庆大霉素的制备工艺

庆大霉素的制备工艺庆大霉素的制备工艺庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素,主要用于治疗细菌感染，尤其是革兰氏阴性菌引起的感染。庆大霉素能与细菌核糖体30s亚基结合，阻断细菌蛋白质合成。庆大霉素是为数不多的热稳定性的抗生素，因而广泛应于培养基配置。庆大霉素化学式化学式：庆大霉素的性状性状：常用其硫酸盐，为白色或类白色结晶性粉末；无臭；有引湿性。在水中易溶，在乙醇、乙醚、丙酮或氯仿中不溶。庆大霉素的功能主治功能主治：对大肠杆菌、产气杆菌、克雷白杆菌、奇异变形杆菌、某些吲哚变形杆菌、绿脓杆菌、某些奈瑟菌、某些无色素沙雷杆菌和志贺菌等革兰阴性菌有抗菌作用。适用于敏感细菌所致的新生儿脓毒症、败血症、中枢神经系统感染（包括脑膜炎）、尿路生殖系统感染、呼吸道感染、胃肠道感染（包括腹膜炎）、胆道感染、皮肤、骨骼、中耳炎、鼻窦炎、软组织感染（包括烧伤）、李斯特菌病。硫酸庆大霉素工艺流程图发酵用小单胞菌一级种子罐二级种子罐三级种子罐四级种子罐酸化中和交换分离漂洗产品浓缩喷雾干燥成盐脱色压滤洗涤洗脱脱色无菌接入培养48小时左右，pH自然，36-37℃培养24小时左右，pH6.8-7.4培养24小时左右，pH6.7-7.4培养4天，34-35℃洗脱收率≥98%浓缩收率≥88%炭脱收率≥95%调pH至5.0-5.8喷速：20-80L/h进塔温度：116-135℃喷雾收率≥90%孢子悬浮液的制备流程及工艺要求设备：1、蒸汽灭菌柜2、双人净化工作台孢子悬浮液的制备操作步骤1.分装纯化水至三角瓶，每瓶装150mL左右。2.组装接种瓶及接种皮管，组装严密，包扎结实。3.以上器材及接种用具灭菌，125±1゜C，60min。4.在缓冲间穿好无菌衣，戴上无菌口罩，进入洁净室，符合人流﹑物流进出程序。5.用酒精棉球擦拭超净台面﹑双手，先擦台面，后擦手。6.开启超净台通风，观察风速是否正常，将接种瓶、皮管、无菌水、接种铲及斜面摆在洁净台上。7.将灭菌纯化水倒入茄子瓶中，一瓶纯化水倒两只茄子瓶。8.用接种铲将孢子刮下制成孢子悬浮液，用力适度，勿刮出培养基碎屑。9.打开接种瓶瓶口，将孢子悬浮液全部倒入接种瓶中，注意不要倒在瓶口处，然后重新组装好接种瓶及接种皮管。10.制备完毕关闭洁净台，出洁净室，符合人流、物流进出程序。种子的发酵培养以一级种子为例说明操作步骤1.校正量具，小于1kg用台秤，大于1kg用磅秤。2.先后将淀粉，玉米粉，硝酸钾，蛋白胨，轻质碳酸钙称好后装在编织袋中，准备投料。3.向事先冲洗干净并压净的一级罐中加水至埋住下层搅拌桨时，开搅拌，然后将称好的物料缓缓加入罐中，再分别量取2%氯化钴溶液和豆油加入罐中，加水至所需体积。上紧罐盖，准备灭菌。4.打开罐底阀，放掉夹套水，夹层通蒸汽预热至90℃后关闭。5.由取样管、压出管、进气管3路进蒸汽，进行直接蒸汽灭菌。升温，当罐压达0.1MPa时，保压30min。保压过程重要适当控制进气、排气。6.灭菌结束，先关排气阀，后关进气阀，当罐压低于空气分过滤器压力时，再开空气进气阀，控制排气要适当。