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12.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体1．太空动物细胞融合实验依据的原理和促进细胞融合的方法分别是()A．细胞的全能性；灭活病毒诱导融合B．细胞的全能性；电刺激融合C．细胞膜的流动性；灭活病毒诱导融合D．细胞膜的流动性；电刺激融合解析：细胞融合的理论基础是细胞膜的流动性，在太空中进行动物细胞融合所用的融合方法是电刺激。答案：D2．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是()A．动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B．动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C．烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D．动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒解析：动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同，动物细胞培养采用的是液体培养基、植物组织培养采用的是固体培养基，A项正确。动物细胞培养需要用胰蛋白酶处理，但植物组织培养过程不需要胰蛋白酶处理，B项错误。植物细胞具有全能性，因此烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖，因此小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖，C项正确。动物细胞培养可以用于检测有毒物质，茎尖(几乎不含病毒)培养可用于植物脱除病毒，D项正确。答案：B3．单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是()①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．①②③④B．①③⑤C．②④D．②③解析：杂交瘤细胞是制备单克隆抗体所必需的，因此将其筛选出来。答案：A4．单克隆抗体制备过程中所用的骨髓瘤细胞是一种基因缺陷型细胞，其合成核酸的途2径能被氨基嘌呤阻断。现将从预先注射了某种抗原的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞与上述骨髓瘤细胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基嘌呤的培养液。若将这些混合物分装于细胞培养板的小孔中培养(如图所示)，则小孔中的培养物不可能出现的结果是()A．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阴性B．细胞分裂繁殖，产生抗体，专一性抗体检验呈阳性C．没有活细胞，产生抗体D．没有活细胞，不产生抗体解析：单克隆抗体制备过程中与骨髓瘤细胞发生融合的B淋巴细胞种类很多，有的能够产生专一性抗体，有的不能；但只有活细胞才能产生抗体。答案：C5．如图为某同学根据杂交瘤技术的方法设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案，据图回答。(1)该方案能达到预期效果吗？_______，原因是___________________________________________________________________。(2)图中②为________过程，常用________________作为诱导剂，该细胞继承了________________________，因此不仅能分泌________________________，还有_________________的本领。(3)破伤风杆菌的抗体最终可以从________和________中提取。(4)该方案的目的是___________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：题中图为单克隆抗体制备过程的示意图。在制备单克隆抗体时，是利用了已免疫B淋巴细胞产生单一抗体的特点和骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖的特点，在获得杂3交瘤细胞时，需要人工诱导已免疫B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合，方法通常用灭活的病毒或聚乙二醇。图中的B淋巴细胞不是免疫的B淋巴细胞，所以该实验不能达到预期效果。获得杂交瘤细胞经筛选后可在小鼠体内或体外培养而获得单克隆抗体。答案：(1)不能没有抗原注入小鼠体内，无法获得产生所需抗体的B细胞(2)细胞融合灭活的病毒(或聚乙二醇)双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖(3)培养液小鼠腹水(4)制备破伤风杆菌的单克隆抗体A级基础巩固1．生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂()A．能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制B．能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C．选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制D．能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成解析：淋巴细胞不能增殖而骨髓瘤细胞能增殖，因此加入某种试剂抑制骨髓瘤细胞的DNA复制就能筛选出杂交瘤细胞。答案：C2．一系列实验证明细胞膜具有流动性，荧光抗体免疫标记实验就是其中的一个典型例子。下图表示了人、鼠细胞融合的过程，研究中分别将带有绿色荧光、能与人体细胞膜上HLA抗原特异性结合的抗体和带有红色荧光、能与小鼠细胞膜上H－2抗原特异性结合的抗体放入细胞培养液中，对人、鼠细胞进行标记。下列有关该实验的叙述不正确的是()A．要使实验现象明显，可以适当提高细胞培养液的温度B．选取不同生物细胞进行融合是因为不同生物细胞表面抗原差异较大C．实验表明不同种生物细胞可以杂交，而同种生物细胞不能进行融合D．实验结果可以直接证明细胞膜上的蛋白质分子可以运动解析：该实验表明两个细胞能够融合，并没有说明是同种细胞还是不同种细胞之间的融合。答案：C3．下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是()4A．④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞B．②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质C．上图中有一处明显错误D．⑤可以无限增殖解析：④中的筛选是为了获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。A项错误，B项正确。②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质，这样才能选出杂交瘤细胞。C项正确，图中的小鼠没有经过免疫处理，应该注射相应的抗原，小鼠才能形成相应的B淋巴细胞。D项正确，杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又能产生特定抗体。