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1第4章药物的鉴别试验依据药典进行的药物分析主要有三大项内容：鉴别、检查和含量测定。药物的鉴别试验（Identificationtest），是利用药物的分子结构所表现的特殊的化学行为（如进行化学反应、测定药物的理化常数等）或光谱、色谱、生物学等特征，来判断药品的真伪。药物的鉴别在药品质量检验工作中属首项工作。只有在药物被鉴别无误、证实被分析的药物是真的后，才有必要接着进行检查和含量测定等分析工作。药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。这些鉴别试验方法虽然具有一定的专属性，但是还不足以用来确证化合物的结构，因而与分析化学中的定性鉴别有所区别，不能用来鉴别未知物。因此，《中国药典》（2010年版）凡例中对药品“鉴别”项目的要求是：鉴别项下规定的试验方法，系根据反映该药品某些物理、化学或生物学等特征所进行的药物鉴别试验，不完全代表对该药品化学结构的确证。本章讲授药物鉴别常用的方法和药物的一般鉴别试验，其中以化学鉴别法和仪器鉴别法为重点。4.1鉴别试验的项目鉴别项下规定的实验方法，仅仅适用于鉴别药物的真伪。对于原料药，还应该结合“性状”项下的外观和物理常数进行确认。4.1.1性状（Description）药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常2数等。性状观测是药品检验工作的第一步，也是不可省略的极其重要的一步。只有性状符合规定的供试品，方可继续检查杂质限量和测定含量，否则不必进行检查和含量测定。1.外观所谓药品的外观，是指药品的外表感官和色泽，包括药品的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。如《中国药典》（2010年版）对维生素A的描述为“本品为淡黄色溶液或结晶与油的混合物（加热至60℃应为澄清溶液）；无臭；在空气中易氧化，遇光易变质。”对于维生素AD的描述为“本品或本品内容物为黄色至橙红色的澄清油状液体；无败油臭或苦味”。2.溶解度溶解度是药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药品的纯度。《中国药典》（2010年版）采用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药品在不同溶剂中的溶解性能。溶解度测定方法：称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于25℃±2℃一定容量的溶剂中，每隔5min强力振摇30s；观察30min内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。如阿司匹林“在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化钠溶液中溶解，但同时分解。3.物理常数物理常数是评价药品质量的主要指标之一，其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯净度，是检定药品质量的主要指标之一。《中国药典》（2010年版）收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数等。具体内容见4.2.3项下。4.1.2一般鉴别试验（Generalidentificationtest）一般鉴别试验是以药物的化学结构及其物理、化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物的真伪的。对于无机药物，需根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录项下的一般鉴别试验为依据进行鉴别试验；对于有机药物，经常采用典型的官能团反应鉴别。阴阳离子鉴别反应的专属性灵敏度都比较高。所以，简单无机药物只要用阴阳离子分析就可确定其成分。而有机定性分析也有一定的专属性，把几种有机定性分析反应综合起来进行分析归纳，就可以作出准确结论。3一般鉴别试验仅供确认药物质量标准中单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。此外，通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。根据药物的结构，《中国药典》（2010年版）“附录”项下的“一般鉴别试验”项目分为：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐）、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐）、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物）等。有关一般鉴别试验的方法和反应的原理、条件、专属性等在下面内容中具体讲授。1.芳香第一胺类鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸至溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠试液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，呈现橙黄色到猩红色沉淀。2）反应原理：芳香第一胺类药物或水解后、还原后能生成芳香第一胺类的药物均可与亚硝酸钠发生重氮化反应，重氮盐与碱性β-萘酚形成偶氮染料。（橙黄色～猩红色）2.丙二酰脲类鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，在滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸4银试液，沉淀不再溶解。取供试品约50mg，加吡啶溶液（1→10）5ml，溶解后，加入铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。2）反应原理：司可巴比妥钠、异戊巴比妥、异戊巴比妥钠、苯巴比妥和苯巴比妥钠等原料药及其制剂的分子结构均以丙二酰脲为母体，都能在弱碱性溶液中与硝酸银作用生成二银盐的白色沉淀；也能与铜吡啶试液作用而显紫色。3.有机氟化物鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用水20ml与0.01mol/L氢氧化钠溶液6.5ml为吸收液，俟燃烧完毕后，充分振摇；取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml，即显蓝紫色；同时做空白对照试验。