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生物选修3知识点专题1基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_________________，赋予生物以_____________，创造出__________________________。基因工程是在_____________上进行设计和施工的，又叫做_____________。（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（1）来源：主要是从_____________中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种______的核苷酸序列，并且使每一条链中_______部位的两个核苷酸之间的_____________断开，因此具有_____性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：_________和________2.“分子缝合针”——_________(1)两种DNA连接酶（和）的比较：①相同点：都缝合_________键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于_________，只能将双链DNA片段互补的_______之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合_______，但连接平末端的之间的效率较_。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将_________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_________的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——_________（1）载体具备的条件：①___________________________。②___________________________。③___________________________。（2）最常用的载体是_____,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有_________能力的_________DNA分子。（3）其它载体：___________________________(二)基因工程的基本操作程序第一步：__________________1.目的基因是指：。2.原核基因采取获得，真核基因是_________。人工合成目的基因的常用方法有_________和_________。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：_________（2）过程：第一步：加热至90～95℃使________；第二步：冷却到55～60℃，_________________；第三步：加热至70～75℃，热稳定酶从起始互补链的合成。第二步：_______________1.目的：使目的基因在受体细胞中_______________，并且可以，使目的基因能够。2.组成：__________＋__________＋__________＋__________（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的__________，是__________酶识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。常用的标记基因是__________。第三步：____________________1.转化的概念：是进入内，并且在受体细胞内__________和__________的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是__________，其次还有__________和__________等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是。此方法的受体细胞多是__________。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是、、，最常用的原核细胞是__________，其转化方法是先用_____处理细胞，使其成为__________，再将_________溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含的依据是。第四步：____________________1.首先要检测上是否插入了，方法是采用____________________2.其次还要检测____________________，方法是采用作探针与杂交。3.最后检测，方法是从转基因生物中提取，用相应的__________进行____________________。4.有时还需进行水平的鉴定。如。（四）蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过____________________，对现有蛋白质进行，或制造一种__________，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产的蛋白质）A为__________B为。专题2细胞工程（一）植物细胞工程1.理论基础（原理）：__________全能性表达的难易程度○1受精卵○4生殖细胞○2胚胎干细胞○5干细胞○3体细胞排序______________________________植物细胞_____动物细胞（大于或小于）2.植物组织培养技术()()（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞()试管苗―→植物体（2）用途：微型繁殖、__________、__________、__________、细胞产物的工厂化生产。（3）地位：是培育转基因植物、_______________培育植物新品种的最后一道工序。3.植物体细胞杂交技术（1）过程：（2）诱导融合的方法：物理法包括等。化学法一般是用____________________作为诱导剂。（3）意义：______________________________（二）动物细胞工程1.动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成__________，然后放在适宜的__________中，让这些细胞。（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用____________________处理分散成__________→制成__________→转入培养瓶中进行__________培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续__________培养。（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就，称为__________。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面__________时，细胞就会，这种现象称为____________________。（4）动物细胞培养需要满足以下条件①的环境：培养液应进行______处理。通常还要在培养液中添加一定量的__________，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止_______________。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入__________等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。④气体环境：95%＋5%。O2是__________所必需的，CO2的主要作用是__________（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、__________、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为__________核移植（比较容易）和__________核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞____________________；卵(母)细胞。（3）体细胞核移植的大致过程是：@为___________________○b为____________________。（4）体细胞核移植技术的应用：①加速家畜改良进程，促进良畜群繁育；②保护物种，增大存活数量；③生产珍贵的；④作为的供体；⑤用于的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着问题、表现缺陷等。3.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称___________，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为___________（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有___________、、等。（3）动物细胞融合的意义：克服了______________________，成为研究、、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比项目细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合植物细胞杂交，灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一4.单克隆抗体（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一__________。从血清中分离出的抗体、、。（2）单克隆抗体的制备过程：（3）杂交瘤细胞的特点：既能___________，又能产生___________。（4）单克隆抗体的优点：_________________________________。（5）单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：准确识别各种物质的细微差异，并跟发生特异性结合，具有、、、的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗，可制成“”，也有少量用于治疗其它疾病。专题3胚胎工程（一）动物胚胎发育的基本过程1、胚胎工程是指对动物______________________所进行的多种显微操作和处理技术，如___________、___________、___________、___________等技术。经过处理后获得的，还需移植到___________生产后代，以满足人类的各种需求。2、动物胚胎发育的基本过程（1）受精场所是母体的___________。（2）卵裂期：特点：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积______________________。（3）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。是___________（全能或者已分化）细胞。（4）囊胚：特点：细胞开始出现_______（该时期细胞的___________）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为___________，将来发育成胎儿的各种组织。中间的空腔称为___________。（5）原肠胚：特点：有了____（几层）胚层的分化，具有腔和腔。（二）胚胎干细胞1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于______________________中分离出来。2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为___________小，___________大，___________明显；在功能上，具有发育的，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以而不发生，可进行保存，也可进行。3、胚胎干细胞的主要用途是：①可用于研究哺乳动物；②是在体外条件下研究的理想材料，在培养液中加入，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示的机理提供了有效的手段；③可以用于治疗人类的某些，如帕金森综合症、少年糖尿病等；④利用可以被诱导分化形成新的的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；⑤随着组织工程技术的发展，通过ES细胞，定向培育出___________，用于___________，解决供体器官不足和器官移植后___________的问题。（三）胚胎工程的应用1.体外受精和胚胎的早期培养(1)卵母细胞的采集和培养：主要方法：用___________处理，使其排出更多的卵子，然后，从___________中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从___________中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经后，才能与受精。(2)精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行___________处理。(3)受