毒物分析

法医毒物分析重点内容提要第一章绪论毒物：进入生物体后通过化学或物理化学作用能损害生命正常活动，引发功能性或器质性病变乃至造成死亡的化学物质。中毒：生物体受到一定量的毒物作用而引起的功能性和器质性改变后出现的疾病状态或死亡。作用途径快慢排名：心脏血管注射，呼吸道吸入，腹腔注射，肌肉注射，皮下注射，口服毒品的特征：1,毒害性：一定条件下可引起急慢性中毒，产生严重症状或死亡。2，依赖性3，管制性4，非法性（是区别毒品与麻醉药品的重要因素）药物滥用：非医疗目的、不正常的连续大量使用有依赖性的药物。毒物分析：是以分析化学尤其是现代仪器分析技术为基础，以能损害生命正常活动的毒物为对象并对其进行定性和定量判定的一门应用学科。法医毒物分析：属于突发性毒物分析，主要对涉及或怀疑涉及有毒物引起的伤害或死亡事（案）件中的有关物质进行分析鉴定。相比于毒物分析：1，突发性2，法律性法医毒物分析的任务：1，提供侦破案件的线索2，提供科学客观的法律依据。质量控制包括的环节：人鸡胸的患侧疗法。人，机，料，法，环，测。1，人员2，设施与环境3，仪器与设备4，标准操作步骤5，试剂与材料6，？第二章检材及检材处理体外检材：未经过体内吸收，分布，代谢等过程的检材。（胃内容物属于体外检材）检材处理的必要性：1，去除内源性杂质2，减少对检测的干扰3，降低仪器损耗各类毒物常用分类方法检材处理的大致步骤：分离，净化，富集，定容酸碱性原则：毒物分类酸性条件碱性条件毒物举例酸性毒物易溶于有机溶剂不易溶于水易溶于水不易溶于有机溶剂巴比妥类斑蟊素碱性毒物易溶于水不易溶于有机溶剂易溶于有机溶剂不易溶于水吩噻嗪类苯二氮卓类，生物碱毒物合成药物，天然药毒物，杀虫剂，杀鼠剂，毒品气体毒物挥发性毒物金属毒物水溶性无机毒物液液萃取法液固萃取法固相微萃取法蒸馏法扩散法驱气法有机质破坏法透析法水浸法中性毒物不易溶于水，易溶于有机溶剂格鲁米特强心苷两性毒物成盐状态下:易溶于水，不易溶于有机溶剂在一定的ph范围内：易溶于有机溶剂，不易溶于水吗啡液液萃取法（LLE）：利用待测物在互不相容的两种溶剂中溶解度不同差异，使待测物从一种溶剂转移到另一种溶剂之中。萃取原则：少量多次分配比：当溶质在互不相溶的两种溶剂中溶解分配达到平衡时，两相中该溶质的的浓度比成为分配比。Stas-Otto法原理：检材匀浆，稀酸酸化，95%乙醇小心蒸至浓稠状，加无水乙醇研散浸提，滤取醇液，蒸发至糖浆状水浴上蒸干，加水溶解，保持酸性，过滤乙醚分次萃取，分层后，合并醚液1mol/LNaOH水溶液反提6mol/LNaOH碱化乙醚萃取乙醚萃取有机溶剂萃取液固提取法（固相萃取技术，SPE)：利用待测毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。包括：1，正相固相萃取2，反相固相萃取3，离子交换固相萃取反相固相萃取：原理：固定相为非极性，洗脱液为中等极性或极性；分离时，由于生物检材中的内源性物质的极性往往较大，故适用于将非极性毒物分离出来。步骤：柱活化--样品初制备--样品过柱--洗涤--洗脱检材乙醇浸出液无水乙醇提液酸性水溶液乙醚液酸性水溶液乙醚液碱性水溶液乙醚液碱性水溶液中性有机毒物酸性有机毒物碱性有机毒物两性有机毒物第三章分析方法概述定性分析：目的是确定检材中所含毒物的性质，即检材是否为某种毒物或者期中是否含有某种毒物。确证实验：具有确证效用的定性方法能够确实无误的判断出检材中是否含有某毒物或是否为某毒物。假阳性：把干扰物误当做药毒物假阴性：因干扰物的存在而阻碍药毒物的检识定量分析：目的在于确定检材中某毒物的含量，通常称之为含量测定或简称测定。定量分析必须在定性分析的基础上进行。形态学方法：通过对检材的外观形态或显微形态进行辨认达到初步筛查鉴别目的的方法。主要用于中草药鉴定。动物实验方法：用于方向不明的鉴定。免疫分析法：利用抗原抗体吉诃德原理，以毒物和标记毒物与特异性抗体竞争结合反应为基础的一类分析方法。只能筛选，不能确证。验证指标：1，回收率：对检材进行处理后，所得到样品中待测物含量与分离净化前检材中原有待测物试剂含量之比。