体液检验的质量控制

体液学检验的质量控制体液学检验范畴•体液学检验包括：•尿液、脑脊液、胸腹水等各种体液及粪便的常规检验及形态学检验等。体液检验质量控制的技术要求1、人员2、设施和环境：2.3、如使用尿干化学试条，其存放条件（如湿度）应符合要求。用以保存临床样品和试剂的设施应设置目标温度和允许范围，并记录。应有温湿度失控时的处理措施，并记录。2.6、应依据所用分析设备和实验过程的要求，制定环境温湿度控制要求并记录。应有温湿度失控时的处理措施并记录。3、实验室设备、试剂和耗材3.1.4应按国家法规要求对强检设备进行检定。应进行外部校准的设备，如果符合检测目的和要求，可按制造商校准程序进行。应至少对分析设备的加样系统、检测系统、温控系统进行校准（适用时）。分析设备和辅助设备的内部校准应符合CNAS-CL31《内部校准要求》。•尿液有形成分分析的水平离心机应有盖；应能提供400g的相对离心力（RCF）。应每12个月对离心机进行校准。实验室设备、试剂和耗材3.1.5设备故障后，应首先分析故障原因，如果设备故障可能影响了方法学性能，故障修复后，可通过以下合适的方式进行相关的检测、验证：（a）可校准的项目实施校准验证，必要时，实施校准；（b）质控物检验；（c）与其他仪器或方法比对；（d）以前检验过的样品再检验。4、检验前过程4.2、应针对不同类型的体液样品规定不同的采集方法和要求。--对自行采集样品的患者，实验室或相关医护人员应指导其正确采集样品。--有特殊采集要求的样品，应在医生或护士的协助下完成采集。4.5、所有体液样品应用密闭容器运送。5、检验过程5.1.2、尿液干化学分析仪性能验证的内容至少应包括阴性和阳性符合率；--尿液有形成分分析仪性能验证的内容至少应包括精密度、携带污染率和可报告范围。检验过程5.1.3、如可行，尿液样品应全部进行显微镜有形成分检查；如使用自动化仪器做有形成分筛检，实验室应制定尿液有形成分分析的显微镜复检程序，并进行确认：（a）明确显微镜复检程序制定的依据、方法；（b）规定验证方法及标准，对复检程序进行验证，假阴性率应≤5%。5.5.2应至少使用20份健康人尿样品验证尿液有形成分分析仪检验项目的生物参考区间。6、检验结果质量的保证6.2.2、尿液有形成分分析仪红细胞、白细胞计数检验项目，可参照GB/T20468-2006《临床实验室定量测定室内质量控制指南》进行室内质控。---应至少使用2个浓度水平（正常和异常水平）的质控物，每检测日至少检测1次，应至少使用13s、22s失控规则。---定性体液学检验项目应至少使用阴性和阳性质控物进行室内质控，每工作日至少检测1次，偏差不超过1个等级，且阴性不可为阳性，阳性不可为阴性。检验结果质量的保证6.3.1、应按照CNAS-RL02《能力验证规则》的要求参加相应的能力验证/室间质评。应保留参加能力验证/室间质评活动的结果和证书。实验室负责人或指定人员应监控能力验证/室间质评的结果，并在结果报告上签字。检验结果质量的保证6.3.2、通过与其他实验室（如已获认可的实验室或其它使用相同检测方法的同级别或高级别实验室）比对的方式确定检验结果的可接受性时，应满足如下要求：（a）规定比对实验室的选择原则；（b）样品数量：至少5份，包括正常和异常水平；（c）频率：至少每年2次；（d）判定标准：应有≥80%的结果符合要求。检验结果质量的保证6.4、实验室内部结果比对应符合如下要求：（a）检验同一项目的不同方法、不同检测系统应至少6个月进行结果的比对：－尿液分析仪的比对应在确认分析系统的有效性及其性能指标符合要求后，至少使用5份临床样品（含正常和异常水平）进行比对；--定性检测偏差应不超过1个等级，且阴性不可为阳性，阳性不可为阴性；--尿液干化学分析仪、尿液有形成分分析仪如型号不同，则不宜比对；检验结果质量的保证（b）对于尿液中有形成分检查，尿液干化学分析仪、尿液有形成分分析仪、尿液沉渣显微镜检查之间不宜进行比对；（c）应定期（至少每6个月1次，每次至少5份临床样品）进行形态学检验人员的结果比对、考核并记录；（d）比对记录应由实验室负责人审核并签字，并应保留至少2年。