BX51显微镜操作步骤介绍2目录一、显微镜BX51组成部分二、开机步骤三、明场观察四、如何使用调节装置五、DIC观察(微分干涉衬)六、相差观察七、荧光观察八、简单维护保养3一、显微镜BX51组成部分1、目镜2、观察筒3、机架荧光反射照明器汞灯灯箱4、物镜转换盘5、物镜6、标本夹7、载物台8、聚光镜荧光激发块转盘9、卤素灯灯箱粗/微调焦旋纽X、Y轴旋纽光强调节纽聚光镜升降旋钮粗/微调焦旋纽X、Y轴旋纽光强调节纽聚光镜升降旋钮4二、开机步骤1、插上电源,打开主开关到“I”,调节光强调节钮主开关3、按下LBD日光型滤色片按钮4、选择光路(适用于三目观察筒U-TR30-2/U-SWTR-3)2、转换开关拨到透射光(仅适用于BX51TRF/BX52TRF镜架)5三、明场观察常规观察方式应用领域:常规镜检、病理、染色标本6调节瞳间距调节屈光度所需物镜、聚焦5、4、1、放入样品转换聚光镜10X物镜2、3、调节6、亮度视场光阑孔径光阑五、明场观察⑴观察步骤7三、明场观察⑴观察步骤1、放入样品;打开样品夹上带弹簧的扳指,把样品载玻片从前面滑行放进载物台。2、转换聚光镜;将聚光镜移至明场(BF)位置(适用于U-UCD8)若使用摆动式聚光镜(U-UCD8或U-S),物镜10X以上要将顶透镜摇入光路(4X以下摇出);8三、明场观察3、10X物镜;将10X物镜转进光路,对样品聚焦;我们观察一般由低倍到高倍进行;4、调节瞳间距,调节屈光度通过目镜观察时,调节双目镜筒直到左右视场完全吻合。在聚焦清晰的基础上,若两眼视场清晰度不一致,可仅转动屈光度调节环对样品聚焦。5、选物镜将所需物镜转进光路,对样品聚焦9三、明场观察6、调节亮度;调节光强旋钮,根据需要使用内置ND滤色片,至视场亮度适中。7、调节对比度(视场光阑孔径光阑)视场光阑调节:调节进入物镜的光束面积。孔径光阑调节:设置为物镜数值孔径的70%到80%之间,此时图像反差效果为昀佳。(如图,使用万能平场半复消色差40X物镜时,数值孔径0.75,我们把孔径光阑刻度设置为0.75×0.7=0.525。8、开始观察0.5增大视场光阑孔径光阑10⑵柯勒照明中心调节①转动聚光镜高度升降旋钮把聚光镜升高到昀高位置。②放入样品,将DIC等其他光学附件移出光路,聚光镜转到明场上DIC检偏镜DIC滑座BFDIC起偏镜聚光镜聚光镜升降旋钮三、明场观察11③用10X物镜聚焦,调至清晰;使用U-UCD8或U-SC3摆动式聚光镜时,把顶透镜移入光路。④视场光阑打至昀小(图3)⑤通过调节聚光镜升降旋钮下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像;⑥通过调节聚光镜中心调节旋钮(图4),把正多边形图像移至视场中心位置图3小图4⑵柯勒照明中心调节三、明场观察12⑦逐步打开视场光阑,如正多边形与视场边缘内切,则聚光镜已正确对中。⑧实际观察中,稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即可以上四步效果如右图⑤⑥⑦⑧注意:明场观察以前须完成此调节,才能保证观察的效果。完成后一般就不需要再调节,直至装卸过部件后。⑵柯勒照明中心调节三、明场观察13效果对比各环节调试得当可得到清晰锐利的图像操作不正确效果欠佳14四、如何使用调节装置15四、如何使用调节装置瞳间距调节刻度屈光度调节环光路选择键六角改锥(存放位置)电压指示器LED光强调节钮内置滤色片按钮视场光阑调节环孔径光阑调节环粗调限位杆光强预置旋钮粗/微调焦旋纽Y轴旋纽X轴旋纽聚光镜高度调节旋钮聚光镜中心调节旋钮16四、如何使用调节装置⑴光强预置按钮如何调节光强前面已有叙述(见3页),光强预置按钮①能够把光强置于预先选择的水平。默认已经设在使用LBD滤色片进行显微摄影的昀佳亮度(约9V,有标志的位置)。1.把光强预置按钮①按到ON位置.(按钮处于ON位置时,面板发亮).光强预置按钮位于ON时,转动光强调节钮对亮度不起作用。使用小的平头改锥,转动预置调节螺钮②可改变预置的光强。