答案：A4．英国科学家维尔穆特首次用羊的体细胞(乳腺细胞)成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，这一方法被称之为“克隆”，以下四项中与此方法在本质上最相近的是()A．将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔的子宫内，并最终发育成两只一样的兔子B．将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的烟草新品种C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D．将人的精子与卵细胞在体外受精，待受精卵在试管内发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿”解析：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物的无性繁殖或克隆，A项正确；将人抗病毒基因嫁接到烟草DNA分子上，采用了转基因技术，其原理是基因重组，不属于克隆，B项错误；将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞，不属于克隆，C项错误；“试管婴儿”是体外受精和胚胎移植形成的，属于有性生殖，不是克隆，D项错误。答案：A5．将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是()A．①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B．经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定抗体C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞5D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性解析：①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同，都是细胞膜的流动性，A项正确；经①形成的杂交瘤细胞不一定都能产生特定抗体，需要经过抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B项错误；②过程需要采用抗体阳性检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，然后进行克隆化培养(包括体内培养和体外培养)，C项正确；抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性，D项正确。答案：BB级能力训练6．科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下面的问题。(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，一般选用的是________________和________________________融合。(2)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：①酶A是指____________，酶B是指____________。②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的原因是_________________________________________________________________；Ⅲ指代的细胞具有的特点_____________________________________________________________________________________。③有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：________________________________________________________________________________。解析：(1)制备单克隆抗体选用的融合细胞一般为骨髓瘤细胞(能无限增殖)与经过免疫的B淋巴细胞(能产特异性抗体)。(2)图示Ⅰ过程为获取目的基因，需用限制酶切取出目的基因片段；由于目的基因导入成功率并不高，故常需进行导入检测；由于Ⅲ的细胞具有“无限增殖”调控基因，故可进行无限增殖，从而大量产生单克隆抗体。答案：(1)骨髓瘤细胞经过免疫的B淋巴细胞(浆细胞)6(2)①限制酶DNA连接酶②导入成功率很低，需要检测目的基因在多体细胞中是否进行了表达既能无限增殖又能产生特异性抗体③7．如图甲、乙分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题。(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是________________。(2)图甲中②过程常在________________诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是___________________________________________________________________________________________。(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其___________。(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？________。原因是________________________________________________________________________________________________。解析：(1)图甲中杂交瘤细胞及图乙中的重组细胞均需进行动物细胞培养。(2)常用聚乙二醇或灭活的病毒诱导等方法诱导动物细胞融合。(3)由于单克隆抗体具特异性强、灵敏度高等优点，故可定向攻击癌细胞。(4)若不考虑环境因素，克隆动物的性状不是全部像白面绵羊，因为卵细胞细胞质中的线粒体遗传物质也能控制某些性状。答案：(1)动物细胞培养(2)聚乙二醇(或灭活的病毒，物理方法如离心、振动、电激也可)不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件(3)特异性(4)不是卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状8．如图是利用生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请回答下列问题。7(1)①过程用________________________________作为诱导剂，诱导细胞融合。X细胞需在具有________作用的培养基上培养。(2)Y细胞的特点为______________________________，为保证Y细胞所产生抗体为所需抗体，应对Y细胞进行________。(3)过程④所用的酶为_________，结构甲为____________。(4)过程⑥常用________处理大肠杆菌，目的是___________________________________________________________________。解析：(1)①过程为诱导融合过程，常用