地方病实验室氟、砷测定质量保证

地方病实验室氟、砷测定质量保证于光前中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病防治研究所E-mail:[e-mail]质量保证为了保证检测数据的准确性及可比性，对监测全过程所采取的各种措施，包括实验设计、样品采集、测定规范、人员培训、实验室管理和数据处理及解释等内容。质量保证系由一个系统组成，借助于该系统，实验室能保证所产生的结果经过考核而达到一定质量。质量控制是指为保证得到的数据的准确度和精密度落在已知的概率限度内所采取的措施，即为产生达到质量要求的测量所遵循的步骤。质量评定是检验质量控制系统是否工作在允许限之内和评价数据质量的步骤。一.实验室管理实验室设施和环境应满足分析测定的要求，检测实验室应保证干净、整洁、无交叉污染。要制定且落实实验室对人员、设备设施和样品的各项安全措施。实验室所用的天平、容量仪器应符合要求或进行校正。1人员1.1经过良好训练和操作正确熟练的分析测试人员。1.2对本专业有足够的技术知识，对承担的测试项目要做到理解原理，正确操作和严守规程。1.3接受新项目前，应在测试工作中完成规定的各种质量控制实验，达到要求，才能进行新项目的测试。1.4应懂得基本统计知识和技术，正确使用有效数字和统计方法，掌握分析测试结果的表达形式和统计推断的有关知识。1.5对一个良好的分析人员来说，对所得到的每一个数据往往不放过任何可疑点，包括从采样开始到得到结果的每一个步骤，必须一清二楚。2.实验室环境实验室应保持整洁、安全的操作环境，布局合理，测试区域应于办公场所分离。测试过程中有废气产生的实验室和实验装置，应配置合适的排风系统；产生刺激性、腐蚀性、有毒气体的实验操作应在通风柜内进行。化学试剂贮藏室必须防潮、防火、防爆、防毒、避光和通风，固体试剂和酸类有机类等液体应隔离存放。当环境条件可能影响测定结果的准确性和有效性时，应停止测定。3.仪器管理2.1建立仪器设备档案：包括仪器设备卡、使用说明书、使用记录、故障和维修情况记录、仪器附带资料等。2.2仪器的使用：按仪器使用说明书编制实验室的仪器设备操作规程，实验室人员按规程操作。对于使用频率高，容易出现误操作的测量设备应定期进行检查，详细记录检查结果。仪器使用后应及时填写仪器使用记录。2.3仪器的维护：仪器应由专人保管和使用，制定仪器的维护计划，定期校正和维护，填写维护记录，及时发现仪器设备出现的故障，并进行维修，使之处于正常工作状态。4.实验用水水的电阻率越高，表示水中的离子越少，纯度越高。通常离子交换水的电阻率ρ在0.5MΩ·cm以上时，即可满足日常分析的要求。特殊用水应按有关规定制备，检验合格后使用。(各级水的电阻率ρ/Ω·cm，25℃)水的类型电阻率自来水1900一次蒸馏水3.5×105二次蒸馏水1.5×10628次蒸馏水16×106复床离子交换水2.5×105混床离子交换水12.5×106绝对水(理论上最大电阻率)18.3×106二．制定和实施测定全过程质量控制根据具体操作步骤，确定各主要环节的技术操作规范，并在分析测定过程中严格执行，以保证得到可靠的测定结果。①样品的采集、运输和保存；②样品的预处理；③干扰成分的分离；④分析方法的选择、测定；⑤实验数据的记录和处理。三．样品采集的基本要求实践表明，采样误差对结果的影响往往大于分析误差。1.样品采集的原则1.1代表性原则采集的样品在空间及时间上符合总体的真实情况，对测定对象的总体有代表性，即所采集的样品必须能代表所检查的总体。随机性，即避免一切主观因素，使组成总体的每一个体，都具备同等机会被采集到样品中；等量性，即样本应由同样多的样品数组成；否则，样品多者代表性大，少者代表性小。1.2无污染原则样品采集及保存过程必须注意防止各种原因造成的外源性和内源性污染。采样环境不能有其他来源的氟、砷污染，也不能有采样容器的氟、砷污染；在样品运输、保存及检测中，亦应当警惕样品受到污染。