但一般不建议2.当把光强预置按钮按到OFF位置时,亮度就恢复到由光强调节钮设置的位置。①on②off17⑵光路选择键推拉光路选择钮①选择所需的光路。(适用于三目观察筒U-TR30-2/U-SWTR-3)共有三档,具体如右表:显微摄影电视观察100%用于电视观察/显微摄影拉出亮样品观察,显微摄影电视观察20%用于双筒目镜,80%用于电视观察/显微摄影。中间位置暗样品观察100%用于双筒目镜推进应用光强比例指示符号光路选择钮显微摄影电视观察100%用于电视观察/显微摄影拉出亮样品观察,显微摄影电视观察20%用于双筒目镜,80%用于电视观察/显微摄影。中间位置暗样品观察100%用于双筒目镜推进应用光强比例指示符号光路选择钮①四、如何使用调节装置18⑶粗调焦限位杆用粗调焦旋钮聚焦样品后,沿箭头方向转动限位杆①并锁定,就把粗调焦旋钮移动的下限设定到了锁定位置,物镜不能再往下移动。改变样品后,转动粗调焦旋钮到限定位置,就很容易初步聚焦。然后用微调焦旋钮精细聚焦。★如果要把载物台降低到超过低限的位置,首先应该打开限位杆。打开锁定①四、如何使用调节装置19四、如何使用调节装置⑷瞳间距、屈光度、目镜眼罩①通过目镜观察时,调节双目镜筒直到左右视场完全吻合。指示点“.”表明瞳间距,例如图中瞳距为65。记下你的瞳距以便再用。②通过目镜观察,在转动粗、微调焦旋钮对样品聚焦清晰的基础上(以没有屈光度调节环的目镜为基准),若两眼视场清晰度不一致,可仅转动屈光度调节环对样品聚焦。20孔径光阑四、如何使用调节装置⑸孔径光栏调节调节对比度,要图像反差效果昀佳,需设置N.A聚=(0.7-0.8)N.A物物21孔径光栏开度与图象100%70%30%22物镜和聚光镜的配合100X上透镜摇入光路(FN26.5)可用(FN26.5)可用(FN26.5)10-60X可用于FN224X可用,将上透镜移出光路(FN26.5)2X可用(FN26.5)可用于FN221.25X超低倍率聚光镜U-ULC-2摆动式聚光镜U-SC3消色差/消球差聚光镜U-AAC阿贝聚光镜U-AC2聚光镜物镜放大倍率四、如何使用调节装置23⑸内置滤色片按下滤色片按钮①-④,所对应的滤色片就被移进光路。再按一次按钮,滤色片将被移出光路。具体如右表:OP(可选件)滤色镜座④LBD(日光型滤色镜)用于色度平衡③ND25(中性密度滤色镜)用于光强调节,透过率25%。②ND6(中性密度滤色镜)用于光强调节,透过率6%。①滤色片类型/用途①②③④四、如何使用调节装置24⑹物镜校正环如果盖玻片厚度不是0.17毫米,物镜就不能达到最佳性能。在这种情况下,使用一个带校正环的物镜,通过调节校正环,就可以补偿厚度差异。调节步骤·如果知道盖玻片厚度,就把校正环(如图)设定到这个数值。·如果不知道盖玻片厚度,反复调节校正环和微调焦旋钮,直到获得昀高分辨率。★注意,转动物镜转换器时,不要碰到校正环四、如何使用调节装置25五、微分干涉观察特点:可以使被检物体产生三维立体感觉,观察效果更直观;分辨率高,轮廓及内部细微结构均清晰可见。应用:无色透明活体标本的细微结构,无色荧光标本、染色标本等。26选物镜聚光镜移到与所用物镜对应的DIC棱镜位置聚焦、调节6、5、放入样品4、开机打开主开关,调节光强正交尼柯尔对中初次观察需完成调节推入DIC附件起偏器、DIC滑座、检偏镜1、2、3、视场光阑孔径光阑五、微分干涉观察27⑴DIC附件图DIC检偏镜DIC滑座DIC棱镜(刻度显示)DIC起偏镜棱镜移动旋钮(DIC滑座上)起偏器转动旋钮起偏器固定旋钮28五、微分干涉观察⑶正交尼柯尔调节步骤1、必须在柯勒照明已调好的基础上才能调DIC;(确定所有DIC附件已移出光路)2、把起偏器(Polarizer)摆入照明光路中3、先用10×物镜,以明场条件把标本调焦清晰;4、将标本移出光路,把起偏器(Polarizer)、DIC滑座(U-DICT)、检偏镜(Analyzer)等移入照明光路中;5、卸下目镜,装上一个U-CT30对中望远镜,或者取下目镜直接观察;(右图)296、对中:①围绕光轴顺时针方向转动DIC滑板上的棱镜移动旋钮,一直到头。