2）反应原理：地塞米松磷酸钠及其注射液、苄氟噻嗪及其片剂、醋酸曲安奈德及其注射液、哈西奈德、诺氟沙星、氟烷、醋酸地塞米松及其片剂、醋酸氟轻松和醋酸氟轻可的松等13种有机氟化物中均含有氟。为把有机氟转化为无机氟离子，用氧瓶燃烧法进行破坏，用水和氢氧化钠溶液为吸收液，然后鉴别氟离子。鉴别氟离子的反应原理如下：在pH4.3时，茜素氟蓝与硝酸亚铈试液中的Ce3+以1:1结合成红色络合物，当有F-存在时，三者以1:1:1结合成蓝紫色的络合物，检出限量为0.2×10-6。4.托烷生物碱类鉴别反应1）鉴别方法：取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2～3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色（称为Vitali反应）。2）反应原理：氢溴酸山莨菪碱及其片剂、注射液，氢溴酸东莨菪碱及其片剂、注射液，丁溴东莨菪碱及其注射液、胶囊，消旋山莨菪碱及其片剂、盐酸消旋山莨菪碱注射液，硫酸阿托品及其片剂、注射液等15种药物的分子结构，都是由莨菪烷衍生物（又称托烷衍生物）与莨菪酸生成的酯，称为托烷生物碱类。它们分子中都含有莨菪酸的结构，与发烟硝酸共热，5即得黄色的三硝基（或二硝基）衍生物，冷却后加醇制氢氧化钾少许，即显深紫色。若供试品量少，形成紫色不明显时，可投入氢氧化钾颗粒少许，即可在氢氧化钾表面形成深紫色。氢溴酸后马托品虽然也属于托烷生物碱类，但由于分子中没有莨菪酸的结构，故与发烟硝酸共热，冷却后加氢氧化钾不呈紫色，可供区别。5.枸橼酸盐鉴别反应1）鉴别方法：取供试品溶液2ml（约相当于枸橼酸10mg），加稀硫酸数滴，加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失；溶液分成两份，一份加硫酸汞试液1滴，另一份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀。取供试品约5mg，加吡啶:醋酐（3:1）约5ml，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液。2）反应原理：中国药典二部中有枸橼酸、枸橼酸乙胺嗪及其片剂、枸橼酸芬太尼及其注射液、枸橼酸哌嗪及其片剂、枸橼酸钠及其输血用注射液、枸橼酸钾、枸橼酸铁铵、枸橼酸铋钾及其片剂、枸橼酸喷托维林及其片剂、滴丸、枸橼酸氯米芬及其片剂和胶囊等19种药物用枸橼酸盐鉴别试验鉴别，方法有下述两种。第一种方法取供试品溶液2ml（约相当于枸橼酸10mg），加稀硫酸数滴，加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失；溶液分成两份，一份中加硫酸汞试液1滴，另一份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀。其反应原理为：构橼酸被高锰酸钾氧化为丙酮二羧酸（也可称为β-酮戊二酸），与硫酸汞形成复盐沉淀；与溴试液产生五溴丙酮，均为白6色沉淀。高锰酸钾的用量应加以控制，若加入高锰酸钾过多，丙酮二羧酸可进一步氧化为二氧化碳和水，再加硫酸汞或溴水时均不生成白色沉淀。应注意逐滴加入溴水，边加边振摇，以免过量溴水被五溴丙酮吸附而使沉淀呈黄色。第二种方法《中国药典》（2010年版）规定取供试品约5mg，加吡啶-醋酐（3:1）约5ml，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液，本反应机理不明。枸橼酸铋钾及其片剂用本法鉴别。6.酒石酸盐鉴别反应1）鉴别方法：取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁形成银镜。取供试品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亚铁试液1滴和过氧化氢试液1滴，俟溶液褪色后，用氢氧化钠试液碱化，溶液即显紫色。2）反应原理：《中国药典》（2010年版）中酒石酸美托洛尔及其胶囊2种药物用酒石酸盐鉴别反应进行鉴别。取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在管的内壁形成银镜。7HOHCCOOHCHCOOHHO+2Ag(NH3)2OH→△2Ag+HOCCOOHCCOOHHO+2NH3+2H2O7.乳酸盐鉴别反应1）鉴别方法：取供试品溶液5ml，（约相当于乳酸5mg），置试管中，加溴试液1ml与稀硫酸0.5ml，置水浴上加热，并用玻棒小心搅拌至褪色，加硫酸铵4g，混匀，沿管壁逐滴加入10%亚硝基铁氰化钠的稀硫酸溶液0.2ml和浓氨试液1ml，使成两液层；在放置30分钟内，两液层的接界面处出现一暗绿色的环。2）反应原理：乳酸钙及其片剂、乳酸钠及其注射液、乳酸钠林格注射液等6种药物用乳酸盐鉴别试验进行鉴别。其反应原理为：乳酸盐在酸性溶液中被溴试液氧化为乙醛，遇亚硝基铁氰化钠生成暗绿色的缩合产物。加硫酸铵是为了增加下层溶液的相对密度。8.水杨酸盐鉴别反应除上述几种有机鉴别试验外，尚有水杨酸、阿司匹林及其片剂、肠溶片和栓剂、双水杨酯及其片剂，水杨酸镁及其片剂等9种药物用水杨酸盐鉴别试验鉴别。1）鉴别方法：①取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。②取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。2）反应原理：本品在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。+4FeCl3→2Fe3Fe+12HCl6COOHOHCOO-O-9.苯甲酸鉴别反应1）鉴别方法：①取供试品的中性溶液，滴加三氯化铁试液，即生成赭色沉淀；再加稀盐酸，变为白色沉淀。8②取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭化，但析出苯甲酸，并在试管内壁凝结成白色升华物。2）反应原理：苯甲酸与苯甲酸钠用此鉴别试验进行鉴别。10.无机金属盐鉴别反应除上述有机鉴别试验外，尚有无机金属盐的鉴别试验，现择取一部分，分述如下。1）钠盐、钾盐、钙盐、钡盐的焰色鉴别反应取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显各离子的特征颜色。钠离子显鲜黄色，钾离子显紫色，钙离子显砖红色。2）铵盐取供试品，加过量氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇用水湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。11.无机酸根鉴别反应1）氯化物①取供试品溶液，加硝酸使成酸性后，加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液即溶解，再加硝酸酸化后，沉淀复生成。如供试品为生物碱或其他有机