中药制剂质量标准研究制定与审核

中药制剂质量标准研究制定与审核江苏省食品药品监督检验研究院郭青提纲•中药标准的研究制定–标准的分类和等级–标准的要求–标准的起草制定–标准的提高–标准正文和起草说明的书写•中药标准的审核–标准的控制结构的合理性–处方的审核–制法工艺的审核–方法的合理性审核–实验的复核–审核结果的形式标准的分类和等级1.国家药典标准1963年-2010年版2.部颁标准卫生部中药成方制剂国家食品药品监督管理局新药转正标准国家食品药品监督管理局地标升国标企业注册标准3.地方标准–省药材标准–省炮制规范4.医院制剂标准标准的要求•方法的科学性–色谱行为良好•斑点清晰度，•峰对称性，•斑点和峰的分离度•同系物分离彻底–全套方法学(见药典附录ⅩⅧA）•最关键的3个参数–准确性-回收率–专属性-阴性无干扰–耐用性»不同品牌仪器»不同品牌色谱柱、不同品牌以及不同制备方法的薄层板»不同温湿度标准的要求•方法的可行性–在达到目的的前提下，尽量简单易行–具有普适性，大多数实验室能做到–如果同样能解决问题，尽量经典，不追求高精尖•方法的重现性–不同次–不同人–不同实验室–不同温湿度标准的研究制定样品的收集–代表性：•不同批次药材生产的产品•不同产地药材生产的产品•相隔一段时间生产的不同批号的产品–批次：不少于3批，指纹图谱10批–药材基原的正确性–严格按工艺生产的样品标准的研究制定【处方】药材和炮制品均按药典名称，药典未收载的按地方标准。【制法】参照药典按规范书写，参数（如浓缩后相对密度，测定温度，辅料种类）和制成总量（以1000为单位）明确。【性状】根据样品如实描述，主色系在前辅色系在后，允许颜色范围，但尽量不要跨色系描述。标准的研究制定【鉴别】鉴别某味药的存在。•在达到目的的前提下，可采用任何方法，力求简单易行。•一种方法或一个项目同时鉴别多味药是目前趋势。常采用的方法:•显微鉴别：生粉投料仍具显微特征性的药味，–如大黄、人参中草酸钙簇晶；–黄芩、当归中纤维；–五味子中种皮石细胞等•理化鉴别：颜色反应鉴别某一类成分的存在，–如蒽醌类升华反应，–挥发油类的硫酸香草醛反应；–生物碱的碘化铋钾反应等。•薄层色谱：采用对照药材、专属性或特征性的对照品，常常一个薄层鉴别一味药，目前出现一个薄层鉴别2味或多味药的趋势。需进行专属性和耐用性验证。标准的研究制定薄层鉴别在标准制定中常出现的问题：•背景干扰大，拖尾。–加强样品前处理，如根据化学性质液液萃取；过柱净化；调节pH改变溶解度；沉淀杂质或沉淀待测物质然后再溶解•展开效果受温湿度和薄层板影响大，色谱行为不固定。–可固定温湿度，选择斑点清晰且分离度好的薄层板（建立一个方法时不是所有品牌薄层板都适用，但常用的预制板如果可行，此时方法仍然可上正文，但须在标准说明中说明哪些板效果好，哪些板效果不好）•与对照药材斑点不完全吻合（Rf不完全一致）。–对照药材尽量不选择边缘通道–加通道点样：对照品+样品•随行对照时主斑点判断难以掌握。–主斑点为含量较高的斑点，斑点大而色深，且阴性样品中不具备»主斑点请按不吻合上最好»在复杂样品中主斑点部分吻合也认可标准的研究制定•薄层鉴别在标准起草中的禁忌：–不清晰或未达到一定分离度的斑点、拖尾强烈的背景。–薄层色谱行为变化大，符合要求的色谱行为具有偶然性，很难在另一个实验室重现，用偶然性结果上标准正文。–不进行耐用性考察。–甚至专属性不过关。•非某味药的专属性斑点，其他药味也有贡献，可能是同一成分，也可能不是同一成分。•专属性斑点有时与邻近斑点能分开，有时与邻近斑点分不开，后者情况下会造成假阳性现象，导致错误判断结果。标准的研究制定•薄层鉴别在标准起草中遇到的一些特殊情况和解决方案–处方中同时含相同的对照品成分的药味•当归和川芎-阿魏酸：改选对照药材•陈皮和青皮-橙皮苷：黄酮含量高低不同•枳壳与枳实-柚皮苷：改选其他对照品如辛弗林•金银花与山银花-绿原酸：改选其他对照品如灰毡毛忍冬皂苷乙、木犀草苷标准的研究制定•薄层鉴别在标准起草中遇到的一些特殊情况和解决方案大处方（20味以上）成药在标准中鉴别项上多少味合适？