盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案

盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：1/8项项目目人人员员IItteemmPPeerrssoonnnneell部门/岗位Dept./Position签名Signature日期Date方案起草PreparedbyQC/检验员年月日(Y)(M)(D)方案审核ReviewedbyQC/经理年月日(Y)(M)(D)QA/副经理年月日(Y)(M)(D)QA/经理年月日(Y)(M)(D)方案批准Approvedby质量受权人年月日(Y)(M)(D)颁发部门IssuedbyQA生效日期EffectiveDate年月日(Y)(M)(D)分发部门DistributedtoQC制作备份：1份Copiesprepared:1pcs盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：2/8目录1.概述.........................................................................................................................................32.目的.........................................................................................................................................33.依据及参考文件.....................................................................................................................34.验证小组和各部门职责.........................................................................................................35.验证时间安排.........................................................................................................................46.验证内容.................................................................................................................................47.偏差处理及变更控制.............................................................................................................88.验证结果评价内容.................................................................................................................8附件1：《培训确认表》.......................................................................................................1附件2：《文件检查确认表》.................................................................................................2附件3：《设备确认结果》...................................................................................................3附件4：《试验器材确认结果》...........................................................................................4附件5：《试验用菌种确认结果》.......................................................................................4附件6：《培养基确认结果》.................................................................................................5附件7：《试剂确认结果》.....................................................................................................5附件8：《器皿确认结果》.....................................................................................................6附件9：《总菌落数计数验证结果记录》.............................................................................7附件10：《抑菌效力确认结果记录》...................................................................................8盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：3/81.概述本公司无菌原料药生产工艺中，药液的无菌保证主要通过滤芯除菌过滤来实现。在一定的周期内，截留在滤芯上的微生物可能生长繁殖，当达到一定的数量级后，可能超出滤芯的理论除菌能力。