技术路线质粒构建表达、纯化靶组织免疫模型动物真核细胞表达试验淋巴细胞增殖试验ELISA脾细胞血清免疫小鼠WesternBlot免疫组化行为学实验淋巴细胞增殖试验ELISA脾细胞血清真核细胞表达试验综合评价,决定是否进入大动物试验或临床前试验质粒构建——分子克隆原理质粒构建——分子克隆原理原核表达、蛋白纯化乳糖操纵子目的基因hishishishishishis乳糖操纵子目的基因hishishishishishis(一)质粒的复制(二)目的基因的表达(三)蛋白的纯化目的蛋白中组氨酸上的咪唑环与镍柱结合,其他蛋白不结合;再用高浓度的咪唑组氨酸置换下来,得到纯化的目的蛋白。IPTG间接ELISA、免疫组化、westernblot+DAB棕色物质+ECL发光FITC荧光显微镜绿色荧光淋巴细胞增殖试验T淋巴细胞不增殖大量增殖未受刺激加入非抗原性刺激物;或特异性抗原性刺激物MTS比色线粒体脱氢酶行为学试验(水迷宫)