中医肝郁脾虚证动物模型的实验研究研究方向:经典方证的临床及实验研究报告人:郭建丽指导老师:冯玛莉研究目标立足于中医经典著作《金匮要略》的发病学说,在此基础上有所创新运用中医的思维来对实验动物进行中医症候肝郁脾虚的研究。研究意义•探索制备肝郁脾虚模型,为肝郁证临床、实验研究提供基础方法。•在中医身心医学理论和实践上、从肝论治精神行为疾患机理的探讨上有所突破,同时初步建立肝郁脾虚证客观评价指标,揭示中医经典证型肝郁脾虚的本质。研究内容肝郁脾虚证动物模型的制备通过情志、药物两大方面进行造模对比研究,以期能够建立理想的中医证候动物模型。动物大鼠:SD种,200±20g;小鼠:昆明种,20±2g;雌雄各半,清洁级。山西省中医药研究院实验动物室提供,实验动物生产许可证、使用许可证编号为SCXK(晋)2010-002研究方案药物与试剂逍遥丸:山西杨文水制药有限公司,批号:101220;国药准字Z14020866;龙胆泻肝丸:神威药业有限公司,批号:10101511;国药准字Z20020013;执行标准中国药典2010年版一部研究方案研究方案药物与试剂利血平注射液:天津金耀氨基酸有限公司,批号国药准字H12020905。CCL4溶液:北京化工厂,批号国药准字Z19970120;研究方案利血平组大鼠:利血平4mg/kg腹腔注射2天小鼠:利血平0.1mg/kg皮下注射14天药物组肝郁脾虚研究方案药物组肝郁脾虚CCL4组大鼠:10%CCL4花生油溶液0.5ml/100kg皮下注射第1、4天小鼠:10%CCL4花生油溶液0.1ml/10kg皮下注射第1、6天研究方案将造模大鼠放入自制的钢丝网笼中,令其身躯及四肢不能自由活动,正常组5只一笼合养,模型组和治疗组实验鼠均每笼一只,每日束缚6h,从9am-3pm。每周给大鼠不定时的禁食两次,造模时间3周。情志组肝郁脾虚研究方案情志组肝郁脾虚将实验鼠随机分为:空白对照组、模型对照组、疏肝方药(逍遥散、龙胆泻肝汤组),实验时分4组进行研究,造模和给药同时进行三周。观测指标•一般外观行为观察:包括眼睛状态、日常理毛皮毛变化、挣扎时的表现、精神状态、大便性状。•精神行为学指标的测试:体重、摄食、摄糖率变化、高架十字迷宫测试、强迫游泳实验、旷场实验、肛温。•相关生化指标的检测:脑组织中5-HT、DA,血液中SOD、MDA等进行检测。•经典疏肝方剂的对抗效应:选用经典名方逍遥丸与龙胆泻肝丸进行对抗研究。研究方案应用SPSS13.0统计软件进行统计学处理,多组间数据采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。数据处理方法研究方案可行性分析•学术理论:立足于中医经典著作《金匮要略》的发病学说,在此基础上有所创新运用中医的思维来对实验动物进行中医症候的研究。•人员配置:项目组成员由有经验的专业技术人员组成、有丰富的实验技能和科研经历,有良好的团队精神,完成多项相关课题。•实验条件:项目组实验动物室具有饲育清洁级实验动物的屏障系统,测试设备齐全,经费来源稳定,保证课题的顺利实施。工作计划•2010.8—2010.9:查阅、汇总资料,完成相关肝郁实验动物模型综述1篇,准备实验材料。•2010.9—2011.1:肝郁实验动物模型确立并进行试验。•2011.2—2011.10:完成行为药理与生化指标等相关指标的测试,书写开题报告并修改。•2011.11—2012.3:完成数据整理、统计并完成论文。感谢您的指导