水产品中药物残留快速检测的理论与实践

水产品中药物残留快速检测的理论与实践杭州南开日新生物技术有限公司2011年3月杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.2杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.常用药物种类氯霉素孔雀石绿硝基呋喃类己烯雌酚甲基睾酮五氯酚钠喹乙醇硝基咪唑类氟喹诺酮类四环素类磺胺类3杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.何为“氯霉素”？氯霉素（Chloramphenicol，CAP）D-苏式-(-)-N-[(-(羟基甲基)-(-羟基-对硝基苯乙基]-2,2-二氯乙酰胺白色针状或微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末4杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氯霉素的药理作用由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用，且对后者的作用较强5杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氯霉素的毒性抑制骨髓造血机能胃肠道反应和二重感染过敏反应循环衰竭（灰婴综合征）6杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.中毒剂量在食品中的残留浓度高达1mg/kg（ppm）以上时对食用者有严重威胁成为第一个被世界各国禁用于食品动物的抗生素7杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.何为“孔雀石绿”？孔雀石绿（Malachitegreen，MG）四甲基代二氨基三苯甲烷带有金属光泽绿色的结晶体8杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.孔雀石绿的用途绿色工业染料杀菌剂、驱虫剂生物染色剂9杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.孔雀石绿的毒性致癌、致畸、致突变高残留：残留时间达到100天以上10杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.硝基呋喃类呋喃西林NitrofurazoneSEM5-硝基-2-亚糠基半卡巴腙氨基脲呋喃唑酮furazolidoneAOZ3-(5-硝基糠醛缩氨基)-2-恶唑烷酮３-氨基-２-恶唑烷酮11杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.硝基呋喃类呋喃它酮FuraltadoneAMOZ5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮呋喃妥因NitrofurantoinAHD1-氨基-2-内酰脲12杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.硝基呋喃类药物的用途合成的广谱抗菌药杀菌能力强、抗菌谱广、不易产生耐药性、价格低廉和疗效好13杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.硝基呋喃代谢和毒性动物体内代谢分解迅速：原药稳定性只有数小时大部分代谢产物与动物组织中的蛋白质迅速结合，在动物体内可以稳定存在数星期人食用后，在胃酸的作用下代谢物与蛋白质发生解离，对人体具有致癌性和诱导基因突变作用14杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氟喹诺酮类（Fluoroquinolones，FQNS）诺氟沙星Norfloxacin双氟沙星Difloxacin依诺沙星Enoxacin恩诺沙星Enrofloxacin氧氟沙星Ofloxacin培氟沙星Pefloxacin环丙沙星Ciprofloxacin单诺沙星Danofloxacin麻保沙星Marbofloxacin斯帕沙星Sparfloxacin······15杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氟喹诺酮类的药物作用对G-杆菌敏感对G+球菌有一定抗菌作用对MRSA有效对衣原体、支原体、厌氧菌亦有一定作用16杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氟喹诺酮类的不良反应中枢神经系统毒性关节病变皮肤及光毒性消化道不良反应肝肾毒性血液系统毒性17杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)磺胺二甲嘧啶(SM2)、磺胺异噁唑(SIZ)磺胺嘧啶(SD)、磺胺甲基异噁唑(SMZ)磺胺甲氧嘧啶(SMD)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)磺胺噻唑(ST)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)磺胺甲氧哒嗪(SMP)、磺胺甲氧吡嗪(SMPZ)磺胺喹噁啉(SQ)、磺胺脒(SG)对位氨基苯磺酰胺（简称磺胺）18杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.磺胺类药物的作用磺胺类药对许多革兰氏阳性菌和一些革兰氏阴性菌、诺卡氏菌属、衣原体属和某些原虫（如疟原虫和阿米巴原虫）均有抑制作用19杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.