尿液检验质量控制分析前质量控制分析中质量控制分析后质量控制分前质量控制病人准备标本采集标本运送检验流程的确定质量监管标本采集前病人的准备告知病人检测时间和方法1。留尿时间:清晨第一次尿为宜。急诊病人可随时留尿2。留尿方法：清洗外阴，弃去前段尿，留中段尿，避免经血，白带，粪便等混入3。食物对结果的影响过量饮水—尿液稀释，致假阴性高蛋白饮食—PH降低、NIT假阴性提醒病人注意控制药物的影响：化验单应注明药物对部分结果的影响PH：碳酸氢钠、乙酰唑胺等糖：皮质醇、阿司匹林、对氨基水杨酸等致假阳性；VitC、左旋多巴、非那宗吡啶等致假阴性。酮体：水杨酸盐、苯乙双胍等致假阳性。蛋白：奎宁、等致假阳性、大量青霉素致假阴性。隐血：大量VitC致假阴性。白细胞：呋喃妥因,庆大，头孢氨苄等致假阳性；管型：影响肾功能的抗生素、抗结核药、抗肿瘤药、麻醉药、疫苗、类毒素、免疫血清等均可能引起假阳性。尿液标本的收集留尿容器的要求1新鲜的尿是分析的质量保证2收集标本的容器要求干净3标本容器上应有标签：姓名、科室、病床、收集的时间等4容器应为一次性用品5容器应为50ml以上容器要求：一次性洁净容器，容积＞50ml，圆形口直径＞4.0cm,底部较宽易于开启的密封装置不同方式所采尿标本的检测应用范围尿标本采尿的方式适用范围不适用范围中段尿第一次晨尿细菌检验试带过筛亚硝酸盐试验尿沉渣镜检蛋白检验临床化学检验中段尿第二次晨尿试带过筛亚硝酸盐还原试验葡萄糖,蛋白定量随意尿餐后尿:测尿糖尿细菌检查膀胱穿刺尿细菌学检查尿沉渣镜检定量标本定时尿,3h,12h,24h尿沉渣人工定量尿细菌检查临床化学检验来源:Roche[尿液基础与实验诊断]2003版,P9.德文PeterHagemann,HoretKimling,BerndZawta等,顾可梁翻译男性患者尿标本采集1、留尿前先洗手2、指导未行包皮切除的患者褪上包皮，露出尿道口用消毒清洁的小布巾清洁阴茎头，从尿道口开始向上清洁3、前段尿去掉，采集中段尿到容器中，后段排掉4、避免前列腺液或精液混入。女性患者尿标本采集1、留尿前先洗手2、采用蹲式3、用消毒清洁的小布巾清洁尿道口和周围处4、前段尿去掉，采集中段尿到容器中，后段排掉避开月经期，防止阴道分泌物混入尿内婴幼儿尿标本采集——国外推荐用尿标本采集袋分开儿童的双腿保证会阴部清洁、干燥、无黏液、勿施粉、油等移去防护纸，拉紧皮肤，将采集袋紧贴于会阴/阴茎处定时（如每15min）察看容器将无污染尿液倒入采集杯中送检尿液标本的种类1、晨尿：清晨第一次尿为晨尿，这种尿标本较为浓缩，可用于肾脏浓缩能力评价，有利于尿液形态学和化学成分分析。2、随机尿：即随时留取的尿，标本新鲜，适合门诊急诊患者的尿液检查。但此尿液易受多种因素影响，使尿检成分浓度减低或增高，造成结果对比的混乱。3、负荷尿：为特殊需要检查一定负荷后的尿如葡萄糖负荷后的糖耐量试验，运动负荷后的运动后血尿，起立活动后的直立性蛋白尿等。4、餐后尿：通常收集午餐后至下午2时的尿，有利于检出病理性糖尿，蛋白尿，或尿胆元5、餐前尿：餐前半小时至一小时排尿弃去，进餐前再留尿检测尿糖。尿糖浓度反映餐前空腹血糖平均水平，用于糖尿病治疗和监测6计时尿:一般根据临床诊断或疾病观擦的需要,按特定的时间采集尿液标本7、3小时尿；收集上午6-9时时段内的尿液，检查尿液有形成分排泄率8、12小时尿：晚8时至次晨8时之内的12小时全部尿液，用于爱迪氏计数9、24小时尿：患者上午8时排尿，此后收集各次排出的尿液，至次日上午8时最后一次排尿的全部尿液特殊试验尿1、中段尿：适用于尿培养。先用肥皂和清水清洗外阴及尿道口，无菌纱布擦干，在不间断排尿过程中弃去前段尿，以无菌带盖杯留取中段尿2、导管尿：患者发生尿潴留或排尿困难时，由医护人员用导尿管取尿3、病情需要膀胱穿刺取尿注意事项1、最好使用一次性尿杯2、留尿后2小时内检验，否则应冷藏，测试前需复温。