一般是三分之一的药味(但本次医院制剂提高只要求不少于3味）大处方中多数药味成分不明确或尚未开发鉴别方法，导致鉴别项不足怎么办？只要考察研究了，最终上不了正文也认可但没有进行研究是不行的，需在起草说明中详细说明每个项目的研究过程和不能上正文的理由含量测定项与鉴别项采用同一个对照品可不可取？是一种凑数的做法一定要这样做，需增加对照药材同时对照将偶然性的好效果方法上正文不可取，复核中一旦发现，应下掉标准的研究制定•薄层鉴别在标准起草中遇到的一些特殊情况和解决方案：避免项目太多，标准篇幅过长，操作繁琐•如果几十味药的处方，鉴别需要10味以上的药味，一般控制不要超过5-6个鉴别项（医院制剂有3个即认可，不得少于3个，但超过6个鉴别项也太多）。•这种情况应善于合并同类项，利用一测多评手段，如用2个不同药味特征性对照品在同一薄层系统中鉴别2味药。•鉴别项中采用液相或气相特征图谱是一个项目同时鉴别多味药的有效手段之一。有时薄层出不了好效果，改用液相或气相色谱则是有效的手段标准的研究制定4.液相或气相色谱鉴别：–薄层色谱难以达到目的的情况下，可采用液相或气相色谱鉴别，一般选择特征性对照品或对照药材进行对照，在专属性验证过关后，往往结果的判断比薄层色谱法更准确和容易。–多味药尤其是大处方情况下，薄层色谱难以兼顾多味药同时鉴别，可采用液相或气相色谱建立特征图谱进行多味药的同时鉴别，采用每味药的特征性对照品，或采用对照药材。–单味药如果收载基原较多，需要固定基原；或该味药的混乱品种较多，需要正本清源。这种情况下，可采用采用液相或气相色谱建立特征图谱进行鉴别。标准的研究制定•特征图谱–色谱图中需明确某味药的特征性峰，从而证明该味药的存在•采用对照品对照•采用对照药材对照•采用对照提取物对照–色谱图中需明确特征峰的身份和药味归属，特征峰需有较高的出现频率并在出现频率上需稳定，对高低不作要求–身份或归属不明确、出现频率不稳定的色谱峰视为非特征峰–不追求或忽略细小峰的表达标准的研究制定•标准正文中特征图谱的要求–目的在于鉴别的特征图谱放在鉴别项中–文字叙述中需明确特征峰个数，并需配有色谱图，色谱图中的特征峰需以阿拉伯数字标识，参照物峰以S标识，总峰数应与文字描述的峰数相一致。【检查】常规项目药材成药杂质装量水分水分灰分和酸不溶性灰分pH浸出物相对密度崩解浸出物标准的研究制定【检查】安全性项目药材成药重金属有害元素微生物限度或无菌（验证资料）农药残留可见异物黄曲霉毒素不溶性微粒SO2残留热原或细菌内毒素毒性成分溶血与凝血过敏试验降压物质毒性成分重金属有害元素农药残留标准的研究制定重金属有害元素•适用范围–某些对重金属富集性强的根类药材，如丹参、人参、黄芪–菌类药材，如香菇、冬虫夏草、灵芝–食土类动物药材，如地龙、地鳖虫–水产品类药材，如海马、牡蛎、藻类–上述药为生粉入药的中成药–含矿物药的中成药（暂不能按常规要求限度）–中药注射剂（2013年12月1日后必须检查）•测定元素及药典限度：–铅：千万分之五（注射剂：按每日最大使用量计算，铅应不得超过12μg）–镉：千万分之三（注射剂：按每日最大使用量计算，镉应不得超过3μg）–砷：千万分之二（注射剂：按每日最大使用量计算，砷应不得超过6μg）–汞：千万分之二（注射剂：按每日最大使用量计算，汞应不得超过2μg）–铜：千万分之二十（注射剂：按每日最大使用量计算，铜应不得超过150μg）•方法：药典附录收载–原子吸收（AA）–ICP-MS–ICP-AES重金属有害元素•本次医院制剂标准提高–适用范围•同中成药国家标准要求–方法（注意供试液与对照液的配制浓度）•铅比色法•砷斑法–限度•视实际情况而上正文，视实测结果而定限度农药残留测定•适用范围–根类、叶类等富集性强的药材及饮片–上述根类、叶类等生粉入药的中成药•测定的农药种类、方法和限度–有机氯•药典测9种（BHC，DDT，PCNB）•GC-ECD，GC-MS•限度：总BHC和总DDT分别不得过千万分之二，PCNB不得过千万分之一–有