由于杂质干扰，回收率可能大于100%2，准确度：测得值与真实值之间接近的程度。3，精密度：规定的测试条件下，同一样品，经过多次重复检测所得检测结果之间的接近程度（离散程度）。一般不超过10%4，灵敏度：a.检测限（LOD）：检材或检样中待测物能被检出的最少量或最低浓度。（限度检验效能指标）b.定量限（LOQ）：检材中的待检毒物能够被定量测定的最低量。（定量分析的效能指标）专属性和方法的准确性是分析方法的可靠性的主要指标。第四章仪器分析仪器分析法：以物质的物理或物理化学性质为基础的分析方法，是使用特殊仪器测量光，电，磁，声，热等物理量而得到的分析结果（化学组成，化学结构，含量等）。光谱分析法紫外--可见光谱（UV/VIS）Beer--Lambert定律：(当一定波长的单色光通过含吸光物质的被测溶液时，一部分光被吸光物质所吸收使光强度减弱，将透射光强度与入射光强度的比值定义为透光率T=I/Io)定义透光率的负对数为吸光度（A）A=-logT=-log(I/Io)=E(吸光系数)C（浓度）L（液层厚度）吸收峰向长波长方向移动的现象称为红移；向短波长方向移动的现象称为蓝移。荧光分光光度法：是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。（当物质受到光照射时，除吸收某种波长的光之外还会发射出比原来所吸收的波长更长的光，这种现象称为光致发光，即可产生荧光和磷光）原子吸收分光光度法（AAS）;基于从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光，通过试样蒸汽时被待测元素基态原子所吸收，由辐射谱线被减弱的程度来测定待测元素含量的方法，广泛用于金属元素的测定。与其他方法最重要的区别是光源，可发射相应待测元素的特征谱线。灵敏度高选择性强，砷汞要使用冷原子吸收分光光度法。电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）：特点，是发射光谱；前述均为吸收光谱。色谱分析法色谱法：建立在被分离组分在两相间具有不同分配特性基础上的分析方法。Kd：平衡常数或分离系数。色谱分离过程中，当温度一定时，认为组分在两相间的分配可以达到热力学平衡，此时组分在固定相中的浓度与在流动相中的浓度之比为Kd。保留时间（tR）：组分从进样开始到柱后该组分出现峰值浓度时所需的时间。容量因子（k'）：在一定温度下，组分在两相间的分配达到平衡时，其在两相中的绝对量之比。容量因子越大，保留时间越久。分离度（Rs）：在给定色谱条件下，相邻的两个色谱峰被分离的程度用分离度来表示。薄层色谱法(TLC)比移值（Rf）：在薄层色谱法中，能够反映组分斑点在薄层板中位置的保留参数称为保留比，或称比移值。Rf=组分原点中心至展开后斑点中心的距离/组分原点中心至展开剂前沿的距离。常用溶剂极性大小的顺序：石油醚，环己烷，甲苯，苯，氯仿，乙醚，醋酸乙酯，正丁醇，正丙醇，丙酮，异丙醇，乙醇，醋酸，甲醇，甲酸，水。气相色谱法（GC）：以气体为流动相的色谱法，适用于分离分析有一定挥发性和热稳定性的化合物。一般要求有已知纯物质作对照。McRaynolds常数：简称麦氏常数（ΔI），表示固定液相对极性大小的参数，ΔI越大，固定液的极性越强。检测器：ECD---常用于测含卤素的化合物；FID---只用作酒精；NPD---含氮磷的有机化合物；FPD---含硫和含磷的有机化合物。最重要的气相色谱条件：温度定性鉴别最重要的对比依据：保留时间。高效液相色谱法（HPLC）1正相色谱法：流动相极性小于固定相极性；主要用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子性化合物；极性小的组分保留时间短，极性大的组分保留时间长。2反相色谱法：流动相极性大于固定相极性；主要用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性及非极性的分子型化合物；极性大的组分保留时间短，极性小的组分保留时间长。