从盐酸头孢吡肟过滤系统相关物料组成分析，药主药为抗生素粗品，理论上分析，上述物料均具有较强的抑菌作用，极不利于微生物的生长繁殖（详见表1）。本方案拟在实验室模拟过滤系统最有利于微生物生长的环境，并在此环境下接种一定数量的微生物，定期取样、培养并观察计数，计算微生物的生长繁殖量。考察滤芯使用周期内盐酸头孢吡肟溶液的微生物增加率，计算微生物累积值，为除菌过滤系统验证提供数据支持。2.目的考察滤芯使用周期内盐酸头孢吡肟溶液的微生物增加率，计算微生物累积值，为除菌过滤系统验证提供数据支持。3.依据及参考文件3.1《中国药典》2010年版二部附录XIJ“微生物限度检查法”3.2《中国药品检验标准操作规范》2010年版“微生物限度检查法”3.3《药品GMP指南》2011年版“无菌药品”3.4《中国药典》2010年版二部附录ⅪⅩN“抑菌剂效力检查法指导原则”3.5SOP-QC-0213-V01《微生物限度检查法》3.6SOP-QA-017-V01《验证管理规程》4.验证小组和各部门职责4.1验证小组及对应职责职位姓名部门具体职责组长谢圣坤QC验证总协调工作，并审核验证的数据组员常磊QC负责验证方案和验证报告的起草，负责验证数据的收集，负责检品的检测与验证记录的填写。辛海安QC负责检品的检测与验证记录的填写。朱利安盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：4/8许维雅李艳姣刘利彭艳妃QC监督验证过程实施及验证过程中的偏差及OOS处理。吴东琴QA负责验证方案和验证报告的归档保存。监督验证过程实施及验证过程中的偏差及OOS处理。4.2验证委员会姓名职务职责颜杰质量受权人1.负责验证方案及报告的批准；2.负责验证过程中出现的偏差/OOS的批准放行。马立如QA经理1.负责验证方案及报告的审核；2.负责验证过程中出现的偏差/OOS的评估。张德志QA副经理5.验证时间安排时间工作内容2013.04方案起草、审批2013.04标准确认、检验方法确认2013.04完成报告6.验证内容6.1验证前准备6.1.1培训确认本次验证内容是否已对相关人员进行培训，检查确认结果记录在附件1《培训确认表》。6.1.2文件确认本次验证前验证方案及相关指导的SOP是否已经批准。检查确认结果记录在附件2《文件检查确认表》。如无相关文件，则需要增加发放。6.1.3仪器设备确认检查所涉及的设备是否符合实验要求，确认结果填写在附件3《设备确认结果》中。可接受标准：设备应经验证，在校准有效期内。6.1.4试验器材确认盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：5/8检查所涉用试验器材，确认结果填写在附件4《试验器材确认结果》中，可接受标准：试验器材各配件应齐全，无损坏。6.1.5试验用菌种确认检查所涉及的试验用菌种是否符合实验要求，确认结果填写在附件5《试验用菌种确认结果》中。可接受标准：菌种形态特征应良好、菌种代数不得超过第五代。6.1.6培养基确认检查所涉及的培养基是否符合实验要求，确认结果填写在附件6《培养基确认结果》。可接受标准：培养基应在有效期内，应做适用性检查。6.1.7试剂确认检查所涉用试剂是否符合实验要求，确认结果填写在附件7《试剂确认结果》中。可接受标准：试剂在有效期内。6.1.8器皿确认检查所涉用器皿是否符合实验要求。确认结果填写在附件8《器皿确认记录》中。可接受标准：一般玻璃器皿要求洁净，无破损，量器要进行校准。6.1.9确认用培养基、缓冲液应置121℃湿热灭菌30分钟，平皿、刻度吸管应置200℃干热灭菌2小时。6.2验证方法6.2.1抑菌试验时间盐酸头孢吡肟溶液：盐酸头孢吡肟生产周期内，主药系统A用于盐酸头孢吡肟溶液的过滤，每批过滤时间约1.5h，1天过滤3批，期间用丙酮浸泡，滤芯使用周期为15天。本方案考察盐酸头孢吡肟溶液在一次过滤时间内（1.5h）对试验菌的作用效果。因盐酸头孢吡肟溶液的杀菌效力非常强，理论上每次过滤都可视为一次系统灭菌，若通过试验可证明这一点，则不再考察浸泡液丙酮的抑菌效力。若在试验时间内，微生物的下降对数值没有达到预期要求，则需另起方案考察浸泡液丙酮15天内的抑菌效力。6.2.2菌种选择及菌液配制：细菌：金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、铜绿假单胞菌（ATCC9027）、大肠埃希菌（ATCC8739）细菌芽孢：枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）真菌：白色念球菌（ATCC10231）、黑曲霉（ATCC16404）盐酸头孢吡肟溶液抑菌试验方案编码：页码：6/8环境菌：表皮葡萄球菌耐药菌：本公司菌种库中暂没有盐酸头孢吡肟溶液的耐药菌。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢、表皮葡萄球菌的新鲜培养物接种至胰酪胨大豆琼脂培养基中经30~35℃培养18～24小时；白色念珠菌的新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖琼脂培养基中经20~25℃培养24~72小时。上述培养物分别加入pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液10ml洗下菌苔转移至空试管中作为菌悬液原液，用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液进行10倍梯度稀释至含菌数108cfu/ml的菌悬液。取黑曲霉的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基中经20~25℃培养5~7天，加入含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液10ml洗下孢子吸出，转移至空试管中作为菌悬液原液，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液进行10倍梯度稀释至含孢子数107cfu/ml的孢子悬液。6.2.3菌液计数：分别取上述5种细菌采用平皿法测定1ml菌悬液的菌数，注入不超过45℃胰酪胨大豆琼脂培养基15~20ml，每株试验菌平行制备2个平板，于30~35℃倒置培养。分别取上述2种真菌采用平皿法测定1ml菌悬液的菌数，注入不超过45℃沙氏葡萄糖琼脂培养基15~20ml，每株试验菌平行制备2个平板，于20~25