真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究1真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究2真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究1谨以此论文献给敬爱的导师我挚爱的家人及所有关心和帮助我的老师、同学和朋友-------刘兆胜真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究1真蛸基础生物学和繁育技术研究学位论文答辩日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究2独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得(注:如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日---------------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下事项:1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》,授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:导师签字:签字日期:年月日签字日期:年月日真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究1真蛸基础生物学和繁育技术研究摘要真蛸(Octopusvulgaris)主要分布于我国南部沿海。近年来随着出口量增加,经济价值不断攀升,已成为我国重要的经济头足类之一,同时渔获量的增大也加剧了野生资源量下降。研究真蛸基础生物学和繁育技术,对于保护和合理利用自然资源,开发新的养殖品种具有重要的现实意义。本文以我国福建海域分布的真蛸为研究对象,开展了真蛸基础生物学和繁育技术研究。基础生物学部分主要包括:真蛸腕式、胚胎发育和Kölliker器官;繁殖生物学部分主要包括:亲蛸暂养、产卵护卵、幼体培育和各培育阶段相配套的饵料研究。在此基础上摸索出一套真蛸促熟、产卵、孵化和苗种培育的人工繁育技术,为规模化养殖、资源修复提供支撑。主要结果如下:(一)基础生物学部分1.运用SPSS17.0软件,分析了2010-2013年间福建海域捕获的105只真蛸形态学数据。实验结果显示真蛸腕式为IIIIIIVI;除茎化腕外,腕左右对称。雄性个体第二、三对腕上具有大吸盘,一般为第13个吸盘。福建真蛸捕获季节(6月),体重在500-800g之间较多(雌性占70%,雄性占50%),大于900g的较少(雄性占39.6%,雌性为18.1%)。2.通过室内繁养真蛸,详细观察了真蛸胚胎发育和浮游期幼体生长过程,描述了各时期外部形态和重要器官的发育特征。结果表明:真蛸成熟卵子长径为(2.4±0.2)mm,短径为(1.2±0.1)mm。根据Naef(1928)划分标准,发育过程分为20个时期,发育期间胚胎经历两次翻转。水温20.4-23.6℃范围,从受精卵到幼体孵化出膜,经历25-35d,初孵幼体全长约为3.08mm。水温22.8-25.2℃时,幼体浮游期约为28-33d。3.采用扫描电镜技术观察了真蛸浮游期幼体Kölliker器官的分布与变化情况。Kölliker器官呈点状突起,长度为40-50μm,位于初孵幼体的头部、腕、漏斗和外套膜处,其中头部腹侧和腕尖部密度最大,约占外套膜表面积的6-7%。Kölliker器官大约由1400根独立的管状小体组成,每个管状小体直径为0.4μm。探讨了Kölliker器官在浮游期的功能。真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究2(二)人工繁育技术部分1.分别采用文蛤(Meretrixmeretrix)、菲律宾蛤仔(Ruditapesphilippinarum)、缢蛏(Sinonovaculaconstrzcta)、许氏平鲉(Sebastodesfuscescens)投喂处于产卵、护卵期的真蛸亲体,通过测量亲蛸摄食量、产卵量、受精卵孵化率以及初孵幼体大小,分析4种不同饵料对亲体和幼体的影响。结果表明:亲蛸摄食量以文蛤投喂组最高(19.50g),菲律宾蛤仔组次之(18.28g)。亲蛸产卵量和受精卵孵化率以菲律宾蛤仔投喂组最高,平均产卵量为13.6万粒,受精卵孵化率为94.34%;缢蛏组平均产卵量最低,为9.89万粒,对照组孵化率最低,为81.11%。初孵幼体全长实验中菲律宾蛤仔投喂组最长,平均2.43mm;缢蛏文蛤组次之,为2.39mm;许氏平鲉组较小,为2.34mm;对照组幼体最小,为2.30mm。处于产卵护卵期的亲蛸仍可以摄食,摄食量约为亲蛸体重的2%-5%。亲体通过摄食能提高受精卵的孵化率和初孵幼体体长。菲律宾蛤仔是较理想的饵料。2.2010-2013年连续三年开展真蛸的苗种培育实验,研究了开口饵料、光线对幼体生长率和成活率的影响,同时分析了浮游期幼体胴长、全长、湿重、干重的变化以及吸盘的发育。真蛸初孵幼体营浮游生活,平均全长为2.76-3.06mm。浮游阶段幼体腕增长和吸盘数目增加较为显著,幼体吸盘数目变化趋势符合指数函数y=2.6611e0.2215x(R²=0.9869)。蒙古裸腹溞、日本对虾和卤虫的无节幼体均可作为真蛸浮游期幼体的饵料。饵料中添加蟹幼体,培育效果更佳。真蛸幼体干重变化趋势为y=0.1366e0.5968x(R²=0.9708)。