搜索
朱砂安神丸质量分析北京市药品检验所中药室产品概况一产品质量安全性分析二产品质量有效性分析三一、产品概况朱砂200g（一）处方组成黄连甘草地黄当归200g300g200g100g朱砂安神丸为经典方，由朱砂、黄连、地黄、当归、甘草五味中药组成。最早见于明朝李东垣的《内外伤惑论》，为重镇安神药的代表方剂功能主治：具有清心养血，镇惊安神的作用。用于胸中烦热，心悸不宁，失眠多梦等症状。共183个厂家185个批准文号生产企业及批准文号（二）样品收集情况总数107批涉及生产企业17家(9.3%)涉及批准文号19个(10.3%)涉及剂型3个（大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸）涉及包装规格5个以上五味，朱砂水飞或粉碎成极细粉；其余黄连等四味粉碎成细粉，与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜35～45g与适量的水，泛丸,干燥；或加炼蜜90～110g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。制剂工艺剂型规格大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸(单剂量、多剂量)（三）制剂工艺及规格工艺流程图（四）现行质量标准•本品为红棕色的水蜜丸，小蜜丸或大蜜丸，味苦、微甜性状•显微鉴别（朱砂、黄连、甘草、地黄、当归）鉴别•水分、装差、重差、溶散时限、•微生物限度检查●最早收载于1963年版中国药典。●现在执行标准：1995年《卫生部药品标准》中药成方制剂第十册。至今，一直未修改。依据现行标准检验结果98.6%100%96.4%77批大蜜丸1批重差不合格21批水蜜丸1批装差不合格15批小蜜丸全部合格分析不合格原因：1.铝塑泡罩偏薄，保湿性差。2.药丸外观形状不圆，推测生产企业设备装量调节不准确。总合格率98.2%标准检验情况产品质量分析研究思路发现的问题质量标准染色掺伪辅料其他薄层鉴别研究HPLC指纹及含量测定一测多评含量测定研究农药残留检测安神类药物非法添加检测辅料蜂蜜质量研究朱砂染色检查黄连染色检查近红外快检方法研究可溶性汞检测有效性安全性产品概况一产品质量安全性分析二产品质量有效性分析三二、产品质量安全性分析色素检查可溶性汞测定农药残留量检查非法添加1.色素检查----朱砂不同生产企业的产品外观颜色差异较大，相同生产企业不同批号的产品颜色差异也较大。红同一厂家不同批号不同厂家产品•在检验过程中发现，个别厂家产品颜色较红，在提取过程中发现其提取液颜色鲜红。研究背景染色1.色素检查----朱砂染色朱砂薄层图谱结果朱砂染色常用的染色剂：808猩红对107批次样品检验，结果3个厂家检出，共7批样品探索性研究：6.朱砂染色的检测808猩红对照试剂染色朱砂1.色素检查----朱砂808猩红对照试剂阳性样品HPLC-MS验证250500nm0102030mAU13.86/1.00256218517501407250500nm050100150mAU14.02/1.00256517498401688对照样品对照样品HPLC验证1.色素检查----朱砂薄层图谱结果朱砂染色常用的染色剂：808猩红对107批次样品检验，结果3个厂家检出，共7批样品探索性研究：6.朱砂染色的检测808猩红对照试剂染色朱砂1.色素检查----朱砂对1.lcdminmAU051015202530350100200HPLC图谱500700nm0255075100125mAU28.062/1.00437372656388325557minmAU051015202530350100200500700nm0510152025mAU28.062/1.00437371656390330520639金胺O对照试剂阳性样品•目前市面上黄连价格较贵，许多不法商贩使用提取过或质量差的黄连染色，使其颜色鲜亮，以假冒真。•常用染色剂：金胺O•采用HPLC法。RT:0.00-29.990246810121416182022242628Time(min)05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance20.1020.2419.9520.3320.4220.6519.6820.9521.1621.5522.7219.4924.5427.073.651.5615.659.878.4214.2112.816.834.56NL:2.14E6m/z=267.50000-268.50000MSd-jinanO_140928160626d-jinanO_140928160626#1298RT:20.09AV:1NL:7.90E5T:FTMS+cESIdFullms2268.18@cid35.00[60.00-280.00]6080100120140160180200220240260280m/z05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance147.09201268.18115122.09639107.07299252.13704145.07631224.1122774.21986206.22353188.14355157.1693697.08553d-jinanO_140928160626#1297RT:20.07AV:1NL:1.85E6T:FTMS+pESIFullms[200.00-400.00]200220240260280300320340360380400m/z05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance268.18039357.13281279.15860354.28534391.28409303.08655341.01804284.17609359.14856371.31525205.08684254.16628224.06392RT:0.00-30.01024681012