7.打开夹层冷水阀，关闭罐底阀，打开回水阀降温至38℃时关闭。消罐人员停搅拌，进行压差接种。8.消罐人员停搅拌，将罐压降至0.04Mpa,看罐人员配合种子组人员接种，先取无菌样，接种前点燃火圈烧接种口，对接种口消毒，火焰要大，要均匀。用火圈保护打开接种咀套管。9.种子人员一手持接种瓶，一手将接种皮管插入接种咀。种子罐放在木盒或双层布袋中以防爆裂，关闭种子罐机械搅拌。当罐压降至0.03-0.04MPa，种子组人员在火焰保护下将接种头上的纱布迅速插入接种口上。10.种子人员高举接种瓶并倒置，再由消罐人员慢慢降低罐压至0.04Mpa,借压将接种瓶中的孢子悬液引入罐内。一次接种不完可以重复多次至接种完毕。罐压应维持在0.04-0.08Mpa之间。11.接种完毕，先关接种阀，再拔接种皮管，并拧上接种咀套管。12.调节进排气控制罐阀，空气流量达到工艺要求，并开搅拌，交值班培养参数控制培养时间罐温罐压空气压力空气流量搅拌时间48h左右37℃0.06Mpa0.1Mpa30m3/h培养时间罐温罐压空气压力空气流量搅拌时间24h左右37℃0.03Mpa0.7Mpa170m3/h一级种子二级种子提炼车间生产概况提炼组的任务是将庆大霉素从来自发酵车间的发酵液中提炼出来，同时也负责本车间低单位稀氨洗脱液和成盐炭脱车间活性炭滤饼中庆大霉素的提取，并最终得到含庆大霉素的洗脱液，送入浓缩岗位浓缩。提炼车间流程图氨回收罐回收低单位收集罐树脂分离器酸化罐洗脱液贮灌漂洗罐阳离子交换柱发酵液稀氨洗涤生物效价低于200u/ml阳串阴测定生物效价高于600u/ml低于600u/ml回收,套用下一批回收套用下一批浓氨洗脱脱色除杂质分离树脂复合物提炼车间流程简介酸化、中和加树脂吸附发酵液分离阳离子交换柱饮用水疏松稀酸洗0.05M盐酸、0.02M氯化铵除钙离子、镁离子纯化水冲洗除氯离子0.08-0.12M稀氨洗1:20VVM-1:40VVM除蛋白质等杂质调节pH值至碱性pH8.5-94.5%-5.3%浓氨洗脱解析收集旋光效价1000u/mL经阳串阴管道进入阴离子交换柱9500-12000L酸洗、碱中和再生树脂低单位洗脱液贮罐旋光效价200-1000u/mL3000-4000L作阳离子交换柱洗脱液回收、氨捞（再吸附)酸化罐树脂分离器饱和树脂漂洗柱漂洗高单位洗脱液脱色解析完毕后水洗使树脂再生压回酸化罐旁的树脂计量槽需要时通空气赶气泡加入浓氨水洗脱液贮罐送入浓缩车间阴离子交换树脂再生含部分庆大霉素的洗脱液流速1：100-150VVM庆大霉素的酸化中和操作方法：1.备好酸化用盐酸、中和用10mol/LNaOH，压备用树脂入计量槽；2.接发酵液20吨左右入酸化罐，缓缓加入盐酸（约1.5吨），调pH1.4-3.0，加入泡敌消沫，计量体积。该过程目的在于裂解菌丝体，释放其中的庆大霉素，以提高收率。3.加适量饮用水稀释（20%左右），用10mol/LNaOH中和pH6.4-6.8；4.按6.5万u/mL(50吨、45吨罐)或6万u/mL（30吨、65吨罐）计量加入732阳离子交换树脂。30min后复测pH，控制在6.4-6.8。交换吸附5-8h。