DNA拷贝数的计算方法

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DNA拷贝数的计算方法1A260吸光度值=dsDNA50ug/ml=ssDNA33ug/ml=ssRNA40ug/ml核酸浓度=(OD260)×(dilutionfactor)×(33/40/50)=ng/ul平均分子量(MW)代表克/摩尔,单位道尔顿(dolton),即1dolton=1g/mol1摩尔=6.02×1023平均分子量(MW):dsDNA=(碱基数)x(660道尔顿/碱基)ssDNA=(碱基数)x(330道尔顿/碱基)ssRNA=(碱基数)x(340道尔顿/碱基)拷贝数计算公式:(6.02x1023次拷贝数/摩尔)x(浓度g/ml)/(MWg/mol)=copies/ml.(6.02x1023次拷贝数/摩尔)x(浓度g/ml)/(DNA长度×660)=copies/ml.(6.02x1023次拷贝数/摩尔)x(ng/ul×10-9)/(DNA长度×660)=copies/ul.例:3000碱基质粒,浓度100ng/ml,MW=3000bpx660dalton/bp=1.98x106daltons,1mol=1.98x106g.(6.02x10的23次拷贝数/摩尔)x(1x10的-7次克/微升)/(1.98x10的6次克/摩尔)=3x1010次copies/ml.梯度配制方法:低浓度使用胎盘DNA20ng/ul;高浓度使用灭菌水配制,100ng10ng1ng100pg10pg1pg30+27030+27030+27030+27030+27030+270105104103102101100100+20030+27030+27030+27030+27030+27020ng基因组DNA所包含的拷贝数:6.02×3x1023x20ng/2.91x109x660=6289个拷贝数。

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