SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用

SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用血细胞分析仪的发展简史二分群时代：淋巴细胞、非淋巴细胞三分群时代：（大细胞、中间细胞、小细胞）五分类时代：淋巴、单核、中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒五分类血球方法学概览方法学–第一代：纯物理原理(CD-3700，SE-9000)–激光、射频、电阻–第二代：物理+化学（SYSMEXSF-3000，）–酶染色、颗粒染色–特异性溶血–第三代：物理+分子生物学（SYSMEXXT-1800i/XT-2000i）–分子生物学技术（DNA、RNA染色）内容XT-2000i检测报告组成白细胞系统的检测原理和临床病例分析红细胞系统参数的临床意义网织红细胞的参数血小板系统参数的临床意义标本采集的要求XT-2000i-规格-参数30项研究参数2项（IG＃，IG％）处理速度:80标本/小时检测模式:4种模式（CBC,CBC+DIFFCBC+RET,CBC+DIFF+RET标本量:手动进样:85ul自动穿刺:150ul末梢血预稀释进样：40ul+160ul稀释液XT-2000i报告单的组成（一）2个直方图、4个散点图（二）30项数字结果：RBC、WBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD、RDW-CV、MPV、PCT、PDW、P-LCR、NEU%/#、MNON%/#、LYM%/#、EO%/#、BA%/#、RET%/#,IRF,LFR,MFR,LFRXT分析流程检测模块分析原理检测通道图形RBC/PLTWBC鞘流电阻法半导体激光FCMRBC/PLT通道PLT直方图参数PLTHGBHGB通道比色法HGB全血标本DIFF通道RET通道DIFF散点图WBC#BasoRETPLT-OIRFRET散点图LymphMonoNeut+BaEO*IG-researchRET半导体激光FCMWBC/Ba通道WBC/BA散点图RBC直方图RBConlyforXT-2000i白细胞系统的检测原理和临床病例分析白细胞系统参数DIFF散点图、WBC/BASO散点图ＷＢＣ：白细胞总数ＮＥＵＴ：中性粒细胞ＬＹＭＰＨ：淋巴细胞ＭＯＮＯ：单核细胞ＥＯ：嗜酸性粒细胞ＢＡＳＯ：嗜碱性粒细胞＃：绝对值％：百分数半导体激光和流式细胞的应用侧向散射光RNA/DNA含量细胞内部结构细胞体积大小前向散射光侧向荧光激光束分光镜WBC/BASO原理步骤1:吸入标本–通过SRV吸入标本血样和试剂步骤2:溶血–STROMATOLYSER-FB使红细胞溶血»除嗜碱性粒细胞以外的WBC收缩步骤3:分析–分析前向散射光和侧向散射光的散射图BASO试剂系统BASOotherWBCRBCHemolysed(Acid,hypotonicsolution)保持原形脱浆收缩溶血WBCDIFF分类通道原理步骤1:吸入–从SRV吸入血液和试剂步骤2:溶血–STROMATOLYSER-4DL溶解RBC-WBC膜被轻微损伤，打孔»(acid,hypotonicsolution)步骤3:染色(RNAandDNA)–STROMATOLYSER-4DS染色»染液:荧光染料(PolymethineDye)步骤3:分析–分析前向散射光和荧光的散点图溶血(WBCmembraneisweaklydamaged)染色RNADNADiff试剂系统Blast原核细胞,IG.未成熟粒细胞异常淋巴细胞等高荧光浓度低荧光浓度高荧光浓度正常细胞WBC分类-散点图（正常标本）淋巴单核中性嗜酸侧向荧光(RNA,DNA)红细胞碎片侧向散射光(内部结构)分类-散点图(异常标本)淋巴单核中性嗜酸侧向荧光(RNA,DNA)红细胞碎片侧向散射光(内部结构)异型淋巴IG核左移出现幼稚粒细胞的病例该病例为儿童急性粒细胞白血病（AML-M2），患儿因突发高热而前来就诊，首次血常规检查发现，外周血原始细胞占71%，幼稚红细胞占2%。)出现幼稚淋巴细胞的病例急淋（ALL）-L1急淋（ALL）L1红细胞系统参数直方图ＲＢＣ：红细胞总数ＨＧＢ：血红蛋白浓度ＨＣＴ：红细胞压积ＭＣＶ：平均红细胞体积ＭＣＨ：平均血红蛋白量ＭＣＨＣ：平均血红蛋白浓度ＲＤＷ：红细胞体积分布宽度三种直方图的典型变化-缺铁性贫血的直方图-特点：曲线波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。三种直方图的典型变化-巨幼红细胞贫血治疗前的直方图-特点：曲线波峰右移，波底增宽，显示明显的大细胞不均一性。三种直方图的典型变化-轻型β-海洋性贫血的直方图-特点：小峰左移，峰底变窄，典型的小细胞均一性贫血。红细胞体积分布宽度的临床意义一、定义：红细胞体积分布宽度（RedbloodcellsvolumeDistributionWidth）是反映周围血红细胞体积异质性的参数，用所测单个红细胞体积的变异系数来表示（CV=SD/X也可用SD表示）。RDW-SD指把直方图顶点的高度定为100%，自下而上高度为20%时的红细胞分布宽度；RDW-CV指假定红细胞直方图分布曲线为正规分布曲线时，把标准偏差除以MCV，再乘以100所得出的数值。