机磷•药典测12种（对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷）•GC-NPD，GC-MS•限度：现版药典暂未订–拟除虫菊酯•药典测3种（氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯）•GC-ECD，GC-MS•限度：现版药典暂未订–氨基甲酸酯•现版药典暂未上•HPLC-FD•限度：现版药典暂未订黄曲霉毒素•适用范围–果仁类药材及饮片，如桃仁（杏仁、胖大海、马钱子）–上述药材生粉入药的中成药•药典测定的种类–黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的单个量和总量•药典测定方法–HPLC-碘衍生化-荧光检测•药典限度–如桃仁：黄曲霉毒素B1不得过5μg，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的总和不得过10μgSO2残留量药典附录方法酸蒸馏-氧化还原滴定法水蒸气蒸馏-离子色谱-电化学检测法顶空进样-气相色谱-热导检测法药典限度规定11种传统药材及饮片不得超过150ppm山药、牛膝、粉葛、甘遂、天冬、天麻、天花粉、白及、白芍、白术、党参其他所有药材及饮片不得超过400ppm毒性药材毒性药材中的毒性成分乌头、附子：双酯型生物碱（药典有3个碱之和的上下限）洋金花：莨菪类生物碱（药典有东莨菪碱的上下限）麻黄：麻黄碱、伪麻黄碱（药典有二者之和的下限）马钱子：士的宁（药典有上下限）、马钱子碱（药典只有下限）罂粟壳：罂粟碱（药典未规定)、吗啡（药典有上下限）细辛：马兜铃酸Ⅰ（药典有上限）巴豆：脂肪油（药典对巴豆霜中脂肪油有上下限）千金子：脂肪油（药典对千金子霜中脂肪油有上下限）天仙子：东莨菪碱、莨菪碱（药典只有下限）千里光：阿多利弗林（药典有上限）毒性矿物药雄黄：含砷As，其毒性随不同价态而异，现版药典中As2O3为限量控制的毒性成分朱砂：含汞Hg，现版药典对水飞朱砂粉中的水溶性汞盐进行限量控制红粉：含HgO，现版药典对亚汞化合物和氯化物有检查控制轻粉：含Hg2Cl2，现版药典对升汞和汞珠有检查控制毒性动物药斑蝥：斑蝥素（药典只有下限）蟾酥：华蟾酥毒基、脂蟾酥配基（药典只有下限）毒性药材•尚未控制毒性成分的现版药典收载毒性药材–白附子–狼毒–凌霄花–天南星–京大戟–闹羊花–天仙子–甘遂–半夏–常山–蜈蚣–全蝎•从药典下掉的毒性药材–砒霜：三氧化二砷–马兜铃酸类：关木通、广防已、马兜铃、青木香、天仙藤、木防己、细辛、寻骨风、威灵仙–雪上一枝蒿–红娘虫、青娘虫毒性药材检查项制定时对毒性成分只订上限限度制订：按日服量制订上限方法：TLC法：按日服量配制适当浓度的对照品溶液和相应的供试液，供试液相对应斑点不得比对照品斑点大和深HPLC法配制规则同TLC法，供试液的相对应色谱峰峰面积值不得大于对照品色谱峰面积采用外标法计算样品中毒性成分的含量，不得过限度毒性成分检查项的溶液配制•例：–某毒性药材•药典规定的其毒性成分上限为a(mg/g)•药典规定的该毒性药材日服量为b(g)–某成药含有该味药材•成药的规格为c(g)/粒（片），服法为：一日m次，每次n粒（片），则日服量为c×m×n(g)–溶液浓度的计算•原则：成药每日服用的毒性成分量应不得超过毒性药材每日服用的毒性成分量•公式：如果成药中毒性成分的含量为x（mg/g），则x×c×m×n≤a×b，x≤（a×b）/（c×m×n）•含量计算法：x应订为该成药中的该毒性成分的上限•面积对比法：关键是溶液配制的浓度–对照品溶液的浓度应以斑点大小和深浅合适为宜，或者以色谱峰高低合适为宜（必须高于检测限）而配制浓度，浓度确定后，按下列公式求得V，V=(a×b)/对照品溶液浓度–供试液的浓度必须按上述求得的V配制，供试液浓度=(c×m×n)/V微生物检查•无菌检查–注射剂–眼科制剂–用于破皮的外用制剂•微生物检查-口服制剂（药典附录P88）–有动物药，增检