女贞子及其复方制剂色谱指纹图谱和质量控制研究

第二军医大学硕士学位论文女贞子及其复方制剂色谱指纹图谱和质量控制研究姓名：丁雪申请学位级别：硕士专业：药物分析学指导教师：石力夫20090501女贞子及其复方制剂色谱指纹图谱和质量控制研究作者：丁雪学位授予单位：第二军医大学相似文献(10条)1.期刊论文徐长根.李涛.傅强.XUChanggen.LITao.FUQiang女贞子药材HPLC指纹图谱的初步研究-中药新药与临床药理2005,16(5)目的建立女贞子中药材的HPLC指纹图谱分析方法.方法采用HPLC-ELSD法,色谱柱:LichrospherC18柱(4.6mm×250mm,5μm);A11teehELSD2000型蒸发光散射检测器;流动相:甲醇-水(梯度洗脱).以齐墩果酸为参照物分析了16批不同产地的女贞子样品,采用计算机辅助相似性评价系统进行评价.结果女贞子中药材HPLC指纹图谱由14个特征峰构成指纹图谱的特征,10批样品的指纹图谱的相似度均大于0.90,符合指纹图谱研究技术的要求,所建立的指纹图谱具有稳定、重现的特点.结论该方法准确、简单,其色谱指纹图谱可用于女贞子中药材的鉴别和质量控制.2.学位论文张艳华中药女贞子的指纹图谱分析2007中医药是中华民族的瑰宝，日益受到世人的关注和逐步认同，市场潜力巨大。但同时我们必须看到，我国中药目前仍未能以药品的身份堂堂正正地进入国际市场，反而面临日本等亚洲国家传统医药产品的激烈竞争，甚至面临德国、法国等欧洲国家天然药物的巨大冲击。世界天然植物药的市场交易额近300亿美元，我国中药和植物药年出口额6.5亿美元，仅占世界植物药贸易额的5.4％。究其原因，除了产业规模和市场运作能力等因素外，主要是中药材质量不稳定；加之，长期以来中药的标准化研究未能得到足够的重视，各项标准的制定实施严重滞后，有的标准制定不科学，有的多重标准，有的虽有标准却没有督促实施。总而言之，质量可控性水平低下已成为制约中药产业发展的瓶颈。为了更好地保证中药的质量稳定，适应中医药现代化、国际化发展的形势，进一步加强中药品质评价的标准化已势在必行。采用现代科学技术对中药及其制剂质量进行研究，寻找并逐步建立简便、易行、科学的中药质量评价方法，无疑是中药研究领域的重要课题之一，也是实现中药现代化、使中药走出国门的当务之急。而解决这一难题的有效手段，就是要参照国外植物药的质量控制方法，借鉴化学药品质量控制模式，建立相应简单理化鉴别、现代的、被国际社会所认可的中药指纹图谱技术。中药指纹图谱具有整体性和模糊性的特点，可用于成品质量、工艺操作、原料材料的质量控制和监测，使其符合GAP的质量要求。当前，中药指纹图谱技术在国内外已成为一种发展趋势。它体现了思维的由简单到复杂，从局部到整体，由浅入深、全面综合的发展过程，是中药创新、研究开发、质量鉴别、鉴定的必要技术手段，对提高中药工业整体水平，带动中药农业现代化，推进中药走向世界，具有非常重要的现实意义。女贞子(FructusLigustrilucidi)始载于《神农本草经》，且被列为上品，名女贞实，为木犀科植物女贞Ligustrum.lucidum.Ait.的干燥成熟果实，是一种常用中药，在我国分布广泛，华东、华南、西南、华中等地区均有，药源广、价格低廉。在治疗冠心病、动脉硬化、高脂血症、高血糖、肝炎等疾病的方药组方中应用颇多。近年来发现女贞子有多种生理活性，特别是其增强免疫活性作用，能增强人体细胞对病毒的抵抗力外，对癌症也有抑制作用。最近，以女贞子有效成分为主的制剂通脉益智胶囊在防治心脑血管疾病、抗衰老等方面显示出良好的疗效。同时由于西医西药的毒副作用，在寻求当代疑难病艾滋病等的治疗中，人类也将希望寄托于中药中医的治疗。