生物安全柜

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资源描述

生物安全柜1、无菌室(1)无菌室的结构:更衣间、缓冲间、操作间(2)无菌室的消毒和防污染每日(使用前)紫外线照射(1~2小时)。每日用消毒液擦拭地面和台面。注意自身生物安全。美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999危害等级I不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危害等级Ⅱ能引起人或动物发病,但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限。美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999危害等级Ⅲ能引起人类或动物严重疾病,或造成严重经济损失,但通常不能因偶然接触而在个体间传播,或能使用抗生素、抗寄生虫药物治疗的病原体。危害等级Ⅳ能引起人类或动物非常严重的疾病,一般不能治愈,容易直接、间接或因偶然接触在人与人、或动物与人,或人与动物,或动物与动物间传播的病原体。美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999生物安全水平分级:根据操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施,将生物安全防护水平(biosafetylevel,BSL)分为4级,Ⅰ级防护水平最低,Ⅳ级防护水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平;美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999一级生物安全防护实验室一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服,带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套进行细菌总数、大肠菌群实验美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999一级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。细菌总数、大肠菌群测定、格鲁伯耐格里原虫、感染性犬肝炎病毒、枯草杆菌美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999二级生物安全防护实验室在实验室所在的建筑内应配置高压蒸汽灭菌器。实验室内配备生物安全柜。设洗眼设施,必要时应有应急喷淋装置。有可靠的电力供应和应急照明。必要时,重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999二级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。麻疹病毒、乙型肝炎病毒、HIV血清学检测、衣原体、沙门氏菌、志贺氏菌美国CDC/NIH对微生物指导性分类BiosafetyinMicrobiologicalandBiomedicalLaboratories4thEdition,May1999生物安全柜:是最重要的安全设备,形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作,除实际上不可实施外,都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。生物安全柜(biosafetycabinet;biologicalsafetycabinet)是防止操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置气溶胶(aerosol)是指悬浮于气体介质中、粒径一般为0.001μm~100μm的固态、液态微粒所形成的胶溶态分散体系1、生物安全柜的基本工作原理生物安全柜的工作原理主要是将柜内空气向外抽吸,使柜内保持负压状态,通过垂直气流来保护工作人员;外界空气经高效空气过滤器(HEPA)过滤后进入安全柜内,以避免处理样品被污染;柜内的空气也需经过HEPA过滤器过滤后再排放到大气中,以保护环境。1、生物安全柜的基本工作原理生物安全实验室选用生物安全柜的原则实验室级别生物安全柜选用原则一级一般无须使用生物安全柜,或使用Ⅰ级生物安全柜二级当可能产生微生物气溶胶或出现溅出的操作时,可使用I级生物安全柜;当处理感染性材料时,应使用部分或全部排风的Ⅱ级生物安全柜;若涉及处理化学致癌剂、放射性物质和挥发性溶媒,则只能使用Ⅱ-B级全排风(B2型)生物安全柜。三级应使用II级或Ⅲ级生物安全柜;所有涉及感染材料的操作,应使用全排风型Ⅱ-B级(B2型)或Ⅲ级生物安全柜。四级应使用Ⅲ级全排风生物安全柜。当人员穿着正压防护服时,可使用Ⅱ-B级生物安全柜。1.空气过滤系统是保证设备性能的最主要的系统由进风口预过滤罩、进气风机、风道、排风预过滤器、净化空气过滤器、外排空气预过滤器组成主要功能是保证洁净空气不断地进入工作室,使工作室内的垂直气流保持一定的流速,保证工作室内的洁净度达到100级。同时使外排的气体也被净化,防止环境污染1、生物安全柜的基本工作原理HEPA过滤器是生物安全柜的主要生物防护结构过滤效率可达99.99%~100%,对直径为23nm~25nm的病毒颗粒也可完全拦截为延长HEPA过滤器的使用寿命,通常在HEPA过滤器前安装预过滤罩和预过滤器,使空气经预过滤净化后再进入HEPA过滤器中1、生物安全柜的基本工作原理2.外排风箱系统主要由外排风箱壳体、风机和排风管道组成外排风机提供排气的动力,将工作室内因操作所致的不洁净气体抽出,并由外排过滤器净化,起保护所操作的样品或标本的目的由于工作室内为负压,使玻璃门处向内的补给空气平均风速达到一定程度(一般≥0.5m/s),防止安全柜内空气外溢,起到保护操作者的目的1、生物安全柜的基本工作原理3.前玻璃门驱动系统由门电机、前玻璃门、牵引机构、传动轴和限位开关等组成4.