改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。单元4HIV检测简介单元4/PPT04改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。课程目标•界定HIV感染的实验室诊断;•认识不同的HIV抗体试验;•了解试验特征:灵敏度、特异度、预测值、假阳性和假阴性结果;•认识不同的检测策略;•了解和探讨保密、匿名检测和知情同意。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV诊断•HIV感染主要诊断依据是检测感染者血中抗HIV抗体.•有三种主要的HIV抗体检测试验:-酶联免疫吸附试验(ELISA);-免疫印迹试验(WB);-快速HIV试验(RT)。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。ELISA•酶联免疫吸附试验(ELISA);•如果待测血浆中出现HIV抗体,则它会与固定于试验孔内的HIV抗原以及随血浆加入的同类酶联抗原形成夹心;•试验孔经过彻底洗涤后除去未结合的酶。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。ELISA•加入一种显色剂;•结合形式的酶会催化显色反应;•血浆中出现的抗体就会由于颜色变化而被显示出来。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。ELISA酶联免疫吸附实验HIV抗原包被平板病人抗体酶显色剂阳性阴性改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。ELISA平板对照阳性阴性?结果改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。免疫印迹实验(WB)•检测血浆中能与各种病毒蛋白反应的HIV抗体;•不同的病毒蛋白根据其分子量不同在电泳凝胶上被分成不同的条带;•然后将这些蛋白质转移或点到硝酸纤维膜上,与病人血浆共同培养。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。免疫印迹试验(WB)•HIV抗体与特异抗原蛋白反应,并结合到纤维膜目标蛋白所移动到的位置上;•用测色技术检测结合的抗体。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。免疫印迹试验(WB)Gp160Gp120p66p55p51Gp41p31p24p17阳性不确定阴性改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。快速诊断试验(RT)•快速试验应用各种技术,包括:-颗粒凝集法;-侧向流动膜法;-流动穿透膜法;-测试条检测法;•多数试验灵敏度和特异度分别达到99%和98%。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。快速诊断试验(RT)•优点:-操作快;-不需定量;-不需专门设备和人员培训;-同一天出结果。•为保证试验质量,必须用WHO推荐的快速HIV抗体试验。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。试验特征•每一个生物学试验都有可能产生假阳性和假阴性结果;•生物学试验的精确度可用三个指标来描述:-灵敏度;-特异度;-预测值。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。灵敏度•一个试验检出阳性的能力;•高灵敏度的试验很少产生假阴性结果;•高灵敏度的试验用于绝对避免假阴性结果的情况,如输血服务。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。特异度•一个试验检出真阴性的能力;•高特异度的试验很少产生假阳性结果;•高特异度的试验用于绝对避免假阳性结果的情况,如个体的HIV感染的诊断。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV检测结果的含义•阴性结果:未检测到HIV抗体-受试者未感染HIV或体内尚未来得及对病毒产生抗体•阳性结果:检测到HIV抗体•不确定:受试者由于急性血清阳转,在血液内有抗体,其与HIV抗体十分近似。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。确认试验通常可排除假阳性结果HLA细胞抗原可能会交叉反应,并导致对患有以下疾病的患者的ELISA试验或快速试验产生假阳性结果:•风湿性关节炎•多发性硬化•狼疮•1类糖尿病•艾迪生病•关节强硬性脊椎柱炎•慢性肝炎•恶性肿瘤•严重肾病以及有以下经历的人:•过去30天内接受流感疫苗注射•丙种球蛋白注射•最近进行了输血或器官移植改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV抗体检测不能用来诊断:HIV急性(新近)感染或新生儿HIV感染改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV急性感染“窗口期”:•从首次急性感染HIV到病人血液中可检测出HIV抗体这一时间段;•尽管HIV抗体检测阴性,但HIV病毒在机体中快速复制,窗口期病人有高度传染性。•一般持续12周,如用较敏感HIV抗体试验可能会缩短些(尤其是与p24抗原并用,见下文)。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。新生儿HIV感染的诊断•由于母体抗体可以输送给新生儿,因此抗体检测不能诊断新生儿HIV感染;•18个月以内均可检测到来自母亲的抗体;•新生儿HIV感染的早期检测的非抗体试验包括:-HIVp24抗原;-病毒培养;-病毒基因的检测(HIVDNA或HIVRNA)。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。保密和匿名检测•自愿–求询者在检测前咨询后,在无强迫的情况下,必须提供作HIV检测的知情同意;•保密–使用三种常用的方法来保证:-有关联的检测;-有关联的匿名检测;-无关联的匿名检测。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV抗体筛查检测流程样品初筛检测筛查试剂阳性反应阴性反应重复检测原有试剂加另外一种筛查试剂一阴一阳均阴性反应均阳性反应送确认实验室确认报告阴性改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV抗体确认检测流程阳性反应免疫印迹法(WB,HIV-1/2混合型)HIV-1阳性反应不确定反应应出现HIV-2指示条带报告HIV-1阳性不确定反应阴性反应报告阴性每3个月随访1次,共2次,仍属可疑,则报告阴性;如随访期间HIV抗体出现阳性反应则报告阳性。随访期间可根据需要,检测病毒核酸和或P24抗原,作为辅助诊断。阴性反应报告阴性筛查试验阳性反应样品报告HIV-2血清学阳性免疫印迹法(WB,HIV-2)改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。HIV抗体检测的替代策略目的地区人群替代策略艾滋病疫情报告任何地区任何人群替代策略ⅠVCT高流行地区高危人群替代策略Ⅱ高流行地区一般人群替代策略Ⅲ其它地区任何人群替代策略Ⅲ改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。替代策略Ⅰ(HIV感染疫情报告检测策略)检测流程改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。替代策略Ⅱ(高危人群VCT检测策略)检测流程改编自WHO/SEAR0VCT师资培训材料。替代策略Ⅲ(一般人群VCT策略)检测流程本文来自网络,请不要使用盗版文档,尊重作者的辛苦劳动,谢谢Gaoqs.com我爱朱丹老婆20100808080808080808080808080808080808080808080808080808080808080Lvdd我爱你ZDLP