141618202224262830Time(min)05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance20.1820.2720.0920.3920.4820.6319.8520.8521.0321.2221.592.703.012.6215.0322.7014.7815.2324.7919.5811.224.579.2829.317.21NL:1.38E6m/z=267.50000-268.50000MSy-jinanOy-jinanO#1383RT:20.45AV:1NL:8.10E5T:FTMS+pESIFullms[200.00-400.00]200220240260280300320340360380400m/z05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance268.18039279.15833354.28470391.28372336.12320324.21701205.08672371.31494307.11148235.16995356.12064284.17584382.31580254.16592y-jinanO#1374RT:20.32AV:1NL:4.58E5T:FTMS+cESIdFullms2268.18@cid35.00[60.00-280.00]6080100120140160180200220240260280m/z05101520253035404550556065707580859095100RelativeAbundance147.09193122.09637268.18115107.07289252.13814132.0684766.14643223.0983493.68159205.06387177.20726156.57426金胺O对照试剂阳性样品HPLC-MS验证对107批次样品检验，结果2个厂家检出，其中一家所有批次均检出金胺O，共32批样品存在问题1.色素检查----黄连•朱砂为“有毒”中药，处方中含有大量朱砂，因此该药是否有毒，是大众关注的重点。研究资料显示：朱砂中97%以上为不溶性成分硫化汞，不能被人体溶解吸收，对人体无毒害作用，少量的可溶性汞是可能被人体吸收的，具有危害性。•采用恒温孵育、ICP/MS测定方法，对其可溶性汞进行评价2.朱砂中可溶性汞检测结果，按照WHO提出每人每周汞摄入量不得超过0.3mg计算，有20批次样品的可溶性汞超出了此限度。结合工艺分析，20批产品中多数生产企业的朱砂工艺多采用直接粉碎法，而未超出限度的样品，其生产工艺多采用水飞法。因此，提示“水飞”工艺在朱砂炮制中的重要性！处方中朱砂的工艺急需改成水飞法！2.朱砂中可溶性汞检测朱砂安神丸均为原粉入药，并且含甘草，容易造成农药残留。故参考《中国药典》2010年版药典、港标及我所前期研究建立的中成药中20种有机氯农药残留量测定方法分别测定并按其限度进行判断，53批次样品中20种有机氯类农药残留均未检出。α-六六六狄氏剂五氯硝基苯2,-滴滴涕七氯4,-滴滴涕五氯苯胺六氯代苯艾氏剂r-六六六β-六六六五氯苯硫醚δ-六六六氧氯丹环氧七氯反-氯丹顺-氯丹4,-滴滴滴异狄氏剂4,-滴滴依3.农药残留量检测•本品属于安神类药物，考虑安神类药物非法添加的情况，故对其进行筛查。采用高效液相色谱-液相质谱联用法对朱砂安神丸三种剂型17批次样品进行化学成分非法添加的研究，对常用的22种安神类药物进行筛查，结果均未检出。•常用的22种安神类药物：巴比妥、苯巴比妥、扎来普隆、异戊巴比妥、硝西泮、氯硝西泮、艾司唑仑、司可巴比妥、三唑仑、阿普唑仑、劳拉西泮、奥沙西泮、氯氮卓、地西泮、咪达唑仑、氯氮平，青藤碱、氯美扎酮、盐酸文拉法辛、佐匹克隆、氯苯那敏、罗通定。•初步判断朱砂安神丸未添加上述安神类药物。4.安神类药物非法添加检测产品概况一产品质量安全性分析二产品质量有效性分析三三、产品质量有效性分析辅料蜂蜜的测定显微鉴别薄层色谱鉴别指纹图谱测定甘草酸含量测定黄连一测多评含量测定•不同企业之间大蜜丸的软硬差异较大，个别生产企业药丸较硬，没有粘性，怀疑辅料蜂蜜投料存在问题？1.辅料蜂蜜的测定•目前市场的蜂蜜比较混乱，勾兑蜂蜜较多•参考国家药典委员会《中国药典》2015年版公示稿中蜂蜜的质量标准•采用水超声提取的方法，采用APS-2HYPERSIL色谱柱•检测果糖，葡萄糖，检查麦芽糖、蔗糖1.辅料蜂蜜的测定麦芽糖果糖葡萄糖对照品企业2企业4阴性蔗糖产品质量好产品质量差1.辅料蜂蜜的测定•限度：参考公示稿中蜂蜜的质量标准果糖和葡萄糖的含量之和不得低于60%，果糖和葡萄糖含量比值不得小于1.0，麦芽糖不得过5.0%。•按90%转移率计算探索性研究：5.辅料蜂蜜的检测名称大、小蜜丸水蜜丸果糖葡萄糖之和（≧mg）255140麦芽糖（≦mg）2111.7果糖/葡糖糖比值1.01.0合格率%30.4%合格率%（不含比值）60.9%存在问题：蜂蜜投料不足或使用勾兑蜂蜜1.辅料蜂蜜的测定•快速直观的鉴别方法，可初步判断企业是否按处方投料以及投料的真伪•投料药材质量差：个别生产企业存在显微不易找，怀疑投料少；特征不明显的现象，怀疑使用劣质药材。2.显微鉴别白色矿物质质差的黄连染红的片子正品黄连地黄的TLC鉴别3.薄层色谱鉴别盐酸小檗碱地黄对照药材供试品黄连的TLC鉴别黄连同一企业甘草的TLC鉴别3.薄层色谱鉴别以甘草对照药材为对照，黄连对其有干扰，故以甘草苷为对照，空白无干扰。甘草苷同一企业供试品甘草苷供试品当归的TLC鉴别3.薄层色谱鉴别小结：■从薄层结果看出不同企业产品存在一定的差异，同一企业不同批次间存在一定差异。■通过薄层鉴别，能够快速鉴别出方中各味药的投料情况。能够鉴别出中药投料的“真、伪”。当归对照药材■方法：70%甲醇超声，C18柱，梯度洗脱。320nm检测。■根据剂型不同，建立了两种指纹图谱■快速鉴别：黄连、甘草、地黄、当归■反应产品之间内在质量差异探索性研究：1.薄层色谱研究4.指纹图谱测定基本信息相似度限度合格率大蜜丸小蜜丸水蜜丸0.85合