1专题二细胞工程第2节动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术【学习目标】1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2.比较动物细胞培养与植物组织培养区别。3.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。【学习重点】1.动物细胞培养的过程及条件。2.用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。【学习难点】用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。【教学过程】一、知识网络体系二、阅读教材,整合提炼(一).动物细胞工程常用的技术手段有:、、、等。其中是其他动物工程技术的基础。(二)、动物细胞的培养1、概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成_________________,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞______________和______________。2、过程动物组织用胰蛋白酶处理分散单个细胞→_________________→_________________中培养→_________________胰蛋白酶_________________。思考讨论以下问题①为什么要将组织分散成单个细胞培养?怎样将动物组织分散成单个的细胞呢?②进行动物细胞传代培养时用分散细胞,说明细胞间物质的成分主要是。用胃蛋白酶行吗?胰蛋白酶会不会把细胞“消化”掉呢?动物细胞工程动物体细胞核移植技术和克隆动物动物细胞培养动物细胞培养的应用和概念细胞培养的过程细胞培养的条件细胞培养技术的应用核移植技术和克隆动物的概念动物体细胞核移植技术的过程动物体细胞核移植技术的应用前景动物体细胞核移植技术存在的问题2③名词解释i)细胞贴壁:。细胞贴附瓶壁生长有什么样的要求?。ii)细胞的接触抑制:。iii)原代培养:。iv)传代培养:。④传代培养的细胞能一直传代下去吗?有些为何能一直传下去吗?④目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,为什么?3、条件(1)培养液应进行_________________处理。(2)合成培养基成分:_________________、_________________、_________________、无机盐、微量元素,通常需加入______________、血浆等。(3)温度和pH:适宜温度:____________±0.5℃;pH:_________________。(4)气体环境:主要有O2和CO2,_________________是细胞代谢所必需的,_________________主要维持培养液的PH。4、应用:如_________________疫苗、干扰素、_________________的生产。(三)、动物细胞核移植技术和克隆动物1、动物核移植将动物的一个细胞的_________________,移入一个已经去掉细胞核的_________________中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。2、种类:⑴_________________移植。⑵_________________移植。3、过程(1)取供体_________________→供体细胞培养。(2)从卵巢中采集_________________→在体外培养到_______________________→去核。(3)将供体细胞注入_____________________→使两细胞____________→供体核进人受体卵母细胞→构建_________________。(4)将胚胎______________到代孕母体内→生出与供体遗传物质基本相同的个体。4、应用(1)加速家畜_________________进程,促进优良畜群繁育。(2)保护_________________物种。(3)生产_________________。(4)作为异种移植的_____________。(5)用于_________________的移植。反馈练习:31、为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液,选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理()A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是()A.培养基成分不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株3.在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到()A.细胞培养技术B.细胞核移植C.胚胎移植技术D.基因工程技术4、动物细胞工程技术的基础是()A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植5、在生物工程中一般都要用到酶,下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶的是()A.限制酶B.DNA连接酶C.果胶酶D.胰蛋白酶6、在动物细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的目的是()A.使动物组织分散为单个细胞进行培养B.去掉细胞壁成为原生质体C.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D.促进蛋白质水解为多肽7、在进行动物细胞培养时,通常选用的培养材料是()A、衰老退化的动物组织细胞B、成熟动物个体的体细胞C、动物的受精卵细胞D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞8、下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是()A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株9、动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是()A.葡萄糖B.维生素C.动物血清D.蔗糖10、从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状()A、难以预测B、像甲C、像乙D、像丙11、生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是()A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培养成新个体D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体12、如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是()4A、乳腺细胞的B、卵细胞的C、胃腺细胞的D、囊胚时期的胚胎细胞的13、下列哪—项属于克隆()A.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系14、细胞株的特点是()A.遗传物质没有改变,可以无限传代B.遗传物质发生改变,不可无限传代C.遗传物质没有改变,不可无限传代D.遗传物质发生改变,且有癌变特点,可以无限传代15、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称之为A.原代培养B.传代培养C.细胞株D.细胞系()二、填空16、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答:(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自____________________________________________,原因是________________。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是______________,然后用______________酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的目的是_________________________________________。(3)首先在B瓶中进行培养,瓶中的培养基成分有_______________________________________________________________等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第_代,到这时的培养称为____________________。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用_____处理,然后配置成_____,再分装。(5)在C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡,原因是_________________。15、下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解,据图回答下列问题:⑴蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的___________________,重新组合的细胞相当于蛙的________________细胞,经过________________和________________形成组织和器官。⑵本实验结果说明_____________________具有全能性,图中A过程采用的技术手段称做_______________。