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动物细胞融合与单克隆抗体教学目标：1、了解并能简述动物细胞培养的过程、条件及应用2、举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用教学重点和难点：1.动物细胞培养的过程及条件2.单克隆抗体的制备和应用•复习回顾：•1、植物体细胞杂交的过程是怎样的？•2、动物细胞和植物细胞有何不同？一、动物细胞融合：1、概念：也称，是指或动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成的单核细胞称为。2、过程：不同的两个细胞→细胞细胞杂交两个多个杂交细胞DNA杂交•3、动物细胞融合原理与植物原生质体融合的基本原理是否相同？•诱导方法：、、。•思考：为什么灭活病毒能够作为诱导剂？不灭活的是否可以？•4、动物细胞融合的意义：克服了杂交的不亲和性。物理法化学法生物法远缘灭活的病毒对细胞没有感染能力。动物细胞融合杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B植物体细胞杂交去壁融合组培物理法化学法生物法：灭活的病毒动物细胞A动物细胞B杂种细胞5、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去壁后诱导原生质体融合物理法（离心、振动、电激）化学法（聚乙二醇获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除以上方法，还有生物法制备单克隆抗体二、单克隆抗体：•1.其由何种细胞产生？•2.主要分布在哪里？•3.如何得到抗体？提问？动物细胞A动物细胞B杂种细胞用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体试一试聚乙二醇或灭活的病毒杂交瘤细胞细胞培养提取抗体效应Ｂ细胞肿瘤细胞单克隆抗体制备过程示意图•注意：•①对小鼠做何处理？•②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？•③杂交瘤细胞的特点：既能大量，又能产生。•思考：产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的？注射特定的抗原蛋白五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨－骨、杂交瘤细胞）其中三种融合细胞。繁殖专一的抗体提示：抑制骨髓瘤细胞的DNA复制。单克隆抗体的优点和应用•单克隆抗体的优点强，高，大。•单克隆抗体的应用：①作为诊断试剂：准确识别各种物质的细微差别，并跟的结合，具有、、、的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗，可制成“”，也有少量用于治疗其他疾病。特异性灵敏度产量抗原一定抗原发生特异性准确高效简易快速癌症生物导弹•1、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状()A.难以预测B.像甲C.像乙D.像丙•2．（2004年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）•A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞•B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞•C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合•D．筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体BB•3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）•①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞•A.①②B.①③C.②④D.③④•4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）•①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞•A．②④B．①③⑤•C．①②③④D．②③CA创新应用训练5．右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？。原因是。（2）图中②为过程，常用作为诱导剂。该细胞继承了，因此不仅能分泌，还有本领。（3）该方案的目的是。不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞.细胞融合灭活病毒双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖制备单克隆抗体作业：1、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较。2、单克隆抗体制备过程。；这样，想找个有骨节有肩膊的都不能。”“或者也有，只轮不着我们罢了。”“你我倒也算了，老板——”“嘘！”很怕蝶宵华听见了伤心，偷眼看他，他端坐鞍上，双目微阖，竟似僧人入定了。苏家，全凭苏小横在，才安定下来。明柯逃跑了，谁知嘉颜是帮着明柯弄亏空贪官中银子的，也跟了明柯逃跑，临走还卷了一票。明远据说进京去，太守家似有悔婚之意。桩桩件件，每件都要压垮老太太。苏小横只道：“有我在！你们不必问端底，等着就好。”众人也终于静了。回道观里，裳儿拿红纸剪着玩，有一搭没一搭的，又似剪窗花，又似只糟塌纸张，见苏小横回来，嘻嘻笑道：“爷爷也计算差了。”苏小横道：“哦？”“盗坠索银的人，爷爷先把目标锁定在大哥、五哥身上，尤以五哥嫌疑更重，五哥手里也确实有大笔银子来路不名，叫爷爷查出来，”裳儿弄着剪子，侃侃谈道，“可他旋即却糊涂得把田庄里贪得来的银子，都输在赌局里，以至于受蕙妹妹胁迫，坏了笙表妹名声，吃了爹爹一顿杖，爬都爬不起来，爷爷就重点去调查大哥了罢？谁知五哥买通爹爹身边行杖的，筋骨无碍，装着养伤，悄没声儿一切都打点好，拐了嘉颜姐姐，扔嘣就走了！把爷爷可摆了一道。”“是你被摆了一道。”苏小横道。裳儿手里的剪子，停了停。“你将是独当一面的人，特立专行，生杀予夺，非如此，不足以在宫中固宠。”苏小横道，“内外种种，我知道的，你也知道，我并未瞒你，我所不知道的，你也应该自己想办法知道，定出方略，克敌制胜。你没有做到，就是败了。宫中败亡，你把责任怪在爷爷头上，纵然爷爷肯承担，有用么？”裳儿默然片刻，将剪子放下，端端正正拜苏小横一礼：“孙女谨受教。”“你剪的是什么？”苏小横看着那张叠了数叠、被剪了许多刀的红纸。裳儿将红纸展开，胡乱纵横的刀痕，并未能形成任何花样：“这是裳儿的心境。”“本应如何呢？”苏小横又问。“本应，”裳儿打开一本书，取出里面压得平平的剪纸，是鸳鸯戏水，“送于四姐姐贴在嫁妆箱上，给四姐姐道喜。”苏小横神色不动：“你四姐姐婚事有阻碍。”“是。”裳儿知这也是考题，“大哥既进京，四姐姐婚事就没有阻碍了。”苏小横微微叹了口气：“你会看不起你大哥吗？”“不会。”这倒是真心话，“虽说男女分工有别，但强盗杀来，若只余妇女，那妇女也必须举刃招架；同样道理，床帷间、私室里，若只有男儿能去，那末男儿也该去。为家族效命，诗姐姐如此，裳儿如此，大哥如此，原没什么分别。”说着伤感起来，“爷爷，你可知孙女流落在外，最困苦时，只为一勺掺着砂子的糙豆饭，他要我做什么都可以。”苏小横抚着裳儿的头：“爷爷救你太迟。”“相比很多人来说，已经