基因毒性杂质-全面信息资料

2012年5月1背景知识介绍3确定毒性阈值的步骤4最大限度地控制杂质2杂质与杂质限度1背景知识介绍2杂质与杂质限度3确定毒性阈值的步骤4最大限度地控制杂质苯并芘、黄曲霉素、亚硝胺许多化疗药物也具基因毒性，它们的不良反应是由化疗药物对正常细胞的基因毒性所致，如顺铂、卡铂、氟尿嘧啶等。氨基糖甙类抗生素大剂量、长期使用会引起耳毒性有些特别敏感的病人，仅使用一次或短期使用，就出现了听力损失。研究表明，他们的一个基因上有一点(mtl555G)与别人不同，这使他们对氨基糖甙类药物耳毒性的易感性大大增加。是指能直接或间接损伤细胞DNA，产生致突变和致癌作用的物质。常用的缩写PGLs（potentiallygenotoxicimpurities有潜在基因毒性的杂质）GTLs（genotoxicimpurities基因毒性杂质）可能产生基因毒性杂质的环节：新药合成原料纯化储存运输（与包装物接触）。。。。。。EMEA（欧洲药品局）2006年首先颁布了《基因毒性杂质限度指南》，并自2007年1月1日起正式实施。该指南为限制新活性物质中的基因毒性杂质提供了解决问题的框架和具体做法。ICH2006年，ICH也公布了相应的要求具体内容参见ICHQ3A(R2)IMPURITIESINNEWDRUGSUBSTANCESQ3appendix2reference,Step4version(25.10.06)新药原料药中的杂质，Q3A(R2),步骤4（06年10月25日）版FDA于2008年12月正式签发了类似指南：GuidanceforIndustry――GenotoxicandCarcinogenicImpuritiesinDrugSubstancesandProducts：RecommendedApproaches。主要内容包括：指南发布的背景原料药和制剂中的基因毒性杂质生成的预防办法基因毒性杂质的分析方法、处理方法和减少方法上市申请和临床研究申请的可接受限度草药原料药和制剂中基因毒性杂质评估指南赖祖亮@小木虫2杂质与杂质限度1背景知识介绍3确定毒性阈值的步骤4最大限度地控制杂质StandardlimitsforimpuritiesinAPIsAPI中杂质的标准限度每日最大剂量ReportingThreshold2,3报告限度IdentificationThreshold*鉴定限度QualificationThreshold*毒性限度≤2g/天0.05%0.10%或者每天摄入量1.0mg（取最小值）0.15%或者每天摄入量1.0mg（取最小值）＞2g/天0.03%0.05%0.05%SFDA质控限度：质量标准中允许的限度，制定限度超过该值，应有充分的依据。报告限度最大日剂量≤1g＞1g限度0.1%0.05%鉴定限度最大日剂量＜1mg1mg～10mg＞10mg～2g＞2g限度1.0%或5μg0.5%或20μg0.2%或2mg0.1%质控限度最大日剂量＜10mg10mg～100mg＞100mg～2g＞2g限度1.0%或50μg0.5%或200μg0.2%或3mg0.15%考虑病例数与疗程，同时考虑：遗传毒性研究；常规毒性研究；其它特定的毒性终点（酌情而定）。降低到鉴定限度以下降低到质控限度以下NoNo是否与临床不良反应相关？合格NoYes降低到安全限度决策树如果一个物质的体内试验表明对DNA有潜在的破坏性，可能导致肿瘤产生，我们是否可以这样下结论：任何摄入水平都具有致癌的风险。不存在明显的阈值。××我们是不是做一个试验：剂量从低到高，对其影响性进行线性推断？生物系统的纠错功能使试验不具备可操作性。×引入一个新观点：确定一个可接受其风险的摄入量突变的机制：细胞水平：基因突变，染色体重排，其他分子水平：切断或共价修饰DNA的损伤生物系统的纠正措施：修复受损的DNA程序性细胞死亡（凋亡）TTCThresholdofToxicologicalConcern：毒性物质限量，也可以称之为毒理学关注门槛，是一个默认值。一个未知基因毒性数据的杂质：TTC=1.5微克/天每天摄入1.5微克的基因毒性杂质，被认为对于大多数药品来说是可以接受的风险。使得人一生的致癌风险小于十万分之一。现实生活中，人一生得癌症的概率是四分之一。必须要强调的是TTC是一个风险管理工具，它采用的是概率的方法。意思为：假如有一个基因毒性杂质，并且我们对它的毒性大小不太了解，如果它的每日摄入量低于TTC值，那么它的致癌风险将不会高于10－5的概率。所以TTC不能被理解为绝对无风险的保障。3确定毒性阈值的步骤1背景知识介绍2杂质与杂质限度4最大限度地控制杂质依据化学结构，将杂质分为五类；Step1:Step2:Step3:按照分类，确定验证的策略(参见决策路线图)；按照日剂量，确定原料药中杂质的限度(参见表1：短期用药推荐容许日摄入量)。