透射电镜制样流程

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资源描述

透射电镜样品制备过程组织取材(60s内),体积1mm3,之后进行如下步骤1)前固定:3%戊二醛2h或过夜。2)漂洗:磷酸缓冲液,3次,10min/次。3)后固定:1%锇酸固定液,2h。4)漂洗:(同上)。5)梯度脱水:50%丙酮,70%丙酮,80%丙酮,90%丙酮两次,各10min。100%丙酮两次,各15min。6)渗透:丙酮/包埋剂(1:1,1:2),室温各1h。丙酮/包埋剂1:3,4度过夜。纯包埋剂,4度过夜。7)包埋:纯包埋剂(37度,45度,60度各24h)。取出包埋块,进行超薄切片,片厚70nm。分别采用醋酸双氧铀对切片进行染色30min,双蒸水漂洗3-5次,之后用柠檬酸铅染色10min,双蒸水漂洗3-5次。待切片干燥后,透射电镜观察。切片机型号:LeicaUC7超薄切片机,速度1mm/s.透射电镜型号:日立高新HT7700,电压80kv电流10μa.

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