紫外光源位于前玻璃门内侧,固定在工作室的顶端,装有紫外灯管,用于消毒1、生物安全柜的基本工作原理5.照明光源位于前面板内侧,保证工作室内有一定的亮度6.控制面板有电源开关,紫外灯、照明灯开关,风机开关,控制前玻璃门上下移动的开关,及有关功能设定和系统状态显示的液晶显示屏等1、生物安全柜的基本工作原理2、Ⅰ级生物安全柜Ⅰ级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜适用于对处理样品安全性无要求且生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作无手套型有手套型2、Ⅰ级生物安全柜因不考虑处理样品是否会被进入柜内的空气污染,故对进入柜内的空气洁净度要求不高空气的流动为单向、非循环式,空气流经HEPA过滤器后进入柜内,通过工作台面后又被过滤、经排气口排出2、Ⅰ级生物安全柜为保护操作人员安全,其向内的非循环吸入气流必须远离操作者,故要求在使用前方有操作窗口、无手套的Ⅰ级生物安全柜时,避免人员在安全柜前快速走动或操作人员完成操作后将手臂快速从柜内抽出为保护环境,安全柜中的气体在外排到大气以前必须先经过HEPA过滤器过滤2、Ⅰ级生物安全柜3、Ⅱ级生物安全柜Ⅱ级生物安全柜是指用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜通常适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。当有毒化学物质或放射性核物质被用于微生物研究或制药的添加物时,应使用专为此目的设计制造的II级生物安全柜Ⅱ级生物安全柜为临床生物防护中应用最普遍的一类生物安全柜临床中处理高浓度或大容量感染性材料时,以Ⅱ级生物安全柜应用最多3、Ⅱ级生物安全柜Ⅱ级生物安全柜至少需装置一个HEPA空气过滤器对外排气体进行净化,工作空间为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流垂直空气工作时正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下部为操作窗口3、Ⅱ级生物安全柜由于外排风机将安全柜内空气不断地向外抽吸,使柜内保持负压状态,故操作窗口处虽然处于开放状态,外部空气只可能经操作窗口被吸入,而柜内的空气不可能由操作窗口逸出,避免了气溶胶污染,保护了操作人员的安全3、Ⅱ级生物安全柜操作窗口内侧垂直气流和外部吸入气流交汇点的平衡是生物安全柜的一个设计关键。若外部吸入气流过强,此未经过滤的空气有可能越过前方的回风隔栅而污染操作平台;若垂直气流过强,则有可能使柜内含有微生物的空气逸出Ⅱ级生物安全柜分为A1、A2(原B3)、B1、B2四个类型3、Ⅱ级生物安全柜A1型生物安全柜3、Ⅱ级生物安全柜A1型生物安全柜由静压箱送出的,经HEPA过滤器过滤的垂直气流是垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区,30%的气体通过排气口HEPA过滤器过滤排除)允许经排出口HEPA过滤器过滤后的气流返回实验室允许有正压的污染风道和静压箱3、Ⅱ级生物安全柜A2型生物安全柜3、Ⅱ级生物安全柜A2型生物安全柜经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由静压箱排出的垂直气流和吸入气流混合后的一部分(即柜内30%气体通过排气口HEPA过滤器排除,70%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区)3、Ⅱ级生物安全柜A2型生物安全柜必须经HEPA过滤器过滤后,所有废气才能排到室外,但废气不可再进入安全柜循环或返回实验室所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压或者被负压的风道和静压箱包围3、Ⅱ级生物安全柜B1型生物安全柜当使用微量挥发性有毒化学物质和痕量放射性核素用于微生物学研究时,可采用B1型生物安全柜,但是对这些化学物质和放射性核素的处理应在安全柜的直接排风区内进行3、Ⅱ级生物安全柜B1型生物安全柜经HEPA过滤器过滤后的垂直气流中的绝大部分是由未污染的循环吸入气流组成(即柜内70%气体通过排气口HEPA过滤器排除,30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区)经HEPA过滤器过滤后的大部分污染的垂直气流,通过专用风道过滤后排入大气所有被生物污染的风道和静压箱应保持负压,或被负压的风道和静压箱包围3、Ⅱ级生物安全柜B2型生物安全柜(也称为“全排”型)适用于处理感染性样品、使用挥发性有毒化学物质和以放射性核素作为微生物学研究的工作场合3、Ⅱ级生物安全柜B2型生物安全柜经HEPA过滤器过滤后的垂直气流是由实验室或室外空气送入的(即:安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程)所有的吸入气流和垂直气流经HEPA过滤器过滤后排入大气,不再进入安全柜循环或返回实验室所有污染的风道和静压箱应保持负压,或是被直接排风的风道和静压箱包围3、Ⅱ级生物安全柜Ⅲ级生物安全柜是完全密闭、不漏气结构的通风安全柜工作空间内为经HEPA过滤器净化的无涡流的单向流空气安全柜正面上部为观察窗,下部为手套箱式操作口。在安全柜内的操作是通过与安全柜相连接的橡皮手套进行的4、Ⅲ级生物安全柜安全柜应维持至少120Pa的负压,方可确保人体与柜内物品完全隔绝进入气流经数个HEPA过滤器过滤后送入安全柜,排出气流应经双层HEPA过滤器过滤或通过HEPA过滤器过滤和焚烧来处理Ⅲ级生物安全柜适用于生物危险度等级为1、2、3和4的媒质的操作4、Ⅲ级生物安全柜生物安全柜的背面、侧面离墙的距离宜保持不小于150㎜~300㎜的检修距离,顶部也应留有不小于300㎜的空间排风系统应能保证生物安全柜内相对于其所在房间为负压,且安装时需注意必须方便排风HEPA过滤器的更换如果安全柜内需要其他气体,应同时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