海洋哺乳动物临床实验室医学(MarineMammalClinicalLaboratoryMedicine)GregoryD.Bassart和LeslieA.Dierauf海洋哺乳动物临床病理学仍处于幼龄期,进行过完全彻底研究的没有九种动物,对海洋哺乳动物进行采血会产生一些明显的问题:如动物的大小、动物所处的水环境以及其难操作性。就须鲸(BaleenWhales)来讲,其庞大的个体使人们很难获得一些基本的生理学资料。即使在捕鲸船上获得的血液样品,通常也被海水所污染。有关血液的基线值(Baselinevalues)也还不完全可靠,临床医生必须清楚地认识到本章所建立的血液学指标仅仅只是一些参考,在确定任何一个特定指标不正常之前,每一个临床医生对其自身所医疗的每一个动物必须建立个体基线值。在海豚的血像(hemograms)中,白细胞指数(WBCindices)不仅在同种动物之间存在差异,而且还和文献所列出的值有所不同。假如某种动物原先的血像已经确定,即使WBC计数落在正常的文献记载范围内,但对某海豚个体来说实质上存在着明显的白细胞增多(Leukocytosis)。建议对每一动物个体一年至少采集两个血样,因为临床医学需要获得多个数据库。如血常规样品在每一个动物个体常被作为定期健康检查的组成部分,Banish和Gilmartin在对僧海豚(monkseal)进行群体研究时,采得的成对血样,分别送到两个不同的实验室进行血清化学分析,研究结果表明,两个试验室测得的LDH、ALT、AST、GGT和甘油三酯(trigyceride)水平存在明显差异。因此必须考虑影响所测定值的因素,如环境的、生理的、医疗的和实验室质量控制条件等都会影响所测定的值。Ronald在对冠海豹(hoodedseal)研究时发现,其血液学中总蛋白(totalprotein)、清蛋白(albumin)、肌酸酐(creatinine)、胆固醇(cholesterol)、磷等参数值会受季节性的影响,他推测这些值的变化时由于动物甲状腺素(Thyroid)和皮质激素(Cortisol)水平的季节性波动以及换毛期间摄食量变化引起的。年龄也影响血液学指标,总蛋白、胆固醇、肌酸酐、尿酸(Uricacid)、碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase)、钙(Calcium)和磷—所有这些指标都涉及到动物的生长和成熟。许多康复和展示机构已发现当地人医院和私人兽医实验室以一定的成本进行海兽血液样品和组织样品的临床病理学试验,做这些实验的动机不仅出自于个人对海兽保护的关心,而且出自于为未来建立基线值的需要。人类医疗机构常常在紧急状态下进行“快速”检查(Statexamination),假如单纯只为了这个因素,与人类医疗机构联合是很值得的。为了动物本身以及工作人员的安全以及用于保定动物的化学药物的安全,一个临床医生必须对所采集的血液量做出正确的判断。假如可能,常规样品可从饥饿一个晚上的动物中采集,这样可以消除食后脂血(postprandiallipemia)的发生,血脂可造成溶血,并可人为地造成血浆蛋白质、血红蛋白水平和肝脏酶的含量升高,从血凝块离心分离血清如延迟15分钟以上,则会降低血钠、钾、肌酸酐、血液尿氮(BUN)和球蛋白质,同时会升高血钙(Calcium)、血磷(Phosphorus)、总蛋白(Totalprotein)和清蛋白(Albumin)的值。除开其他方面指出的外,在本章中的血液学值和血清化学值都来源于体质比较好的健康动物和临床上物理检查正常的动物。雄性和雌性动物、年轻动物和成年动物是代表性动物,但所有动物除开在其他方面指出的以外,都是长期饲养海水环境中的。无论那种可能的情况,血液化学参数值将会提供一个参数值范围,比较宽的参数值范围将列于一些表格中,这些范围是正常的变化或表明个别动物处于亚临床疾病状态,在每个表格中的“n=”代表着计算参数值范围时的最小样本数。