果胶含量检测试剂盒说明书-微量法

北京索莱宝科技有限公司第1页，共2页果胶含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。货号：BC1405规格：100T/48S产品内容：试剂一：标准液1mL×1支，4℃保存。试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。产品说明果胶是一种植物胶体，分布于果蔬类植物中，存在于植物的细胞壁和细胞内层。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，主要成分是半乳糖醛酸，其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂缩合生成紫红色化合物，在530nm处有最大吸收峰。测定样品中半乳糖醛酸的含量，即可确定果胶的含量。需自备的仪器和用品研钵、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓硫酸和蒸馏水。操作步骤：一、样品处理将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比列（建议取约0.1g样品，加入1mL蒸馏水），充分匀浆，8000g、4℃离心10min，取上清液待测。二、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm处，蒸馏水调零，试剂一和试剂二37℃预热10min以上。三、测定操作表（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（μL）空白管标准管对照管测定管待测样本5050北京索莱宝科技有限公司第2页，共2页试剂一50蒸馏水5050试剂二505050混匀浓硫酸400400400400充分混匀，95℃水浴5min后，冷却至室温，取200μL置微量石英比色皿或96孔板中，测定530nm处吸光值，空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为A1、A2、A3和A4。若A大于1，需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释10倍或20倍）注意：空白管和标准管只要做一管，每个测定管需设一个对照管。四、计算公式果胶含量(mg/mgprot)=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr×稀释倍数果胶含量（mg/g鲜重）=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数C标准：标准管浓度，0.05mg/mL；V1：加入样本体积，0.05mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。注意：最低检测限为50µg/g鲜重或0.5µg/mgprot.