实验三、多糖含量的测定

实验三多糖含量的测定1、分光光度法测多糖的原理和方法2、用Officeexcel作标准曲线二、仪器与试剂1、仪器：7200分光光度计、水浴锅、电子天平2、试剂：1水葡萄糖、5%苯酚溶液、浓H2SO4、dH2O3、器皿：50ml容量瓶、10ml量筒、玻璃棒、洗耳球、烧杯、试管、试管架三、步骤1、标准曲线的绘制①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶，加入dH2O溶解并小心稀释至刻度，再取5ml于50ml容量瓶中，加dH2O稀释，即1.0mg/ml；②分别量取0.25ml，0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml分别置于已编号的50ml容量瓶中，加dH2O定容；③分别吸取上述溶液各2.0ml，再加入5%苯酚1ml，摇匀后迅速加入5ml浓H2SO4，摇匀后，室温放置5min，然后置于90oC水浴15min，冷却至室温；空白对照：同样取2mldH2O+1ml5%苯酚+5ml浓H2SO4，摇匀后，室温放置5min，然后置于90oC水浴15min，冷却至室温；吸光度A得，浓度C与吸光度的线性方程y=ax+b2、准确量取多糖溶液（待测）2.0ml于50ml容量瓶中，加dH2O定容，方法同上述③。四、实验结果①实验主要步骤（记录）②用Excel作图，并选择性粘帖至Word到PDF③计算浓度（待测液）五、实验注意1、高毒——苯酚（强腐蚀）！2、高腐蚀——浓硫酸！一实验步骤标准曲线的绘制①取1水葡萄糖0.551g于50ml容量瓶，加入dH2O溶解并小心稀释至刻度，再取5ml于50ml容量瓶中，加dH2O稀释，即1.0mg/ml；待测溶液也用同法，空白对照组同法②分别量取0.25ml，0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml分别置于已编号的50ml容量瓶中，定容；取待测2.0ml于50ml容量瓶中，定容，空白对照组用2ml蒸馏水。（图为定容好以后的，0.25ml，0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml葡萄糖溶液）③分别吸取上述溶液各2.0ml，再加入5%苯酚1ml，摇匀后迅速加入5ml浓H2SO4，摇匀后，室温放置5min，然后置于90oC水浴15min，冷却至室温；（加入苯酚，试管颜色仍为透明无色，加入浓硫酸以后，试管变热，反应激烈，立马有细小气泡产生，且颜色变黄，葡萄糖溶液浓度越高，黄色越深）（全部试管滴加完浓硫酸以后的试管颜色按浓度由高到低摆放，最左边的是待测溶液，颜色为浅黄色）5测量吸光度A二实验数据的记录与作图X轴为浓度Y轴为吸光度三计算浓度待测溶液的吸光度为0.013由此推算出待测液浓度为0.004925