标准曲线的制作与运用——以“考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量”为例许良政2007.5标准曲线的制作与运用一、标准蛋白质溶液的配制实验指导:P160具体方法:精确称取结晶牛血清蛋白10mg,加水溶解并定容至100ml,即为100μg/ml的标准蛋白质溶液标准曲线的制作与运用二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制或5min或620nm标准曲线的制作与运用二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制注意:1、各管振荡程度尽量一致2、振荡后放置3~4min3、在595或620nm处比色,记录吸光度(OD值)标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(一)打开Excel标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(二)进入Excel工作表状态标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(三)在Excel工作表输入数据和说明文字标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:1、用鼠标选中数据标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:2、选中图表类型标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:3、点“图表类型”对话框的“下一步”,出现如下对话框标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:4、点对话框的“系列”选项标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:5、嵌入系列(图表)名称标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:6、点“下一步”操作,出现:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:7、再点“下一步”操作,出现:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:8、点“完成”操作,散点图在工作表中出现:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:9、用鼠标左键选中作图点标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:10、选定作图点后,再点鼠标右键并选中“添加趋势线”:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:11、单击“添加趋势线”标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(四)作图:12、确定标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(五)求直线方程:1、选中趋势线,点鼠标右键并选中“趋势线格式”:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(五)求直线方程:2、点“趋势线格式”,在下图的“选项”中选“显示公式”和“R的平均值”:标准曲线的制作与运用三、标准曲线的制作(五)求直线方程:3、确定注:R2至少要达到0.999以上标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用将所测得“吸光度”代入“直线方程”的y项,利用Excel的计算功能即可方便求出X项的“蛋白质浓度”:换算公式:X=(Y-0.0005)/0.0075标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求“蛋白质浓度”标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求“蛋白质浓度”标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求“蛋白质浓度”标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求“蛋白质浓度”标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求“蛋白质浓度”标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用四、标准曲线的运用如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值标准曲线的制作与运用附:样本中“蛋白质含量”的换算标准曲线的制作与运用附:样本中蛋白质的提取与测定