开始会看到黑色干涉条纹,然后是彩虹色干涉条纹。②这时,将这个旋钮停到看到黑色干涉条纹的位置;③水平转动起偏器上的起偏器转动旋钮,直到黑色干涉条纹变到昀暗。④确定位置后,拧紧偏器固定旋钮。五、微分干涉观察307、将聚光镜中对应的DIC棱镜(DP10/DIC10)移进光路,卸下对中望远镜,并装上目镜;8、放入标本进行观察。注意:每次转换物镜的同时将聚光镜中的相对应DIC棱镜移进光路。具体如下:备注:1、微分干涉衬DIC不能应用于塑料培养皿的观察。2、DIC观察中,若将DIC滑座及聚光镜中的DIC棱镜移出光路,即可进行简易偏光简易偏光的观察。五、微分干涉观察DIC100DIC60DIC40DIC20DIC10对应DIC棱镜100X60X40X20X10X物镜31DIC调试效果对比好的效果效果欠佳32特点:鉴定活体细胞昀实用方法应用:无色透明活体标本的细微结构,检查,鉴定活体细胞(培养细胞,分离细胞)一般正立显微镜上较少使用六、相差观察33⑴相差观察步骤:如果光路中有DIC滑板、检偏器或起偏器,请先移出光路。六、相差观察1、装上相差物镜,2、将聚光镜中相应的相差环板转入光路,完成相差中心调节(见下,即可观察。(在光路中插入绿色滤色片IF550会改善反差)相差物镜相差环板(聚光镜中)34⑵相差中心调节进行下列操作前,请打开孔径光阑。如果关小孔径光阑会看到眩光。1、在柯勒照明调节已完成的基础上再进行相差中心调节;2、将相差物镜及聚光镜中相应的相差环板转入光路,对样品调焦清晰;3、取下目镜,装上CT望远镜(U-CT30),没有的直接取下目镜;4、调节焦距看到清晰的相差环和物镜相板;5、调节聚光镜上定位螺丝,使环状光阑象与相板共轭面重合可能会看到环板图象的多个重影。在这种情况下,将昀亮的环板图象与物镜相板重合。(右图)六、相差观察PhasePlateandLightAnnulusAlignmentok356、如果使用了聚焦望远镜,请卸下,换上目镜。注意:对不同的相差物镜及与其搭配的相差环板都需要进行中心调节,具体如下:若使用相差/暗场聚光镜(U-PCD2),转到暗场环位置即可进行暗场观察。PH3PH2PH1或PHCPHL对应相差环板100X40X/60X10X/20X4X物镜六、相差观察36原理:荧光——物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态,再回到低能状态时释放出的光,是非温度辐射光用途:1、物体构造的观察——荧光素2、荧光的有无、色调比较进行物质判别——抗体荧光等3、发荧光量的测定对物质定性、定量分析七、荧光观察37荧光激发块转盘挡光屏汞灯电源供电器100w汞灯灯箱荧光照明装置BX-RFA遮光挡板钮Shutter●挡光○不挡光检偏器/六孔阻挡滤色片架插槽六孔滤色片架插槽主开关I:开O:关计时器显示汞灯使用总时长视场光阑对中螺丝汞灯聚焦调节旋钮汞灯中心调节旋钮孔径光阑调节杆视场光阑调节杆孔径光阑对中螺丝ND滤色片/励起平衡器插槽反面荧光激发块转盘挡光屏汞灯电源供电器100w汞灯灯箱荧光照明装置BX-RFA遮光挡板钮Shutter●挡光○不挡光检偏器/六孔阻挡滤色片架插槽六孔滤色片架插槽主开关I:开O:关计时器显示汞灯使用总时长视场光阑对中螺丝汞灯聚焦调节旋钮汞灯中心调节旋钮孔径光阑调节杆视场光阑调节杆孔径光阑对中螺丝ND滤色片/励起平衡器插槽反面荧光激发块转盘挡光屏汞灯电源供电器100w汞灯灯箱荧光照明装置BX-RFA遮光挡板钮Shutter●挡光○不挡光检偏器/六孔阻挡滤色片架插槽六孔滤色片架插槽主开关I:开O:关计时器显示汞灯使用总时长视场光阑对中螺丝汞灯聚焦调节旋钮汞灯中心调节旋钮孔径光阑调节杆视场光阑调节杆孔径光阑对中螺丝ND滤色片/励起平衡器插槽反面荧光激发块转盘挡光屏汞灯电源供电器100w汞灯灯箱荧光照明装置BX-RFA遮光挡