肠杆菌2

，第九章肠杆菌科第一节概述•一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌•属于肠杆菌科,至少有30个菌属，120个以上的菌种•多数是肠道的正常菌群•少数为致病菌，是人类肠传染病的最重要病原菌常居菌大肠杆菌属变形杆菌属肠杆菌属机会致病菌(一般不致病)致病菌沙门氏菌属志贺氏菌属二大致病菌(肠道传染病)二、共同特征1、相似的形态染色中等大小，G–杆菌，无芽胞，多数有动力乳糖发酵试验——初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌2、简单的培养条件3、活泼的生化反应发酵分解葡萄糖、氧化酶阳性、多数硝酸盐还原试验阳性肠道致病菌肠道非致病菌不发酵乳糖发酵乳糖肠道杆菌IMViC试验特性吲哚甲基红V-P枸橼酸盐埃希菌属++——沙门菌属—+—+志贺菌属+/—+——克雷伯菌属—+/—+/—+/—变形杆菌属+/—+—/+—/+4、抗原构造复杂鞭毛抗原（H）菌体抗原（O）K或Vi抗原5、不强的抵抗力弱、60℃30min水（冰）中生存期较长化学消毒剂敏感6、易变：S-R变异：光滑-粗糙（毒力下降）H-O变异：鞭毛脱落，O抗原外露（动力消失）毒力变异耐药性变异•三、临床意义：•急慢性腹泻•食物中毒•肠热症•呼吸道、泌尿道、伤口等肠道外感染•四、微生物学常规检验•（一）分离培养•血平板、肠道选择培养基•增菌培养基（二）鉴定1、与弧菌科非发酵菌的鉴别2、菌属间的鉴别3、属内鉴定第二节埃希菌属（Escherichia)一、分类与特征埃希菌属有5个种，其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌（E.coli)，是最常见的临床分离菌。[形态及染色特性]革兰氏阴性短杆菌，多数有周鞭毛，有菌毛。有荚膜或微荚膜，无芽胞培养特性：兼性厌氧菌，最适PH值7.0~7.4。营养要求不高1.普通培养基上生长良好，光滑、湿润、半透明、灰白色菌落；2.麦康凯琼脂上形成红色菌落，伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落；3.致病菌株在绵羊血平板上呈β型溶血；麦康凯培养基伊红美蓝琼脂[生化反应]糖发酵试验（发酵乳糖）和IMViC（++--）试验。H2S阴性。尿素分解试验阴性。I(吲哚)、M（MR）、Vi（VP)、C（枸橼酸盐利用试验）[抗原及血清型]（一）抗原1.菌体抗原（O抗原）：其成分为LPS的多糖侧链。173种，耐热，1个菌株仅含1种。2.荚膜抗原（K抗原）：其成分多数为多糖（K88、K99为蛋白质），80种，1个菌株可含1-2种甚至无。根据对热的耐受程度不同分L、A和B型。3.鞭毛抗原（H抗原）：其成分为蛋白质，不耐热，55种，1个菌株仅含1种。（二）血清型（抗原式）表示方法：O：K：H，如：O8：K23(L)：H19[抵抗力]•强•对含氯消毒剂敏感•胆盐、煌绿对该选择性抑制作用。•对氯霉素、链霉菌等敏感，但易产生耐药二、致病性[肠外感染]泌尿系感染主要病原菌，菌血症、肺炎等[肠道感染]根据毒力因子与发病机制不同，将病原性大肠杆菌分为5类：（1）产毒素大肠埃希菌（ETEC）（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）（3）肠侵袭大肠埃希菌（EIEC）（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）：O157：H7（5）肠黏附性大肠埃希菌（EAEC）肠内感染：ETEC——霍乱样腹泻EIEC——菌痢样腹泻EPEC——婴幼儿腹泻EHEC——溶血性尿毒综合征EAEC——婴幼儿持续性腹泻菌株作用部位所致疾病致病机理ETEC小肠旅行者腹泻婴幼儿腹泻ST、LTEPEC小肠婴儿腹泻粘附和破坏上皮细胞EIEC大肠较大儿童成人痢疾样腹泻侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞EHEC大肠出血性结肠炎Vero毒素EAEC小肠急慢性腹泻不清致病性大肠杆菌引起的腹泻三、微生物检验(1)肠道外感染标本1.标本采集血液标本以无菌操作技术采集静脉血5ml注入血液培养瓶。痰标本取清晨口腔清洁后从深部咳出的痰液。脓、分泌物等标本用无菌棉拭子直接采取。2.