并且从查阅的大量资料发现对其质量控制方面的研究较少，所以本课题选择了此种中药材作为研究的对象，利用X-射线衍射、近红外漫反射和毛细管电泳的多种现代分析手段分别对它的指纹图谱进行了基础研究和探讨，本论文研究内容包括以下几个方面：1、利用X-射线衍射对中药材女贞子的指纹图谱进行初步鉴定，用其几何拓扑图形和共有指纹峰作为鉴定依据，以实现对它的鉴定；2、利用近红外漫反射技术结合主成分分析和判别分析对中药材女贞子进行鉴定，结果准确可靠，该法简单快速；3通过对中药材女贞子提取物的毛细管电泳测定，初步判定了它的共有指纹峰，建立了它的HPCE指纹图谱鉴别体系。通过以上工作，对中药材女贞子的指纹图谱进行了初步研究，为中药质量控制的可行性提供了方法学参考和初步理论依据，具有一定的应用价值和理论价值。3.期刊论文史昆波.盛振环.SHIKun-Bo.SHENGZhen-huan女贞子的X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定-中药材2007,30(6)目的:建立中药材女贞子新鉴定分析方法.方法:以乙醇、氯仿为提取溶剂提取中药材女贞子,采用X射线衍射Fourier谱鉴定法.结果:通过对四个中药材女贞子的乙醇、氯仿提取物实验分析比较,获得中药材女贞子的标准X射线衍射Fourier图谱及特征标记峰值.结论:X射线衍射Fourier谱鉴定法可用于中药材女贞子的分析鉴定.4.期刊论文郭娜.范斌.彭娟.闫寒.马芳.于友华.GUONa.FANBin.PENGJuan.YANHan.MAFang.YUYou-hua基于超高效液相-飞行时间质谱技术的中药女贞子代谢组学研究-中国实验方剂学杂志2010,16(10)目的:建立中药女贞子生品及不同工艺炮制品的代谢组学分析方法,比较研究其指纹图谱差异,探讨女贞子炮制机制.方法:采用超高效液相-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)及多元统计分析技术对生品及不同工艺炮制品进行指纹图谱差异比较分析.结果:生品和不同炮制品指纹图谱存在明显差异,且鉴定了一个产生差异的化学成分标志物-ligustalosideB,其在女贞子炮制品中的含量高于女贞子生品.结论:UPLC-Q-TOF-MS结合多元统计分析方法可对女贞子药材及其饮片进行质量评价,同时为炮制机制提供了一定依据.5.期刊论文颜磊.龚萍.袁林.蒋雪梅.夏之宁.YANLei.GONGPing.YUANLin.JIANGXuemei.XIAZhining具有油水分配系数测算功能的中药指纹图谱-色谱2007,25(3)建立了一种能同时测算中药中主要成分的油水分配系数Pow的功能化中药指纹图谱.采用微乳液电动色谱,以中药女贞子为例,对运行缓冲液浓度、pH值、十二烷基硫酸钠浓度等参数进行了优化.利用SPSS程序对磺胺等从女贞子中提取的6种标准化合物组分的迁移时间tm与其logPow文献值进行非线性拟合,得到女贞子提取组分的标准方程线性关系良好(r=0.9880).在相同的实验条件下测得化合物的logPow与文献报道值较好的符合,证明该方法可靠.获得了能代表组分疏水化学特征的中药指纹图谱,测得女贞子的主要有效成分齐墩果酸的logPow为3.63.该指纹图谱较为可靠地提供了女贞子中各种成分的logPow,直观地反映出各组分油水分配性质的分布,对中药有效成分提取溶剂的选择、剂型的设计及制剂工艺的改进具有指导意义.6.学位论文侯杰女贞子炮制前后主要有效成分变化规律研究2009目的：研究女贞子炮制前后主要有效成分的变化规律，优选女贞子的炮制工艺，探讨女贞子的炮制机理。方法：在对女贞子古今炮制文献研究的基础上，对女贞子生品及不同工艺炮制品（清蒸、酒蒸、酒炖）进行比较，探讨不同炮制方法对女贞子中主要化学成分含量的影响；比较女贞子生、制品不同极性部位的薄层色谱和女贞子生、制品的高效液相指纹图谱，确定女贞子炮制后质变和量变特征成分，采用硅胶柱色谱分离、富集女贞子中含量较高且酒炖后产生明显量变的成分，用光谱法鉴定其结构；对女贞子生品和加黄酒炖制不同时间（4、8、12、16、20、24h）酒炖品中主要化学成分含量进行测定比较；以女贞子特征性水溶性药效成分和酒炖后明显增量的有效成分为指标，优选酒炖女贞子的炮制工艺；对女贞子生品、最佳工艺酒炖品及二者水煎液中主要有效成分进行比较。