同时，还要防止温度、湿度、压力和细菌、保存时间等因素导致样品性状、结构及组成的改变。1.3足够量原则应根据采用检测方法的灵敏度确定采集样品的数量，并保证有足够的量供平行样分析和复检。如果采集样品量太少，则样品中目标物含量可能低于检测限，不易得到反映实际水平的结果。如检测的目的物为砷，则采集的样品量应保证样品含砷量在所选测定方法的有效检测范围内，以便能够获得准确测定结果。1.4条件一致原则在同一批采集多个样品时，要保证不同样品间采样条件的一致性，使不同样品间的检测结果具有可比性。如对一个村庄进行水砷含量调查时，应当在采样器皿及其洗涤方法、洗涤次数与采水深度等方面保持一致。同一个样品在不同时间采样，也要保持采样条件的一致性，如对改水工程进行监测，每年监测次数仅1-2次，就要保证不同年份间监测的时间、气温还有采样方法等方面的一致性。1.5质量保证原则样品采集必须保证质量，进行每一项调查和研究项目的采样工作都应制订采样计划，在采样过程中遵守操作规程。任何对采样质量的疏忽都可能对样品检测结果，甚至整个调查工作造成很大影响。如采集水样时，采样器材的质量要求、采样操作方法、采样记录和检查规则、样品管理程序等，都应得到严格遵守。2.常见样品的采集与保存方法2.1水样的采集与保存2.1.1．取样数量：分析用水样的体积取决于分析项目及所要求的精确度，进行总砷的单项分析取100ml水样即可，进行多项分析取1-2L或更多。2.1.2．容器：水样采集用无色硬质玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶。玻璃瓶应事先用清洁液浸泡，再依次用自来水和去离子水冲洗干净、晾干；聚乙烯塑料瓶用10%盐酸或稀硝酸浸泡，再依次用自来水和去离子水冲洗干净、晾干。同时注意瓶盖、瓶塞的清洗。2.1.3．现场采样：首先要注意样品的代表性，采集自来水或抽水设备的水样，应放水数分钟冲洗掉滞留于水管中的杂质及陈旧水样，然后取样。采样前用水样清洗采样瓶及瓶塞3次。采井水（敞口井）及河水样品时，可用专用采样器采集水面下20-50cm处水样，防止水面杂物或泥沙进入瓶内。2.1.4．水样的保存：从取样到分析的间隔越短，分析结果越可靠。水样在存放过程中，某些项目易受影响，如As3+易转变为As5+，为减少存放中造成的损失，部分项目可加入试剂加以保护。水样保存的目的是尽量减少存放时间内因水样变化造成的损失，保存的方法很多，根据分析项目的要求，可以控制溶液的PH值，或加入化学药品，或通过冷藏冷冻等。如分析水样中的总砷，可加H2SO4至pH＜2，于40℃下可以保存6个月。2.2．煤样的采集煤样的氟、砷等微量元素含量分布不均匀，一般采集煤矿中的样品使用刻槽采样法。采集居民家中煤堆的样品要多布设几个采样点。2.2.1．采样点的选择：根据居民家中煤的存放方式采用多点采样、均匀混合的方法。一般可以采用堆锥法：将煤堆成一个圆锥，然后按对角线进行多点采样，将所采煤样集中起来，混合均匀。要注意保持每个采样点的采样量基本一致。2.2.2．采样量：一般要求1公斤，对多点采集的煤样，可反复按四分法缩分2.3植物样品2.3.1．采样量：主要考虑样品部分处理后，最少部分的数量是否够分析使用。一般要求至少由1公斤干重样品，新鲜样品以含80-90%水来计算。半干或烘、晾干的植物则要根据实际情况采集到足够量。2.3.2．样品采集：新鲜植物在选好的样区内分别采集不同植株的根、茎、叶、果实等。采样方法常用梅花形法和交叉间隔法。2.4食物样品采样时要特别注意均匀性和代表性。2.4.1．采样容器：一般用500ml无色硬质玻璃广口瓶或聚乙烯塑料袋。2.4.2．采样：液体、半液体样品充份混匀后采样；半固体、脂肪以半圆形不锈钢采样器从上、中、下三层采样；面食品、米、糖等颗粒性食品及鱼、肉、蔬菜等副食品从上、中、下三层采样。2.5．生物材料样品收集何种生物样品，应根据有害物质的特点及其在机体内的转归和检验目的而定。