磺胺类的毒性①过敏反应②肾脏损害：由于乙酰化磺胺溶解度低，尤其在尿液偏酸时,易在肾小管中析出结晶,引起血尿、尿痛、尿闭等症③造血系统的影响：磺胺药能抑制骨髓白细胞形成，引起白细胞减少症④中枢神经系统和胃肠道反应：多由于磺胺达到足量所致20杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.贸易技术壁垒发达国家的贸易保护主义出口食品屡屡遭遇绿色壁垒21杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.氯霉素超标水产品出口量下降50%2002年1月欧盟委员会氯霉素超标禁止进口中国水产品沙特阿拉伯出口鳗鱼检出孔雀石绿福建、江西、安徽2005年欧盟日本韩国欧盟氟喹诺酮类超标鲨鱼、鲶鱼片硝基呋喃类代谢物超标宁波冻烤鳗，损失54万美元日本2006年4月氟喹诺酮类超标停止销售鲶鱼美国亚拉巴马州2007年5月检出硝基呋喃全面禁止进口冷冻虾台湾卫生署2002年9月2005年10月2007年7月日本厚生省检出AOZ烤鳗2009年5月22杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.食品中药物残留检测法律依据23杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.食品安全法2009年6月1日，新的《中华人民共和国食品安全法》正式实施24杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.食品安全法确立了由卫生、农业、质检、工商、食品药品监管等五个部门进行分段监管的食品安全监督管理体制。25杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.政策法规我国农业部第193号公告我国农业部第253号公告（2002年12月24日）NY5070-2002无公害食品水产品中渔药残留限量欧盟指令NO.508/99/EEC欧盟指令NO.2002/657/EC26杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.药物名称动物种类靶组织MRLs氯霉素及其盐、酯所有食品动物所有可食组织不得检出孔雀石绿所有食品动物所有可食组织不得检出呋喃唑酮、呋喃它酮所有食品动物所有可食组织不得检出甲基睾酮所有食品动物所有可食组织不得检出五氯酚钠所有食品动物所有可食组织不得检出己烯雌酚及其盐、酯所有食品动物所有可食组织不得检出甲硝唑、地美硝唑、洛硝哒唑所有食品动物所有可食组织不得检出喹乙醇水产品所有可食组织不得检出最大残留限量值MRL27杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.药物名称动物种类靶组织MRLs氟喹诺酮类恩诺沙星+环丙沙星牛/羊、猪、家禽外其他动物肌肉总量100ppb单诺沙星其他动物肌肉100ppb双氟沙星其他动物肌肉300ppb沙拉沙星鱼肌肉+皮30ppb噁喹酸鱼肌肉+皮300ppb氟甲喹鱼肌肉+皮500ppb土霉素/金霉素/四环素鱼/虾肉单个或复合物100ppb磺胺类所有食品动物肌肉总量100ppb注：数据来源于2002年12月24日我国农业部第253号公告、NY5070-2002无公害食品水产品中渔药残留限量。28杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.药物名称色谱仪器法ELISA法胶体金免疫层析法国家标准行业标准国家标准行业标准国家标准行业标准氯霉素√√×√××孔雀石绿√√××××硝基呋喃类√√×√××四环素类√√×√××氟喹诺酮类√√×√××磺胺类√√×√××己烯雌酚×√××××甲基睾酮×√××××五氯酚钠×√××××硝基咪唑类√√××××喹乙醇×√×√××方法标准注：“√”表示已形成相应国标、行标；“×”表示未形成相应国标、行标。29杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.水产品中药物残留检测技术及相应产品30杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.主要检测方法仪器法(HPLC,LC-MS,GC-MS等)筛选法ELISA法胶体金免疫层析法确证法31杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.检测方法色谱法酶联免疫法胶体金免疫层析法检出限++++++样品处理时间约3小时约30~60分钟约30分钟测定所需时间约10~30分钟约90分钟约3~5分钟特殊仪器要求色谱仪酶标仪无技术水平要求很高较高很低结果计算或判断需制作标准曲线需制作标准曲线肉眼直接判断单样本检测√×√储存条件常温2~8℃4~30℃安全性低低高检测成本很高高低方法比较32杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.胶体金免疫层析法优势便宜安全快速简便准确33杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.胶体金免疫层析技术(ColloidalGoldImmunochromatographicStripAssay,GICA)待检样品毛细管作用34杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.操作示意图35杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.结果判断示意图36杭州南开日新生物技术有限公司HangzhouNanKaiBiotechCo.,Ltd.适用对象水产品质量安全监管机构水产品质量检测中心水产品生产加工企业水产品养殖基地、水产技术合作社农贸市场、水产批发市场、超市