人工饲养状态下的动物需要生理学调节,并反映在血液参数值中,这些生理调节影响本章所列出的参数值的程度很难精确的判断,在常规体检过程中,对每一个动物个体有必要建立其正常的基线值。对疾病过程诊断或动物对药物反应的诊断将依据这个基线值的偏差(Deviation)。海洋哺乳动物的血液采集(Bloodcollectioninmarinemammals)由于处理海洋哺乳动物比较困难,因此静脉采血的仪器设备应事先装备好,并在处理动物之前放置在身边,这些仪器设备包括:1.机械保定设备(Mechanicalrestraintequipment);2.化学保定设备(Chemicalrestraintequipment);3.各种不同长度和规格的针头(Needlesofvaryinglengthsandgauges);4.不同规格的注射器(Syringesofvaryingsizes);5.Betadine溶液(喷瓶或棉签);6.采血管(各种类型);7.标记用记号笔(Markerpenciloflabels);8.提交样品的实验室表格(Laboratoryformsforsubmissionofsamples)。采血点(Bloodcollectionsites)鲸类动物(cetaceans)的采血点尾鳍的中央尾静脉(Centraltailveinofflukes)尾柄静脉(Caudalpeduncle)胸鳍静脉(Pectoralflippervein)背鳍静脉(Dorsalfinvein)幼龄动物:使用1英寸长,18-20号的针头成年动物使用1.5-3.5英寸,18-20号的针头中央尾静脉(Centraltailvein)、胸鳍静脉(Pectoralflippervein)和背鳍静脉(dorsalfinvein)都是动脉周围静脉丛系统(Venousretssystems)的组成部分,因而当使用这些采血点时,不难获得动静的混合血样。背鳍静脉对于患慢性疾病的小动物来说是极好的采血点,因为背鳍静脉采血可以不需要将池水放干而进行多次采血,并且动物不会产生反感(resentment),而且对工作人员来说,背鳍静脉采血要比尾鳍采血安全许多。鳍脚类动物的采血点海狮(Dtariids)和海象(Ddohenids)的采血点:尾臀静脉(Caudalglutealvein)后鳍的趾间静脉(Interdigitalveinsofhindflipper)上腔静脉(precavalvein)幼龄动物:使用1英寸长18号针头成年动物:使用3.5英寸长18号针头海豹的采血点(phocids)脊椎内硬膜外静脉(Extraduralintravertebralvein)腹侧(足底)趾间静脉(后鳍)(vetralinterdigitalveins)幼龄动物:使用1英寸18-29号针头成年动物使用3.5英寸,18号针头海牛(Manatee)的采血点臂头静脉丛(Brachialvenousplenus)尾鳍腹侧静脉(Ventralflukevein)所有年龄的动物一律使用1-1.5英寸长18-20号的针头臂头静脉丛(Brachialvenousplexus)是最好的采血地点,尾鳍腹侧静脉除非动物处于严重抑制状态以外,对采血者来说不安全。海獭的采血点(SeaOtters)内侧股静脉(Medialaspectoffemoralvein)(股骨近端1/3处)颈静脉(Jugularvein)所有年龄的动物都使用1英寸长19-20号的针头北极熊的采血点(PolarBears)头静脉(Cephalicvein)股静脉或股动脉(Femoralveinorartery)所有年龄的动物都使用1.5英寸长18-19号的针头红细胞血像(Erythrograms)进行潜水的哺乳动物其红细胞(RBC)增大,冠海豹(hoodedseal)的红细胞要比人的红细胞大60%,其血红蛋白浓度也比人高30%。海牛(Manatee)的红细胞要比海豚的红细胞大,红细胞(RBC)的大小与动物体重不成正比例,血液的体积也是一样,这已在某些陆地动物有过报道。