结果：女贞子经不同方法炮制后，醇溶性浸出物、红景天苷和酪醇含量均有不同程度的升高，尤以红天苷含量增加显著；水浸出物的含量，清蒸品和直接置笼屉上的酒蒸品均低于生品，而置容器内酒蒸和酒炖品均高于生品；多糖含量均有不同程度的降低，而齐墩果酸和熊果酸含量变化不大。综合考虑各指标，酒炖优于酒蒸。对比女贞子生、制品的TLC、HPLC指纹图谱，发现女贞子酒炖后有2个主要成分含量明显降低，通过硅胶柱层析法对女贞子减量特征成分进行分离、纯化、鉴定，认定为特女贞苷。酒炖4h、酒炖8h、酒炖12h、酒炖16h和酒炖20h样品中单糖与低聚糖含量之和较生品增加，而酒炖24h样品中单糖与低聚糖含量之和较生品降低；多糖、特女贞苷含量分别较生品降低，红景天苷含量较生品增加；女贞子生品中5-羟甲基糠醛含量极低，而6种酒炖品中5-羟甲基糠醛含量较生品增加明显；且随着炖制时间的延长，炮制品中多糖、特女贞苷含量逐渐降低、红景天苷和5-羟甲基糠醛含量逐渐增加，尤其12h后变化趋势更显著；女贞子生品和6种酒炖品中齐墩果酸含量无明显差异。以女贞子中含量较高的水溶性特征成分特女贞苷和炮制后增量成分红景天苷含量为指标，优选酒炖女贞子工艺为：取净女贞子，加其重量20%的黄酒，不加水，闷润1h，蒸汽加热炖制10h。炖制时间是影响酒女贞子质量的主要因素。女贞子酒炖最佳工艺炮制品中齐墩果酸、红景天苷、酪醇和5-羟甲基糠醛的含量较生品依次增加14.81%、188.37%、11.11%和3110.55%，酒炖品中的特女贞苷含量较生品降低14.52%；女贞子生品中5-羟甲基糠醛含量甚微，仅有0.015%，而酒炖品中5-羟甲基糠醛含量较生品增加3110.55%。女贞子酒炖品水煎液中齐墩果酸、红景天苷、酪醇、特女贞苷和5-羟甲基糠醛分别较生品水煎液增加18.58%、400.59%、188.70%、177.28%和11555.06%。女贞子酒炖品水煎液与其生品水煎液比较，各成分的增加率明显高于女贞子酒炖后各成分的增加率。结论：不同炮制方法和酒炖时间对女贞子中主要化学成分含量均有显著的影响；女贞子酒炖后主要化学成分发生了明显的质变和量变；酒炖可使女贞子中红景天苷、酪醇、齐墩果酸含量升高，而特女贞苷、多糖含量降低；女贞子酒炖后可产生5-羟甲基糠醛：酒炖利于女贞子中有效成分的溶出。7.学位论文刘珍中药薄层色谱指纹图谱方法学基础研究2005本文研究探索以办公扫描仪/数码相机+数字图像处理为检测技术基础的薄层色谱检测技术运用于中药指纹图谱研究的可行性，旨在探索适合中国国情中药质量评价与控制技术。　　本文以菟丝子、鸡血藤、女贞子、银杏叶为对象，从下列各方面进行了中药薄层色谱指纹图谱方法学的基础研究：　　研究了运用办公用扫描仪/数码相机+数字图像技术获取准确、可靠的薄层色谱图像并数字化为薄层色谱曲线的方法，影响精密度与重现性的因素，考察了上述方法获得的指纹图谱与CAMAG薄层色谱扫描仪之结果的相似程度。用办公扫描仪获得的女贞子可见薄层色谱积分曲线，与CAMAG扫描仪得到的结果最为一致。用数码相机在366nm紫外光下获得的鸡血藤、银杏叶的荧光/荧光猝灭薄层色谱图像，以图像处理技术得到的结果与CAMAG薄层扫描仪所得的结果接近。其中鸡血藤用硅胶G板展开得到的荧光色谱，用图像处理技术得到的峰数比CAMAG薄层扫描仪得到的峰数更多。实验证明，用图像处理技术获取薄层色谱指纹图谱，可处理荧光/荧光猝灭/可见薄层色谱，与专业薄层扫描仪获得的结果相近，仅在一些分离较差的肩峰的辨认上略为逊色。　　通过硅胶薄层板-传统有机展开剂、聚酰胺薄膜-微乳液展开剂的研究与比较，进行了色谱固定相/展开剂体系优化的方法学研究。将微乳液展开剂应用于银杏叶及其制剂指纹图谱，结果与普通有机展开剂相比，斑点集中程度和荧光强度均有提高。并将均匀设计法应用于合理安排实验，快速寻找最佳展开剂比例上，取得了很好的效果。　　研究建立了菟丝子、鸡血藤、女贞子、银杏叶及银杏叶注射液的薄层色谱分离分析方法，及基于办公扫描仪/数码相机+数字图像处