3、24小时尿测尿酸，肌酐，蛋白，钾钠氯等成分按5毫升/升的尿量加入甲苯4、测肾上腺皮质激素，香草扁桃酸，钙磷等成分按1毫升/升尿加入浓盐酸。1、室温下尿液成分随着时间的延长而改变红细胞减少，皱缩,破碎,消失白细胞减少上皮细胞成为裸核细菌增加PH增高加速红细胞溶解2、冷藏影响结晶和无定型物质增加，影响有形成分检测尿液标本的存放时间标本送检：立即2小时内检测尿液分析流程(1)——手工方法尿液样本尿液干化学离心镜检所有样本方法学优点：1、尿液分析流程完整2、尿有形成分分析方法符合标准化要求3、方法容易普及方法学缺点：1、工作效率低2、无法满足高峰时或较大样本的检测需求3干化学法存在较多假阳性，假阴性尿液分析流程(2)尿液样本自动尿液干化学分析仪离心镜检计数板阳性阴性方法学优点：1、快速筛选后，缩短了报告时间2、方法比较容易普及方法学缺点：1、干化学有形成分的检测存在缺陷2、干化学作为筛选方法，假阳性、假阴性过高3、复检率高，同时又容易漏检尿液分析流程(3)全自动尿液干化学尿有形成分图像识别系统图像浏览，修正结果DataData报告方法学优点图像易于保存、方法比较容易普及方法学缺点检测流程不标准显微摄像镜头只能随机地采到流动样本中通过该焦点的细胞，能对所有目标采集清晰图像进行形态学识别分析，定量不准确，随意性大变形、破碎、不同角度通过的细胞不能识别筛选速度慢、无质控尿液分析流程(4)全自动尿液干化学全自动尿有形成分UF显微镜确认LISDataDataDataOrder报告方法学优点1、符合标准化检测流程，规范实验室操作2、检测效率高3、有效筛选，防止漏检4、质控体系（室内质控室间质评）保障质量控制5、提供新的临床参数（红细胞形态信息、尿路感染信息），附加值高方法学缺点无法保存图像分析中质量控制：标本前处理物理检查化学项目分析有形成分检查质量监控标本的接收1、核对检验申请单的患者信息与标本是否符符合2、混有杂物或与检验目的不符的标本退回，并注明原因3、标本量过少的应重留4、留12或24小时尿做化学成分检测的标本，未放防腐剂的应重留尿液检查的内容：1、物理检查：外观，颜色，浊度，比密。2、化学成分检测：PH，胆红素，尿胆原，葡萄糖，蛋白，酮体，亚硝酸盐3、有形成分检测：白细胞，红细胞，上皮细胞，管型，结晶，寄生虫，细菌，真菌一、物理检查尿液比密：折射计法：尿折射率和尿比密有较好相关性，二者相关系数为0.98，尿折射率和尿渗量在正常及基本正常范围内，相关系数为0.97。因此在正常情况下，尿比密的末二位数*40=尿渗量使用折射仪方法简单，精密度和准确度较比密计高而且标本用量只要1-2滴（也可用于测其他体液比密），解决了尿少病人无法测比密的实际困难。是目前我国测比密的确证方法。原理：入射角为90度的光线进入另一介质（密度不同）时，被折射的角度称为临界角，在终端观察时，依折射临界角的大小，可见明暗视物的改变，进而求出相对折射率。操作：详见说明书附注：1、折射计的校准用10克/升，40克/升，100克/升蔗糖溶液校正折射仪，它们的折射率分别为1.3344，1.3388，1.34792、混浊尿会影响结果判读，加热透明后再测比密计法原理：物质的重量与同体积的纯水，在一定温度下（4度，15.5度）相比，得到的密度为该物质的比密（俗称比重）操作：1。充分混匀尿液后，沿管壁缓慢倒入小量筒中，如有气泡可用吸管或吸水纸吸去2。比密计放入量筒中，使悬浮于中央，勿触及筒壁或筒底。3。比密计停稳后，读取与尿液凹面相切的刻度，即为被测尿液的比密1、比密计的校准：购置的新比密计用纯水在规定温度下观察比密是否准确。蒸馏水15.5度应为1.000，8.5克/升氯化钠夜在15.5度应为1.006，50克/升氯化钠液在15.5度应为1.0352温度的影响：不在指定温度下测定，每高于指定温度（一般以15度为准）3度时，比密应加0.001，每低3度减去0.001。3、尿内容物的影