Class1:GenotoxicCarcinogens第1类：已知的、具有基因毒性（突变性）和致癌性的杂质Step1:Class2:GenotoxicCarcunknow第2类：已知的、具有基因毒性（突变性），但致癌性未知的杂质Class3:Alert-Unrelatedtoparent第3类：具有警示结构、与API无关、基因毒性（突变性）未知的杂质Class4:Alert-Relatedtoparent第4类：具有警示结构、与API有关、基因毒性（突变性）未知的杂质Class5:NoAlerts第5类：没有警示结构，没有基因毒性（突变性）的杂质Group1:AromaticGroups(芳香族化合物）:NAOHN-HydroxyarylsN-羟基苯胺NAAON-AcylatedaminorrylsN-酰化氨基苯NO+_Aza-arylN-oxides氮杂芳基N-氧化物NAAAminoarylsandalkylatedaminoaryls芳香胺和烷基取代的芳酰胺Group2:AlkylandArylGroups(烷烃和环烷烃类化合物）AHOAldehydes醛NAAOHN-MethylolsN-亚甲基醇NAANON-NitrosaminesN-亚硝基胺ANO2Nitrocompounds硝基化合物OANH2OCarbamates氨基甲酸类OAAEpoxides环氧丙烷HNAAAziridines氮丙啶类OCO(S)Propiolactones环丙酯NHalogen(S)NorSMustardsβ卤代乙胺NNRAAAHydrazinesandazoCompounds肼和偶氮化合物Group3:HeteroatomicGroups(含杂原子化合物）EWGMichale-reactiveAcceptors迈克尔加成反应受体POORSOORAlkylEsetrsofPhosphonatesorSulfonates膦酸酯或者磺酸酯HalogenHalo-alkenes卤代烯烃AHalogenPrimaryHalides烷烃和环烷烃卤代物Step2:杂质的分类、验证和风险评估Class1:GenotoxicCarcinogensNoClass2:GenotoxicCarcunknow(Staged)TTC(seeTable1)NoorunknowYesPDE(e.g.ICHQ3appendix2referenceYesNottestedClass3:Alert-UnrelatedtoparentClass4:Alert-RelatedtoparentControlasanordinaryimpurityEliminateImpurity?RiskAssessment3?ThresholdMechanism?ImpurityGenotoxic?1APIGenotoxic2Class5:NoAlertsNoNo清除杂质风险评估用阈值控制该杂质是否有基因毒性？该原料是否有基因毒性？疑似基因毒素的日摄入量用药期限＜14天14天-1月1-3月3-6月6-12月12月容许日摄入量(μg/日)12060201051.5Step3:FDAhttp:值短期用药的容许摄入量TTC=1.5微克/天表1：短期用药推荐容许日摄入量≥0.5%≥0.5%≤100ppm≤100ppmIncreasedduration=DecreasedADIofImpurityIncreasingDoseofAPIRegulatorToxicologyandPharmacology.2006,44:198-211EMEAPDENOELF1F2F3F4F5允许的日暴露量（mg/天）观察不到影响的限值物种之间的外推法因子（F1=12，从小鼠到人类）个体差异因子毒性研究的周期因子严重毒性的因子如果只有LOEL（可观察到效果最低限值）时的因子ICHQ3CGuidelineforResidualSolvents残留溶剂指南：://×重量调整因子PDE=F1×F2×F3×F4×F5溶剂名称PDE值（mg/天）限度（%）第一类溶剂（应避免使用）苯0.020.0002四氯化碳0.040.00041,2-二氯乙烷0.050.00051,1-二氯乙烯0.080.00081,1,1-三氯乙烷15.00.15第二类溶剂（应限制使用）乙腈4.10.041氯苯3.60.036氯仿0.60.006环己烷38.80.3881,2-二氯乙烯18.70.187溶剂名称PDE值（mg/天）限度（%）第三类溶剂（GMP或其他质量要求限制使用）乙酸50.00.5丙酮50.00.5甲氧基苯50.00.5正丁醇50.00.5仲丁醇50.00.5乙酸丁酯50.00.5叔丁基甲基醚50.00.5异丙基苯50.00.5二甲亚砜50.00.5乙醇50.00.5乙酸乙酯50.00.5药物中常见残留溶剂及其限度（节选）Goldcarcinogenicitydatabase()里面有1574种致癌物质的列表，结构式，CAS号，作用部位，TTC值等等一系列信息。近30年的关于基因毒性方面研究的出版物（PDF版）用不同分类方法统计的致癌物质列表。不用注册，可以直接点击查看、下载全文。目的在于检测试验物质是否直接或间接引发基因损伤，并测知其对基因的损伤程度。测试潜在基因毒性杂质的顺序：1.计算机筛选（软件模拟计算）2.微生物试验（例如：诱变可能性试验）3.动物试验（通常是小鼠和大鼠）可以用于预测基因毒性的软件MultiCASE,Oncologic,DEREK,TOPKAT;’RTECS’(RegistryofToxicEffectsofChemicalSubstances,subscription);LeadScope;FDAdatabases://=DocumentDetail&o=09000064807ddb80ToxTreesoftwarefordegradation:Railard,S.P.;Bercu,J.;