红细胞体积分布宽度RDW的临床意义缺铁性贫血与轻型地中海的鉴别诊断有关缺铁性贫血的早期诊断与治疗用于贫血的形态学分类(MCV/RDW)缺铁性贫血与轻型地中海贫血的鉴别RDW是两者鉴别的参考指标：1、IDA患者RDW100%升高；2、轻型地中海贫血患者基本正常缺铁性贫血的早期诊断Uchida对1648例学生进行了各项指标的观察，结果显示：MCVRDW正常人（89±4fl）（12.7±0.7）%隐性缺铁前期（89±4fl）（13.7±0.7）%隐性缺铁期(86±6fl）（14.0±1.5）%IDA患者79fl（15.6±1.7）%缺铁性贫血的治疗过程贫血的形态学分类(MCV/RDW)MCVRDW形态学分类常见疾病分类正常正常正细胞均一性急性失血性贫血正常异常正细胞不均一性早期缺铁性贫血增高正常大细胞均一性部分再生障碍性贫血增高异常大细胞不均一性巨幼细胞性贫血减低正常小细胞均一性轻型β地中海贫血减低异常小细胞不均一性缺铁性贫血RET检测参数DNA/RNA核酸荧光染色参数：RET,IRF,LFR,MFR,HFR,PLT-O•内置全自动RET分析及成熟度分类•激光染色法检测PLTRET试剂系统Staining:Ploymethine:RNAOxazine:DNARETWBCRBCHighLevelFluorescenceLowLevelFluorescenceVeryHighLevelFluorescenceReagent:RETSEARCHII(Diluent+Dye)Fluorescence(RNA)RET-散点图ForwardScatter(Volume)MFRHFRLFRPLTRBC-ORETWBCIRF网织红细胞检测的临床意义RET，IRF(MFR+HFR)RET是一个独立的监测骨髓造血功能恢复的参数IRF是评估造血功能恢复的可靠依据IRF是评估造血功能恢复比RET更敏感的指标RET增高：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血，急性失血等明显增高。增生性贫血，骨转移等轻度升高。RET减少：肾脏，内分泌疾病，溶贫再生危象，再生障碍性贫血，放化疗后等。PLT-I报告PLT-O用于明显的病理性标本正常当明显病理性标本存在RBC碎片，异常直方图，等等PLT-O•XT-2000i以电阻抗法PLT-I为准•当出现异常标本时，XT-2000i会转换用光学法PLT-O检测PLT-I/O散射图直方图(直流阻抗法)散射图(光学法)PLT-I/PLT-O两种检测方法PLT-I:RBC/PLT通道电阻抗每次检测20-25万个细胞，而RET通道内激光法每次只能检测60000个细胞，其中PLT3000个电阻抗法的PLT数目的准确性与重复性比较好PLT-O:RET/PLT-O通道激光法对PLT的形态鉴别能力强异常标本中的小RBC、WBC碎片、或PLT数目较少时，激光法能更准确地将PLT鉴别出来PLT-I和PLT-O转换的标准1.红细胞低鉴别线RL(%)10%2.血小板低鉴别线PL(%)9%3.血小板高鉴别线PU(%)39%4.血小板高鉴别线PU(%)23FL和PU20%5.存在细胞碎片6.存在红细胞凝集7.血小板高鉴别线PU%13%和PLT35FL45%和PLT-I#80x109/L8.PLT-I50x109/L(该项数值可由用户自定义)9.细胞碎片(RET通道)和PLT-I/PLT-O115%血小板系统参数直方图ＰＬＴ：血小板计数ＰＤＷ：血小板体积分布宽度ＭＰＶ：平均血小板体积PCT：血小板压积Ｐ－ＬＣＲ：大血小板比例血小板直方图的临床意义在多种疾病中PLT直方图均可发生改变，如：特发性血小板减少性紫癫，特点是血小板数量减少，巨大血小板增多，直方图表现为曲线峰右移，而窄峰图则常因PLT减少所致。影响因素：曲线峰左移，可能存在细胞浆碎片；曲线峰右移，常表示存在异常红细胞（裂细胞或极端小的红细胞）。P-LCR参考值：0.13-0.43体积超过12fl的PLT占总PLT的比率对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以及监视血小板造血功能等有意义MPV参考值：9.4-12.5fl是反映骨髓造血功能是否良好的指标。用于病情观察：白血病化疗时，MPV增加是骨髓恢复的第一个征兆PLTMPV常见疾病正常增高慢粒、骨髓纤维化等增高正常骨髓增生性疾病增高增高反应性血小板增多症等降低增高外周血血小板破坏增多降低降低艾滋病、再生障碍性贫血等MPV与PLT联合检测的临床意义标本采集要求最佳血液标本——静脉血静脉血和末梢血因采血方式和部位的不同而存在较大差别：血小板PLT：静脉血＞＞末梢血白细胞WBC：静脉血＜末梢血红细胞RBC：静脉血略＜末梢血针刺采血：①皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓②活化血小板，使血小板聚集③同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流五分类血液分析仪标本采集要求1、最好一次穿刺采血成功2、使用封闭式真空注射器和厂家生产的EDTA-K2抗凝管3、采血后应立即颠倒混匀数次，使血液与抗凝剂充分混合，防止血液凝集4、只能在室温下保存标本，低温（4℃）保存可使血小板计数结果减低HST流水线系统Alpha流水线系统XS-系列仪器XS-1000iXS-800iXS系列的特点半导体激光核酸荧光流式技术微量末梢血20uL进行WBC五分类和计数精确定量的幼稚粒细胞参数IG最新的XP中文操作系统操作维护简便超低运行成本CBC＋DIFF2.62元/标本SNCS在线质控远程维护功能追求新境界，创造新价值谢谢各位！