采集对象是人体时要遵守知情同意原则。2.5.1．指（趾）甲、毛发指（趾）甲剪取后置于采样袋。毛发取枕部发样，取距发跟3cm之内的样品，大于3cm的部分弃去。一般取样2~3克。2.5.2．血样：一般采集空腹血。由于血砷的个体变异较大，易受膳食成分的影响，因此采样时要特别注意被检者近期饮食情况及服用药物情况；如不能立即测定，应在-20℃以下条件下保存。若检测项目为血清或血细胞，应立即离心分离后保存，以免出现溶血现象。2.5.3．尿样：有条件的可收集24小时尿样；条件不具备时，可采集晨尿代替24小时全程尿。不能马上测定的尿样应保存于-20℃以下条件下；检测时，在样品完全融化后摇匀定量取样。2.5.4．组织：组织采样要防止外源性污染。80℃以下烘干，烘干样品成粉末后混匀称量测定。2.6．空气样品采样方式依据测定要求，可采取24小时连续采样或一次性定时采样。在一次性采样时，采样的时间则依据砷污染的严重程度等条件确定。在采集空气样品时，要注意记录温度、湿度和大气压力，以便将结果换算成标准状态下的表述形式。四．测定方法的选择与评价选择准确可靠的测定方法是分析工作质量控制的重要保障，通常应首选国家或部门规定的标准方法，或者选择简便易行、精密准确、灵敏度和测定限能满足分析测试工作需要的方法。在样品分析测试之前，首先应对测定方法进行检验与评价。1准确度：指测定值与真值之间一致的程度。常用绝对误差和相对误差表示。误差越小，测定值与真值越接近，测定结果越准。准确度是反映测定方法系统误差和随机误差大小的综合指标，它决定测定方法的可靠性。1.1用标准物质（referencematerial）评价：标准物质是指在规定条件下，具有高稳定的物理、化学或剂量特征，并经正式批准作为标准用于校准测量器具、评定测量方法或确定材料特性良知的物质或材料。标准物质由国家权威机构发放，并给出其中某些组分含量的标准值及其不确定度（A±U）。由于标准物质种类较多，使用时应根据待测样品选择基体基本相同或相近、化学组成与物理形态、浓度水平及准确度水平合适的标准物质。nStXfa,2122,)(UnStAXfa标准物质的标准值范围为A±U，对标准物质测定结果为，如果则表明标准物质的测定结果与标准值是一致的将标准物质与样品在相同条件下进行测定，如果标准物质的测定结果与证书上的标准值一致，则表明分析方法与测定过程的准确度令人满意，样品分析结果准确可靠。1.2与标准方法对照评价：将待评价的方法与标准方法进行对照试验，即用两种方法测定相同的样品（最好是高、中、低三种不同浓度），测定结果经显著性检验，若两种方法测定结果的差异无显著性，由于标准方法是可靠的，所以待评价方法也是可靠的。有时也可以同时采用不同原理的两种方法（包括待评价方法）进行对照，若两种方法测定结果的差异无显著性，则待评价方法也可以认为是可靠的。1.3用加标回收率评价：向样品中加入一定量待测物质的标准溶液，用选定的分析方法进行测定，按照下式计算加标回收率：加标回收率=%100加标量样品测定值加标样品测定值这是目前实验室常用评价准确度的方法。加标回收率愈接近100%，说明准确度愈高。用加标回收率评价准确度时应注意：加标量应与样品含量水平接近，且在测定方法的线性范围内；加入标准物的形态与样品中待测物质的形态应尽量一致。若不一致，会影响加标回收率的准确性；样品中某些共存物对待测物质测定的干扰，有时不能在加标回收率试验中被发现，应特别注意。2精密度：对同一均匀试样多次平行测定结果之间的分散程度。它反映了分析方法或测量系统随机误差的大小。精密度常用平均偏差，相对平均偏差，标准偏差和相对标准偏差等表示。测定方法的精密度是指连续测定（日内）和重复测定（日间）的精密度。在测定方法的线性范围内选择高、中、低三种不同浓度待测样品（或加标样品），每种浓度6个平行样，在相同条件下连续6天重复测定，分别计算各种浓度的日内和日间测定的相对标准偏差。一般要求测定方法的相对标准偏差≤10%。3检出限：对某一特定分析方法，在给定的