第二章细胞工程1、细胞工程概述2、植物细胞工程3、动物细胞工程第一节细胞工程概述一、细胞工程发展史请同学们讨论如何实现?西红柿—马铃薯?二、细胞工程基本概念1、细胞工程的操作对象以细胞为基本单位2、条件体外无菌3、技术培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术4、目的改良生物品种创造新品种(萝卜甘蓝)加速繁殖(胚胎分割移植)获得某些有用细胞代谢产物(人参皂苷)思考:判断下列是否属于细胞工程1、扦插和嫁接2、将胰岛素基因导入大肠杆菌3、用基因定位技术诱变基因获得所需蛋白质4、细胞培养(植物、动物)5、植物组织培养6、细胞融合(植物、动物)7、细胞核移植8、染色体工程(亚显微结构)细胞工程:植物、动物微生物第二节植物细胞工程组织培养细胞培养体细胞杂交(细胞融合)三、植物组织培养技术细胞、组织、器官、原生质体外植体1、取材:三、植物组织培养技术2、过程:什么叫脱分化?脱分化的产物是什么?愈伤组织:没有特定结构和功能(未分化)有旺盛分裂能力薄壁细胞三、植物组织培养技术3、培养条件:思考:培养愈伤组织需要哪些条件?(1)、外植体(2)、无菌操作思考:哪些东西要灭菌?外植体、培养基(3)、培养基植物需要营养包括:—水、无机营养组培需要的物质包括:—有机营养、天然附加物、生长物质氨基酸、维生素、糖生长素/细胞分裂素(4)外界条件:光照、温度三、植物组织培养技术4、产物:思考:组培最终获得了什么?植株(完整)胚状体、细胞(部分)(1)、组织培养的原理是什么?细胞全能性(2)、为什么细胞具有全能性?全套遗传物质(3)、全能性和细胞分化的关系?(4)、细胞全能性大小与分裂能力和分化程度关系?比较:受精卵、植物细胞、动物细胞5、概念依据______原理,在____条件下,分离植物的_________________(____)并在培养基上培养,在适宜的条件下,使其长成________植株的过程。外植体全能性无菌组织、器官、细胞、原生质体部分或完整切取接种愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽6、应用人工种子海藻酸钠无机盐、碳水化合物、蛋白质思考:人工种子和自然种子有何本质区别?繁殖方式人工种子的意义有利于保持优良性状不受环境制约繁殖速度快四、植物细胞培养1、定义:培养愈伤组织细胞(组织培养技术为基础)液体培养基(发酵)获得细胞群体及细胞次生代谢产物2、过程筛选高产量细胞扩大培养发酵分离或纯化有用物质3、应用植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B融合的原生质体AB杂种细胞AB愈伤组织杂种植物去壁去壁(酶解法)人工诱导再生壁脱分化再分化原生质体融合植物组织培养(物理法化学法)2、植物体细胞杂交(细胞融合)技术2、细胞融合技术自然或人工方法使2个或多个不同种细胞融合为一个细胞的技术,从而让其细胞继续生长出个体获得新品种,或获得其代谢产物。促融的方法生物方法:化学方法:物理方法:灭活的病毒诱导融合法聚乙二醇诱导融合法电场诱导融合法通过促融合剂的作用,让细胞之间的质膜发生粘连、破裂、细胞质融合,进而发生核融合,形成杂种细胞。纤维素酶、果胶酶除去植物细胞壁3、细胞核移植技术将一个细胞的细胞核转移到另一个去掉核的细胞中去,从而使受体细胞获得新的遗传信息,产生新的生命现象的技术显微操作仪、显微吸管4、染色体工程人们按照一定的设计,有计划地消减、添加或替换同种或异种染色体,从而达到定向改变遗传性状和选育新品种的技术。八倍体小黑麦单倍体育种等秋水仙素三、细胞工程的应用1、快速培养花卉及濒危植物2、获得无病毒的植株3、开发洁净能源减少环境污染4、繁殖优良家畜品种及濒危动物器官移植、单克隆抗体、皮肤移植等阅读课本P37