有机质谱法（MS）质谱图：在质谱分析中，以例子相对丰度为纵坐标，正离子的质荷比为横坐标的图谱称为质谱图。分子离子峰：化合物分子电离后，失去一个电子而生成带正电荷的离子称为分子离子，由此产生的质谱峰称为分子离子峰。气相色谱---质谱联用（GC/MS）总离子流色谱（TIC）：被分离组分经离子源电流所产生的所有质荷比的离子流信号与组分的流出时间的色谱图。第五章合成药毒物苯二氮卓类1、提取：该类药物多数是碱性的，要用弱碱性溶液提取：氯仿，乙酸乙酯，乙醚2、三唑仑的提取用酶解法3、气相色谱法检测三唑仑需使用ECD（三唑仑上含有卤素原子）4、最主要的检测方法：气相色谱---质谱联用分析方法巴比妥类1、检材处理时需要调至酸性2、主要方法：GC、GC/MS吩噻嗪类1、与苯二氮卓类类似2、对光敏感第六章天然药毒物乌头1、剧毒成分：双酯型的而萜类生物碱2、弱碱性条件下用乙醚，氯仿等有机溶剂提取3、形态学鉴定有重要意义4、主要检测方法：LC/MS颠茄类1、抗胆碱药物，莨菪碱，阿托品等2、首选检测方法：高效液相色谱法（HPLC）反相离子对马钱子：首选方法：GC、GC/MS钩吻：首选方法：GC、GC/MS；MS用于确证最好斑蝥：首选方法：GC、GC/MS河豚毒素：1、易溶于乙酸，不溶于其他有机溶剂；2、LC/MS第七章毒品一、中枢神经抑制剂阿片生物碱（吗啡）1、两性，pH8.5--9.3缓冲液；不溶于单一有机溶剂，溶于混合溶剂（氯仿+醇）；盐酸盐不溶于氯仿2、吗啡在胆汁中浓度最高3、确认吸食的证据：O6--单乙酰吗啡4、最佳检材：尿液。重要检材：毛发（用于了解吸毒史）5、现场检测：甲醛--硫酸试验，显示紫红色或者紫堇色6、最常用的确证方法：GC/MS哌替啶（杜冷丁）1、体内主要代谢产物：去甲基哌替啶，检测重点在于该物质和原药物2、检材：尿液，毛发美沙酮：阿片类药物依赖的常规戒毒药物1、美沙酮盐酸盐可溶于水和氯仿2、主要代谢产物：吡咯烷（EDDP）3、检材：尿液，毛发4、检测方法：HPLC，手性柱二、中枢神经兴奋剂苯丙胺类兴奋剂：甲基苯丙胺（MA），亚甲基二氧甲基苯丙胺（MDMA，摇头丸）1、主要检测对象：环取代苯丙胺MDMA，MDA2、首选检材：尿液3、苯丙胺，美沙酮，哌替啶，氯胺酮的检测方法是一样的可卡因1、判定滥用可卡因的依据：a、同时检出可卡因和苯甲酰爱康宁（BZE）b、同时检出苯甲酰爱康宁和爱康宁甲酯（EME）三、致幻剂大麻1、主要活性成分：四氢大麻酚（THC），在体内代谢为11-羟基-四氢大麻酚（11-OH-THC）2、检测方法：香夹兰素反应（快速Duguenois试验）；快蓝B反应氯胺酮1、主要代谢产物：去甲基氯胺酮第八章杀虫剂除草剂1、重点：有机磷，氨基甲酸酯，拟除虫菊酯2、三中杀虫剂的提取：干沙法（直接提取法）一、有机磷杀虫剂1、沸点较高，不具有酸碱性，化学性质不稳定2、极性由弱至强：对硫磷，杀螟松，马拉硫磷，敌敌畏，乐果，敌百虫，甲胺磷。3、检材采取和处理原则及时采取送检低温冷冻保存避免与碱性物质接触④同时取送与案情相关联的当地杀虫药剂作为对照样品。4、杀虫剂的分离净化要求溶液a、接近中性b、温度尽可能低c、时间尽可能短5、最常用提取法：直接提取法，又称干沙法（适用于含水量较低的检材）6、必须进行净化步骤：层析柱净化法7、化学显色法：a、二氯化钯反应：含硫时显黄色或黄褐色b、间苯二酚--氢氧化钠反应：敌敌畏，敌百虫生成红色化合物8、薄层色谱的显色（考）：二氯醌氯亚胺--溴显色：含硫有机磷显色；二氯化钯显色：含硫有机磷（对硫磷，甲基对硫磷）显黄色；间苯二酚--氢氧化钠显色：检测含多卤代有机磷的化合物（敌敌畏，敌百虫）9、最佳检测方法：气相色谱法；检测器：FPD（火焰光度检测器）二、氨基甲酸酯类杀虫剂1、直接提取法：a、适用于含水量较少的检材b、适用于毒物在水中有一定溶解度，不宜用有机溶剂直接提取c、无水硫酸钠的作用：1、脱水2、降低毒物在水中的溶解度2、最常用检测方法：GC/MS三、拟除虫菊酯类杀虫剂1、与乙酰胆碱抑制剂（有机磷，氨基甲酸酯）不同点：阻断神经传导，作用于神经轴突2、与光学异构体的含量比例相关