取样送化验组测生物效价。庆大霉素的洗涤操作方法:1.配制0.5mol/LHCl与0.2mol/LNH4Cl混合液，0.08-0.12mol/L的稀氨。2.每柱装饱和树脂1100-1500L，用饮用水及空气疏松树脂并用饮用水赶走气泡。3.通入稀酸洗涤液至无钙、镁离子，完成后用饮用水冲洗至无Cl-，再用0.08～0.12mol/L稀氨水洗至pH8.5～9.0。庆大霉素的洗脱和脱色操作方法：1.配制4.5-5.3%的浓氨。2.用纯化水疏松并冲洗树脂中氮根。3.用4.5%-5.3%浓氨水解吸至洗脱液旋光效价控制在1000u/mL。4.第2罐透光度低于70%时，用2mol/LHCl和2mol/LNaOH对711脱色树脂进行再生，使其可以循环使用。庆大霉素的成盐碳脱成盐配置人员穿好防护用品，先抽入总体积2/3的纯化水，在夹层冷却下再缓慢抽入1/3的浓硫酸，搅拌均匀，冷却应在0.5小时以上。上批装塔的浓缩液与本批浓缩液混合后压入成盐炭脱罐。在不断搅拌及夹层通冷却水冷却下缓慢加入6mol/L的硫酸液，调pH至5.0-5.8，当pH在5.0左右时取样检测。炭脱：成盐液温度降到45℃以下时，加入767型针用活性炭进行炭脱，加炭量为成盐液体积的5％左右，在搅拌及夹层通蒸汽加热下，升温至65±5℃，保温45min后，压缩。第一遍炭脱液由储罐压入成盐炭脱罐调pH在5.3左右，同法进行第二遍炭脱。滤饼用预热的纯化水清洗至尾样在500u/mL以下，浓缩至比重1.10-1.13，套用于下一批。炭脱脱率在95％以上。精炼车间浓缩液硫酸储罐成盐碳脱罐压滤器炭脱液储罐透光率《92%浓缩车间庆大霉素的炭脱流程图庆大霉素的精炼本喷雾工艺流程的操作要求如下：1．所用设备有喷雾液计量罐、折叠式预过滤器、折叠式过滤器、液体过滤器、离心喷雾塔、旋风分离器、捕集器。计量罐微孔折叠式过滤器液体过滤器离心喷雾塔旋风分离器袋式捕集器2．清洁：用纯化水旋转冲洗喷雾液计量罐内壁，注意对折叠式预过滤器和折叠式过滤器进行清洁时顶洗水要回收，喷雾液计量罐、折叠式预过滤器、折叠式过滤器、液体过滤器要纯蒸汽消毒，而离心喷雾塔、旋风分离器、捕集器则要热干空气消毒3．消毒：接收料液前对系统相关设备用过滤蒸消，条件为过滤器消毒压力为0.1MPa、30min，过滤器过料压力为0.1MPa，储罐、管道消毒压力为0.11-0.13MPa、60min。4．喷雾：（1）符合要求的炭脱液经钛棒过滤器抽压至炭脱液计量罐，用无菌空气经0.45μm、0.22μm的滤膜过滤至喷量液计量罐中，再经0.22μm的滤膜输送至离心喷雾塔，干粉由塔底收集至容器内；（2）喷塔条件的控制：热空气流量：2500～3500m3/h进塔温度：116～135℃出塔温度：64～85℃喷头压力：0.32～0.38MPa喷速：20～80L/h（3）操作人员进入洁净区，（4）按规程收粉，注意先检查干粉，然后，用75%酒精消毒双手、工具、操作面，然后戴上消过毒的乳胶手套操作，收粉结束时及时清场。废水处理方法：1、物理处理方法2、化学处理方法3、生物处理方法4、特殊方法—生物接触氧化法参考文献1、百度百科2、百度文库3、百度图库