GC-MS--气相色谱质谱联用仪

GC-MS气相色谱/质谱联用仪GasChromatography-MassSpectrometer1.什么是GC-MS？它一种结合气相色谱和质谱的特性，在试样中鉴别不同物质的方法。2.GC-MS的优点是什么？气质联用的有效结合既充分利用色谱的分离能力，又发挥了质谱的定性专长，优势互补，结合谱库检索，可以得到较满意的分离机鉴定结果。3.GS-MS的基本流路图GC基础知识1.什么是GC？气相色谱（GC）是一种把混合物分离成单个组分的实验技术。它被用来对样品组分进行鉴定和定量测定。气相色谱（GC）是基于时间差别的分离技术。将气化的混合物或气体通入含有某种物质的管，基于管中物质对不同化合物的保留性能不同而得到分离。这就是基于时间的差别对化合物进行分离。样品经过检测器后，被记录的就是色谱图，每一个峰代表最初混合样品中的不同的组分。典型色谱图峰出现的时间称为保留时间，可以用来对每个组分进行定性，而峰的大小（峰高或峰面积）则是组分含量大小的度量。2.系统一个气相色谱系统包括：•可控而纯净的载气源，它能将样品带入GC系统•进样口，它同时还作为液体样品的气化室•色谱柱，实现随时间的分离•检测器，当组分通过时，检测器电信号的输出值改变，从而对某种组分做出响应•某种数据处理装置如下图所示：色谱系统气源：载气必须是纯净的。污染物可能与样品或色谱柱反应，产生假峰，进入检测器使基线噪音增大等。载气的气体其种类较多，如：氮、氦、氢、氩等。目前国内实际应用最多的是氮气和氢气。进样口：将挥发后的样品引入载气流。最常用的进样装置是注射进样口和进样阀。图3注射进样口注射进样口用于气体和液体进样。常用来加热是液体样品蒸发。用气体或液体注射器穿透隔垫将样品注入载气流。图4进样阀样品从机械控制的定量管被扫入载气流。因为进样量通常差别很大，所以对气体和液体样品采用不同的进样阀。色谱柱分离就在色谱柱中进行。在测定样品时可以选择不同的色谱柱，所以用一台仪器就能够进行许多不同的分析。图5色谱柱和柱箱因为大多数分离都强烈依赖温度，故色谱柱要安装在能够精密控温的柱箱内。检测器从色谱柱里出来的含有分离组分的载气流通过检测器而产生电信号。检测器的输出信号经过转化后成为色谱图。检测器3.组分分离分离混合物起主要作用的是色谱柱，而色谱柱的选择取决于混合物的性质和所需获得的信息（分析目的）。那么色谱柱如何对化合物进行分离的？如一段含有两个样品组分的（彩色的圆点）的色谱柱的横截面。其中的色谱柱是空柱，它是既没有填料，也没有涂层。未经涂层的色谱柱几秒钟后，色谱柱中的情况发生了改变由于载气流的带动，样品向柱的右端移动。并且由于样品区域和周围载气中样品浓度的不同而使得样品区域带展宽。样品组分仍是混合在一起的。几秒钟后如果我们在柱子的内表面加上一种涂层，假设这种涂层能够溶解蓝色圆点组分而不能溶解黄色圆点组分的固定液。几秒后再观察色谱柱：涂层色谱柱几秒钟后因为黄色组分和涂层之间没有作用。它随载气一同流过色谱柱并首先从色谱柱中流出。蓝色组分在固定液和载气之间进行分配。它以较慢的速度流过色谱柱而后流出色谱柱。色谱柱类型毛细管柱：毛细管柱是将固定相涂在管内壁的开口管，其中没有填充物。毛细管柱的内径从0.1到0.5毫米。典型的柱长是30米。材料：熔融石英、不锈钢毛细管柱填充柱在填充层内，固定液被涂在粒度均匀的载体颗粒上以增大表面积，减少涂层厚度。涂好的填料被填充在金属，玻璃，或塑料管内。材料：不锈钢、玻璃载体：玻璃、石英石、硅藻土等填充柱选择毛细管柱还是填充柱？*气体分析通常用填充柱完成。填充柱有足够的柱容量来适应较大体积的气体进样量。气体样品分析常用的填料包括：•分子筛—氧气，氮气，氢气，二氧化碳，一氧化碳，甲烷等。•氧化铝—丙烷或更大分子量的化合物•多孔性聚合物微球—乙烷，丁烷，二氧化碳等。*毛细管柱有比填充柱更高的分离度。即使选择低一些，通常也能实现足够的分离。*一根毛细管柱能够完成多种分析，而填充柱则可能需要多跟才能完成*对毛细管柱和填充柱都适用的固定液有：甲基硅烷，苯基甲基硅烷，聚乙二醇MS基础知识1.什么是MS？•质谱分析是一种测量离子质荷比（质量-电荷比）的分析方法，其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定其质量。•简单的说，质谱就是称量离子的工具。2.MS流程图离子源在GC-MS中一般采用的是EI和CI离子源。EI：电子电离源，最常用的气相电离源，有标准谱库。分子受到电子（70eV）轰击，在较低能量的化学键处发生断裂CI:化学电离源,可获得准分子离子具体过程是在系统抽真空之后，先充入大量甲烷气体（100~1000Pa），与少量样品分子混合，电子束与甲烷气体作用几率大，得到的稳定的烷类离子产物（CH5+，C2H5+），但能量较低，与样品分子结合后，经过一系列反应即可得到样品离子。质量分析器•磁质量分析器•四级杆质量分析器•飞行时间质量分析器磁质量分析器磁质量分析器是根据离子束在一定场强的磁场中运动时，其运动的曲率半径Rm与离子的质荷比m/z和加速电压V有关，当加速电压固定时，不同质荷比的离子的曲率半径不同，于是不同质荷比的离子在空间有不同的位置，得到了空间位置上的分离。