关键词:真蛸,胚胎发育,Kölliker器官,繁殖生物学,苗种培育,开口饵料真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究3StudiesonFundamentalBiologyandArtificialReproductiveTechniqueofOctopusvulgarisAbstractOctopusvulgarisismainlydistributedinthecoastalwatersofsouthernChina.Asoneoftheimportanteconomiccephalopods,itsexporthasbeenincreasinglittlebylittleinresentyears.Meanwhile,theincreasingfisherycatchpressurehasresultedindrasticdropofnatualresources.Therefore,thestudiesonfundamentalbiologyandartificialreproductionofthespeciesisofgreatimportancetotheprotectionandrationalutilizationofnatualresources.ThisthesisstudiesthefundamentalbiologyandbreedingtechniquesforOctopusvulgarisinthesoutheastChinasea.Thebasicbiologystudycoveredthearmformula,embryodevelopmentandKöllikerorgan;whilethebreedingbiologyincludedtemporarycultureofparents,spawningandeggcaring,larvacultivation,andfeedsforvariouslivingstages.Basedonthesestudies,breedingandculturetechniqueofthespeicesbuilitup,whichwouldserveassupportsforfactorycultureandrestorationofnatualresources.Herearethemajorachievements:(一)Basicbiology1.Themorphologydataofthe105OctopusvulgarisindividualscapturedinthesoutheastwatersofFujianProvincein2010-2013.TheresultsshowedthatthearmformulawasIIIIIIVI,exceptforthehectocotylizedarm,therewasnoapparentdifferencebetweenthebilateralsymmetricarms(p0.05).Therewereenlargedsuckersonthe2ndand3rdpairofarmsofthemale,usuallythe13thsucker.MostofOctopusvulgariswere500-800g(70%offemaleand50%ofmales)weightinJune,withsomeover900g(39.6%ofmalesand18.1%offemales).2.Octopusvulgariswasrearedandbredindoorsanditsembryonicdevelopmentandgrowthofparalarvaewereobserved.Themorphologicalcharacteristicsofdifferentembryonicstagesweredescribed.Suckergrowthofparalarvaewasillustratedusing真蛸(Octopusvulgaris)基础生物学和繁育技术研究4scanningelectronicmicroscopy.Theresultsshowedthatmatureeggswere(2.4±0.2)mminlengthand(1.2±0.1)mminwidth.AccordingtoNaef(1928),theprocessofembryonicdevelopmentwasdividedinto20stages,withtwicereverses.Thedevelopmentoffertilizedeggsrequired25-35dbeforehatchingat20.4-23.6℃.Theaveragelengthofnewlyhatchedlarvaewasabout3.08mm.Theparalarvalstagekept28-33datthehatchingtemperatureof25.2-22.8℃.3.Köllikerorganoftheparalarvaewasobservedbyscanningelectronmicroscopey.Theorganlookslikedotprotuberanceof40-50μminlengthlocatedatthehead,arms,funnelandpallium,withthemostattheveutrooftheheadandthearmtips,taking6-7%ofthesurfaceofthepallium.TheKöllikerorganiscomposedof1400independenttube-likeglobuleof0.4μmindiameter.(二)Breedingtechniques1.TheparentsofOctopusvulgarisinspawningandprotectingpe