与家畜相比,存在于外周血液里的海洋如动物红细胞更肥大,更象面饼状,Ridgway在研究中感受到鲸类动物的红细胞比陆生哺乳动物的红细胞容易破碎。与其它哺乳动物相比,海洋哺乳动物的红细胞总数最低,新生儿与成年动物相比,刚出生的动物其红细胞计数(RBCcounts)和血红蛋白(Hb)浓度要高一些,随着动物体重的增加和学会潜水,其值会下降。因此,为了适应增加氧的需要,动物会产生较高的平均细胞体积(MeancorpuscularvolumeMCV)和较高的平均细胞血红蛋白(MeacorpuscularhemoglolinMch)值,在海兽中,较大的心脏体积和血液体积与增加携带氧的能力相平行。用老式Coulter计数器获得的海洋哺乳动物的血细胞比容值(hematocritvalues)需要用实际微量血细胞比容值(Microhematocrit)或离心获得的血细胞压积(PackedcellvolumesPCV)进行校正。因为这些老式仪器是依据陆生哺乳动物的RBC的大小和血红蛋白(Hb)的含量来计算血细胞比容的,然而由于海洋哺乳动物RBC的大小和血红蛋白的含量变化要比陆生动物的大得多和高得多,Coulter计数器计算出的血细胞比容值要比实际值高得多。红细胞总数的临床意义脱水(Dehydration)人类潜水员或登山运动员贫血(1O)贫血(20到慢性感染)白血病(Leukemia)营养不良(B12或叶酸缺乏)表1海洋哺乳动物红细胞对潜水的反应MarineMammalErythrocyticAdaptationstoDiving动物种类项目陆生动物(Terrestialmammals)海兽(Marinemammals)RBC(直径Ц)3-97-10RBC(106/mm3)5-132-6红细胞比密(%)28-5030-70血红蛋白(g/dl)8-1912-25血液体积(占体重的百分比%)810-22红细胞指数(Erythrocytelndices)MCV*(用毫微微升即10-15表示,infemloliters)=(PCV×10)÷RBC计数MCH(微微克,Inpicogram)=(Hb×10)÷RBC计数MCHC(g/dl)=(HB×100)÷PCV*:抗凝剂草酸钾能造成红细胞收缩,这样会人为地导致MCV增加。海洋哺乳动物的RBC必须与PCV和血红蛋白的含量同时考虑,以判断是否异常,在所有的哺乳动物中,RBC总数、PCV和HB的含量,不同动物之间会有直接的不同。假如PCV降低,则可能发生贫血,贫血是某些潜在疾病的信号,其病因应通过其它诊断措施作进一步研究,贫血是一些疾病过程中较常见的继发反应,贫血可分为再生性贫血(多染细胞增多和具有网织红细胞及未成熟的红细胞)和非再生性贫血即骨髓不再产生新的红细胞,贫血的这种分类可以帮助动物的预后(Prognosis),多染细胞增多(Polychromasia)是再生性贫血既好又简单的指示器,网织红细胞计数(Reticulocytecount),由于试验变化的差异而不可靠。假如存在溶血(溶血性贫血),一般来说网织红细胞的反应要比单纯的血液丧失要大。非再生性贫血则表明是骨髓的机能障碍,预后应警惕,此时应进行骨髓穿刺(bonemarrowaspirate)(见第13章),尽管骨髓穿刺是一个学术性的工作,但由于预后常常必须警惕,这一工作必要时也必须作,红细胞指数(RBCIndices)能确定贫血是小红细胞(Microcytic)(MCV降低)、巨红细胞(Macrocytic)(MCV升高)性贫血还是正常红细胞贫血。贫血可进一步分类为低色素性贫血(MCHC降低)和血色正常性贫血,MCHC可因溶血或脂血(Lipemia)造成人为地升高,但决不能归为高色素性贫血,其解释可见下一页的顶部方框的内容。鲸类动物的红细胞参数值(CetaceanRBCParameters)有关大型鲸类动物的血液学资料极少,杀人鲸(Killerwhale)是人工饲养条件下为数最多的大型鲸