直接涂片染色检查除血液标本外，脓、痰、分泌物等标本均作涂片染色检查。尿液和各种体液离心后取沉淀物作涂片,可见G-短杆菌。3.分离培养鉴定(1)血液标本接种肉汤增菌培养，待生长后移种血平板。体液标本取离心沉淀物接种于血平板。尿液标本应同时作菌落计数。脓、痰和分泌物标本可直接接种于血平板。35℃孵育18～24h后观察菌落形态。(2)鉴别培养基上挑选有色菌落，用生化反应、血清学试验鉴定到属和种。典型的生化反应特征：TSIA(双糖铁)产酸／产酸产气，CIT(枸橼酸盐)阴性,URE(脲酶)阴性,IND(吲哚)阳性,MOT(动力)+／-,ORN(鸟氨酸)+／-。四、微生物检验(2)肠道内感染标本引起腹泻的ETEC、EPEC、EIEC和EHEC具有与肠道外感染的大肠埃希菌相似的生物学特性，但分别具有特殊的血清型、肠毒素或毒力因子。检验程序同肠道外标本。采集腹泻和食物中毒患者粪便和残留食物，肛拭标本，接种肠道选择鉴别培养基分离培养和鉴定。肠道感染大肠埃希菌鉴定1)ETEC生化反应、血清分型加肠毒素测定：生化反应符合大肠埃希菌，但血清型别与致病没有一定的联系。主要依赖ST和LT肠毒素的检测。2)EPEC生化反应加血清分型：用多价抗血清检测O抗原，进行特异性抗血清的凝集试验，阳性的菌株测定凝集滴度以排除交叉反应，同时做H抗原测定(O：H分型)。3)EIEC生化反应、血清分型加肠毒素测定：用O：H血清分型，赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，常见的血清型0152和0124，与志贺菌相似，主要的鉴别试验是醋酸钠、葡萄糖铵利用试验和粘质酸盐产酸试验，大肠埃希菌三者均阳性，而志贺菌三者均阴性。4)EHEC血清分型加生化反应：应常规作0157：H7的培养，必须经生化反应证实为大肠埃希菌。凡山梨醇阴性的大肠埃希菌0157：H7分离株无须再做毒素的检测，因为均产生Vero毒素。5)EaggEC用液体培养-凝集试验，检测细菌对细胞的粘附性或用DNA探针技术。第二节沙门氏菌属（Salmonella)寄居在人类动物肠道，血清型已发现2400种。绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，人类食物中毒的主要病原之一，在公共卫生上占有重要地位。一、分类与特征：两个种-肠道沙门菌、邦戈沙门菌[形态及染色]与大肠杆菌相似，除鸡沙门菌和雏沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余均以周鞭毛运动。[培养及生化特性]麦康凯培养基：发酵乳糖（大肠杆菌）；不发酵乳糖（沙门氏菌）在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。IMViC试验：-+-+；多数菌株H2S阳性。三糖铁培养基[抗原及血清型]（一）抗原1.菌体抗原（O抗原）：其成分为LPS的多糖侧链。58种，耐热，1个菌株可含多种，以阿拉伯数字表示。2.表面抗原：与毒力有关，又称Vi抗原。有的菌株有，有的菌株无。3.鞭毛抗原（H抗原）：其成分为蛋白质，不耐热，63种,分为两相：（1）第1相（特异相）：小写英文字母表示（2）第2相（非特异相）：阿拉伯数字表示•表示方法：O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原如：1，4，[5]，12：i:1,2有Vi抗原的，则表示为：（二）血清型（抗原式）O抗原：Vi抗原：第1相H抗原：第2相H抗原四、致病性多数具有致病性，是一种重要的人畜共患病原菌，很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间间接或直接传播。根据对宿主适应性不同，可分为：1.专嗜性：如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌2.偏嗜性：如猪霍乱沙门氏菌3.泛嗜性：如肠炎沙门氏菌（一）分离培养：选择培养基（二）生化试验：糖发酵、IMViC试验、H2S阳性（三糖铁培养基）。（三）血清学试验：玻片凝集试验鉴定血清型五、诊断与大肠杆菌的鉴别诊断：被检材料分离培养三糖铁琼脂斜面普通琼脂斜面涂片镜检生化反应血清型鉴定复习思考题1.大肠杆菌和沙门氏菌的血清型表示方法。2.大肠杆菌和沙门氏菌的鉴别诊断要点。