疑难血型问题探讨江苏省血液中心刘毅2013-06南京常见疑难血型问题血型鉴定配血不合(困难)输血反应输血反应的本质百分之八十以上源于血型不合的同种免疫抗原—抗体反应,必须二者同时具备血型相合的血液,是输血安全和有效的重要保证输血前检查的意义血型鉴定矛盾或异常(正反定型与预期抗原或抗体不符)ABO亚型抗体减弱或消失:年龄、疾病意外抗原:获得性B(革兰阴性杆菌的作用)抗原改变:白血病,细菌、病毒感染致抗原暴露混合视野:异型输血或移植后意外抗体:抗A1、抗H,自身抗体、同种抗体缗钱状凝集、嵌合现象非同型的血浆置换溶血现象、试剂因素、书写错误ABO亚型及意义ABO系统的抗原除经典的A、B、O以外,还有许多抗原性较弱的亚型和变异型特点:正反定型不符合血清中常常存在不规则抗体ABO亚型被误定可能导致输血反应(不多见)可能表现为无效输血→Hb不升高A、B、O亚型主要有:A2、A3、Am、Ax、Ael、Aint、Ah、AendB3、Bm、Bx、Bel、Bh、BendCisAB、A2B、A3B、AB3、B(A)OhABO亚型20多种频率合计≈1%A亚型及抗A1A2、A3细胞仅与抗A凝集,与抗A1不产生凝集,与抗H凝集较强当A1与A2共同遗传时,表现型A1掩盖A2A2占A型人群的1-8%大约有2%A亚型(A2、A3、Am、Ax、Ael)细胞和25%的A2(3)B细胞血清中有抗A1抗体。37℃能发生反应的抗A1有临床意义稀有血型稀有血型稀有(rare)血型:人群中<1‰极稀有(veryrare)血型:人群中<1/万(AmericanRareDonorProgram定义)低频抗原抗高频抗原抗体稀有血型库ISBT阿姆斯特丹国际会议配血试验不合(困难)检查核对受、供血双方的血样标本,必要时重新取样复查血型(正、反定型),检查是否有亚型的情况是否有非特异性凝集纤维蛋白的影响了解受血者病史、输血史和妊娠史是否有IgG免疫性抗体的存在是否有自身抗体存在及红细胞致敏情况是否有自身抗体与特异性抗体同时存在的可能全凝集血清高凝血清强自身抗体抗高频抗原抗体抗体混和物配血试验的有关问题IgM类抗体—盐水交叉试验主要检查:血型鉴定错误、血袋上标签错误,亚型抗体,骨髓移植产生的嵌合体,缗钱现象,冷特异性抗体(如抗M),冷自身抗体IgG类免疫性抗体—酶,胶体介质,低离子溶液(LISS),聚凝胺(Polybrene),间接抗人球蛋白(Coombs),微柱凝胶卡等试验方法主要检查:同种特异性抗体,温自身抗体抗体筛查检查不规则抗体(意外抗体、同种特异性抗体)规则抗体:有规律出现→ABO抗体不规则抗体:无规律出现①ABO亚型抗体②ABO系统以外抗体特异性抗体的检测临床意义为输注选择最合适的血液为判断抗体的意义提供方向特点大部分由红细胞免疫产生(输血,妊娠等)配血困难、可能产生溶血性输血反应导致新生儿溶血病血清学检查直抗试验阴性(少见阳性)抗体筛选试验阳性特异性抗体的鉴定选择鉴定用红细胞组筛选细胞、谱细胞、自选细胞选择鉴定方法间接抗人球蛋白试验(Coombstest)、聚凝胺(Polybrene)、酶、微柱凝胶抗人球蛋白卡等抗原鉴定供者与受者输血同型输血(避开相应抗原)无须输注洗涤红细胞Rh血型抗体通过输血,妊娠等由Rh+红细胞免疫而产生(主要抗原RhD、E、c、C、e)具有致新生儿溶血病和溶血性输血反应能力溶血性输血反应速发型(少见)迟发型(常见)特殊情况下的输血选择新生儿换血的血液选择母、婴均需配合GVHD相关考虑Rh(D)阴性患者血液的选择相容的概念:抗原抗体不相抵触救命的原则:RhD(-)病人体内确定没有抗-D输RhD(+)红细胞只要配血相合,不会发生反应!血小板、血浆的选择未育女性的考虑自身抗体血清学检查产生机制血清学检查:血型鉴定困难直接抗人球蛋白试验阳性掩盖同种抗体自身红细胞处理自身抗体吸收同种抗体鉴定自身抗体特异性吸收放散试验运用除去血清中不需要的抗体分离鉴定混合抗体浓缩低效价抗体鉴定存在于红细胞上的弱抗原核实抗体特异性鉴定引起新生儿溶血病和免疫性输血反应的抗体研究免疫性溶血性贫血的抗体吸收放散技术概念:抗体与红细胞上相应抗原在合适的条件发生结合或致敏(红细胞吸收),这种结合是可逆的;如改变某些条件时,抗体又可以从结合的红细胞上解脱下来(放散),这种试验方法叫做吸收放散试验。吸收条件:IgM类抗体:4℃IgG类抗体:37℃放散方法:热放散,酸放散,酸有机溶剂如乙醚、磷酸氯喹有临床意义抗体的记录随时间推移,患者体内的抗体会减弱以至无法检测出来30~35%的抗体在鉴定为阳性的1年后检测转为阴性接近50%的抗体在10年后检测转为阴性抗原抗体的反应强度与所采用的检查技术有关供者红细胞上不应含有与所记录抗体相对应的抗原建议:记住有何抗体比记住Rh(D)阴性重要的多血型血清学基本技术正确选择和使用各类试剂选择和使用各类细胞掌握反应温度,时间吸收放散技术中和、抑制技术认识各类血型抗体的血清学特性了解抗原剂量效应等知识注意事项标本的确认及处理,必要时重新取样红细胞悬液的处理及浓度血清和红细胞的比例正确的孵育时间和温度仔细观察并记录全部试验结果正确的解释结果阴阳性对照与定型试剂(包括细胞)的质控不规范操作导致配血“被疑难”几点体会临床输血本质是一种同种组织移植,是科学性、技术性、责任性极强的专业工作正确掌握配合性输血的各项试验技术,提高输血疗效、保障输血安全不断地学习-实践-提高业务和学术水平,提高专业分析和技术能力,做到及时正确的处理所遇到的血型血清学疑难问题红细胞血型领域中还有许多未解之谜,值得我们去探索加强合作,共同努力025-85411563—6516,6518,6507