时振摇，再静置18小时，用干燥滤器迅速滤过，精密量取续滤液20ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(％)。21热浸法取供试品约2～4g，精密称定，置100～250ml的锥形瓶中，精密加水50～l00ml，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸l小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(％)。22醇溶性浸出物测定法照水溶性浸出物测定法测定。除另有规定外，以各品种项下规定浓度的乙醇代替水为溶剂。挥发性醚浸出物测定法取供试品(过四号筛)2～5g，精密称定，置五氧化二磷干燥器中干燥12小时，置索氏提取器中，加乙醚适量，除另有规定外，加热回流8小时，取乙醚液，置干燥至恒重的蒸发皿中，放置，挥去乙醚，残渣置五氧化二磷干燥器中干燥18小时，精密称定，缓缓加热至105℃，并于105℃干燥至恒重。其减失重量即为挥发性醚浸出物的重量。23农药残留重点检查有机氯类、有机磷类和拟除虫菊酯类。GC24杂质指基源与规定相符，但其性状或部位与规定不符的药材；来源与规定不同的物质；无机杂质如砂石、泥块、尘土等。25药用部分比例为保证生药质量，有的生药需规定药用部位的比例。例如穿心莲中穿心莲叶不得少于35％。26酸败度酸败是指油脂或含油脂的种子类生药，在贮藏过程中，与空气、光线接触，发生复杂的化学变化，产生特异的刺激气味（俗称“哈喇味”），即产生低分子化合物醛类、酮类和游离脂肪酸，从而影响了生药的感观和内在质量。本检查系通过酸值、羰基值或过氧化值的测定，以控制含油脂种子类的酸败程度。27含量测定以有效成分为对象：有效成分和总成分测定方法：经典分析法、分光光度法、色谱法方法学验证内容有：线性、范围、准确度、精密度（包括重复性和重现性）、检测限、定量限和耐用性等。28含量限（幅）度的制定幅度：毒剧药必须规定幅度，如《中国药典》（2005年版）规定马钱子中含士的宁为1.20～2.20％。限度：如《中国药典》（2005年版）规定黄连中含生物碱以盐酸小檗碱计不得少于3.6％。29指纹图谱（Fingerprint）中药材指纹图谱：中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到能够标示该生药特性的共有峰的图谱。建立生药指纹图谱的目的是为了全面反映生药所含内在化学成分的种类和相对含量，进而反映生药的整体质量。是国际公认的控制天然产物质量的有效方法。30中药材指纹图谱必须同时具有系统性、特征性和重现性。系统性是指指纹图谱反映的化学成分应包括有效组分群中的主要成分，或指标成分的全部。特征性是指指纹图谱中反映的化学成分信息（具体表现为保留时间或位移值）是具有高度选择性的，这些信息的综合结果能特征地区分中药的真伪与优劣。重现性指在规定的方法和条件下，不同的操作者和不同的实验室所建立的指纹图谱的误差应在允许的范围之内。31指纹图谱检测标准1、名称、汉语拼音按中药命名原则制定如：黄芪【名称】黄芪【汉语拼音】Huangqi322、来源原植、动物：科名、中文名、拉丁学名、药用部位、产地、采收季节、产地加工、炮制方法等。矿物药：矿物的类、族、矿石名或岩石名、主要成分、产地、产地加工、炮制方法等。33动、植物药材：应固定品种、药用部位、产地、采收期、产地加工和炮制方法。矿物药：固定产地和炮制、加工方法。供试品的取样：保证供试品的代表性和均一性。34如：黄芪【来源】本品为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao的干燥根。【产地】山西、内蒙古、甘肃。【采收期】10月中旬至11月中旬。【产地加工】除去须根及根头，晒干。35【炮制方法】除去杂质，大小分开，洗净，润透，切厚片，干燥。其性状、鉴别、检查、含量测定、浸出物等项应符合《中国药典》2005年版一部212页黄芪项下的各项规定。363、供试品的制备应根据中药材中所含化学成分的理化性质和检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。制备方法必须确保该中药材的主要化学成分在指纹图谱中的体现。目前仅要求按注射剂制备工艺制备供试品。374、参照物的制备制定指纹图谱必须设立参照物。应根据供试品中所含成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物，如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。参照物的制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行制备。385、测定方法●包括测定方法、仪器、试剂、测定条件等。●根据中药材所含化