磁质量分析器飞行时间质量分析器飞行时间质量分析器是一个长度一定的无场空间，离子经加速电压加速而进入分析器时，由于不同质量的离子飞行速度不同，他们飞过一定距离所需的时间也不同，质量小的离子飞行速度快先到达检测器，质量大的飞行速度慢后到达检测器，因而可获得质量分离。飞行时间质量分析器四级杆质量分析器四极杆质量分析器由4根平行的圆柱形电极组成，电极分为两组，分别加上一个直流电压和一个射频交流电压。当离子由电极间轴线方向进入电场后，会在极性相反的电极间产生振荡。只有质荷比在一定范围的离子，才可以围绕电极间轴线作有限振幅的稳定震荡运动，并到达接收器。只要有规律地改变所加电压或频率，就可使不同质荷比的离子依次到达检测器，实现分离的目的。四极杆质量分析器的优点是具有经典的质谱图，再现性好，扫描速度快，离子流通量大，结构简单，易操作，因此应用较广；其缺点是对高质量数离子有质量歧视效应，分辨率较低，适用的质量范围也较小。四级杆质量分析器为什么MS需要高真空提供足够的平均自由程提供无碰撞的离子轨道减少离子-分子反应减少背景干扰延长灯丝寿命消除放电增加灵敏度真空系统确保离子由离子源转移至检测器GC-MS原理与结构气相色谱分离样品的各个组分，起样品制备的作用，接口把气相色谱流出的各个组分送入质谱仪进行检测，质谱仪对接口引入的各个组分进行分析，成为气相色谱的检测器。计算机系统控制色谱仪、接口、质谱仪，进行数据采集和处理。实例1.•用GC-MS对氢氧化钠和氢氧化钾催化酯交换反应制备生物柴油的定性分析氢氧化钠催化制备生物柴油GCMS图谱氢氧化钠制备生物柴油的组分分析氢氧化钾催化制备生物柴油GCMS图谱氢氧化钾制备生物柴油的组分分析•对在反应温度为60℃,醇油比为6:1,氢氧化钠用量为0.5%（油质量的0.5%）条件下反应2h生成的生物柴油进行一分析,根据出峰时间,图中出现的四个峰依次为棕榈酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯。•在反应温度为60℃,醇油比为6:1,氢氧化钾用量为0.5%（油质量的0.5%）条件下反应1h生成的生物柴油进行一分析,根据出峰时间,图中出现的四个主要峰依次为为棕榈酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯。除此之外,还有少量的花生酸甲酯和二十二酸甲酯等。可以看出,两种强碱催化剂制备的生物柴油成分及相对含量基本一致。1.GC-MS的缺点•GC-MS的不足在于：分析对象限于在300℃左右及以下可以汽化、并且能离子化的样品；在加热过程中易分解的、极性太强的化合物，如有机酸类等，则需要进行酯化衍生处理才可进行GC-MS分析，如果样品不能汽化也不能酯化则需采取LC-MS或其他方法分析；GC-MS分析样品应是有机溶液。另外，目前质谱还有个一个很重要的不足是对很多异构体（尤其是位置异构）无法分辨。2.四级杆质量分析器四极杆质量分析器由4根平行的圆柱形电极组成，电极分为两组，分别加上一个直流电压和一个射频交流电压。当离子由电极间轴线方向进入电场后，会在极性相反的电极间产生振荡。只有质荷比在一定范围的离子，才可以围绕电极间轴线作有限振幅的稳定震荡运动，并到达接收器。只要有规律地改变所加电压或频率，就可使不同质荷比的离子依次到达检测器，实现分离的目的。四极杆质量分析器的优点是具有经典的质谱图，再现性好，扫描速度快，离子流通量大，结构简单，易操作，因此应用较广；其缺点是对高质量数离子有质量歧视效应，分辨率较低，适用的质量范围也较小。相对两根电极间加有电压（Vdc+Vrf),另外两根电极间加有-（Vdc+Vrf)。Vdc为直流电压，Vrf为射频电压。在保持Vdc/Vrf不变的情况下改变Vrf值，对应于一个Vrf值，四极场只允许一种质荷比的离子通过，其余离子则振幅不断增大，最后碰到四极杆而被吸收。通过四极杆的离子到达检测器被检测。改变Vrf值,可以使另外质荷比的离子顺序通过四极场实现质量扫描。设置扫描范围实际上是设置Vrf值的变化范围。当Vrf值由一个值变化到另一个值时,检测器检测到的离子就会从m1变化到m2，也即得到m1到m2的质谱。3.关于GC与MS的接口问题1.直接导入型接口内径在0.25至0.32mm的毛细管色谱往的载气流量在1～2ml／min。这些柱通过一根金属毛细管直接引入质谱仪的离于源）这种接口方式是迄今为止最常用的一种技术。2.开口分流型接口色谱柱洗脱物的一部分被送入质谱仪，这样的接口称为分流型接口。在多种分流型接口中开口分流型接口最为常用。•3.喷射式分子分离器接口常用的喷射式分子分离器接口工作原理是根据气体在喷射过程中不同质量的分子都以超音速的同样速度运动，不同质量的分子具有不同的动量。动量大的分子，易保持沿喷射方向运动，而动量小的易于偏离喷射方向，被真空泵抽走。分子量较小的载气在喷射过程中偏离接受口，分子量较大的待测物得到浓缩后进入接受口。喷射式分子分离器具有体积小热解和记忆效应较小，待测物在分离器中停留时间短等优点。