芳酸类药物的分析

第五章芳酸类药物的分析第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质检查第四节含量测定NH2RNH2脂肪胺芳胺RCOOH羧酸COOH芳酸常见的芳酸类药物(可分3类）COOHOH水杨酸（pKa2.98）水杨酸类COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）解热镇痛药消毒药COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?水杨酸类COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONa苯甲酸类防腐药NH(CH2)3CH3H2NO2SCOOHO布美他尼苯甲酸类布洛芬其他芳酸类CH3CHCH3CHCH2CH3COOH第一节结构与性质一、结构分析包括：芳酸、芳酸盐、芳酸酯共同点：苯环、羧基不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）二、性质（一）物理性质（1）固体具有一定的熔点（2）溶解性芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。游离芳酸类兽药几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；（二）化学性质1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸；—X、—NO2等吸电子取代基存在使酸性增强—CH3、—NH2、—OH等斥电子取代基存在使酸性减弱邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强（二）化学性质2.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。（二）化学性质利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，可用水解后剩余滴定法测定其含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。3.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；化学性质4.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如:具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。（二）化学性质第二节鉴别试验1、FeCl3反应具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物紫堇色铁配位化合物～6pH43FeClOHArOHR水杨酸(紫堇色)对氨基水杨酸钠(紫红色)水杨酸二乙胺对乙酰氨基酚(蓝紫色)直接FeCl3反应：酚羟基鉴别直接FeCl3反应：芳羧基COOH+FeCl3+2OH-加稀盐酸碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀白色鉴别间接FeCl3反应：水杨酸阿司匹林阿司匹林Ch.P（2000）[鉴别]取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。鉴别COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）2、重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄～猩红色萘酚OH-NH2R鉴别重氮化HONHCOCH3对乙酰氨基酚（扑热息痛）对氨基水杨酸钠直接：盐酸普鲁卡因间接：COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?鉴别3、水解反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸CONa32水杨酸阿司匹林COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COOH+FeCl3+2OH-鉴别水煮4、溴代反应COONaOHNH2对氨基水杨酸钠?OHNH2BrBrBr+3Br2+3HBr+CO2鉴别分解产物的反应苯甲酸苯甲酸钠42SOH5、特殊反应鉴别管壁凝结成白色升华物UVTLCHPLC鉴别CH3CHCH3CHCH2CH3COOHUVλmax:265nm、273nmTLC仪器法鉴别仪器法COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）υO-H3100~2500cm-1酯υc=o1760cm-1羧基υc=o1690cm-1芳环υc-c1610,1485cm-1芳环邻二取代δC-H750cm-1δO-H920cm-1IR30002000180016001000800第三节特殊杂质检查一、水杨酸中苯酚的检查1.杂质来源原料残存（生产过程中原料反应不完全）特杂2.检查方法——标准对照法原理苯酚在碱性条件下可被铁氰化钾氧化为苯醌，进一步与4-氨基安替比林缩合有色产物（CHCl3萃取比色)限量：0.10%（USP用HPLC检查）特杂二、阿司匹林中水杨酸的检查原料残存（生产过程中乙酰化不完全）水解产生（贮存过程中水解产生）1.杂质来源（有毒、氧化为醌有色物质）2.检查方法——标准对照法反应原理：酚羟基可直接与高铁盐Fe3+反应限量原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）特杂其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）水杨酰水杨酸（SSA）特杂第四节含量测定一、中和法1.直接滴定法pKa3～6终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolSSolution终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolSSample终点滴定酚酞中性乙醇NaOHsolS阿司匹林Ch.P（2000）取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。含量COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O含量醇中阿司匹林直接滴定法酚酞（1）测定方法及计算Ka=3.27×10-4；反应摩尔比为1∶1（2）讨论含量①中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言②优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）③适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定含量2.水解后剩余滴定法阿司匹林原料药含量酯的一般含量测定方法USP（25）方法：取本品约1.5g，精密称定，加入NaOH滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用H2SO4滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：含量反应摩尔比为1∶2优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰尚存在水解后剩余滴定法含量每1ml的NaOH滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O43.两步滴定法如阿司匹林片的测定：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片含量取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加NaOH滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的NaOH滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O含量两步滴定法第二步水解后剩余滴定COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）?©含量两步滴定法2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O反应摩尔比为1∶1剩余滴定：含量降低了酯键水解的干扰本法消除了酸性杂质的干扰，片剂含量测定结果的计算%100/%100%片）标示量（）平均片重（）供试品重（）测得量（标示量每片含量标示量gggg含量%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT剩余滴定：4.双相滴定法芳酸碱金属盐如苯甲酸钠Ch.P(2000)COONa+HClCOOH+NaCl水—乙醚溶剂：水——乙醚COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基红指示液2滴，用HCl滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用HCl滴定液(0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的HCl滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。COONa+HClCOOH+NaCl水—乙醚乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰二、亚硝酸钠滴定法Cl-+22+2+++ArNH2NaNO2HClArNNNaClH2O含量具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物1.直接紫外分光光度法***注射液Ch.P（2000）三、紫外分光光度法含量2.柱分配色谱—紫外分光光度法水杨酸的限量测定固定相：FeCl3,SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量USP（25）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸1.阿司匹林栓剂Ch.P（2000）离子抑制色谱法内标法定量2.对氨基水杨酸钠USP（25）离子对反相HPLC内标法定量四、HPLC3.酚磺乙胺Ch.P（2000）正相HPLC内标法定量***鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（C）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾***测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（BC）A.重量法B.酸碱滴定法C.高效液相色谱法D.络合滴定法E.高锰酸钾法***两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是（A）A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg反应摩尔比为1∶1mlmgLgmolgLmolncMT02.1802.18116.1801.0T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c——滴定液浓度，mol/LM——被测物的摩尔质量，g/moln——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1∶n***苯甲酸钠的含量测定，Ch.P（2000）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（D）A.水—乙醇B.水—冰醋酸C.水—氯仿D.水—乙醚E.水—丙酮***双相滴定法可适用的药物为（E）A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠***含量测定方法(Ch.P2000）为:A.直接中和滴定法B.两步滴定法C.两者均可D.两者均不可阿司匹林片（B）阿司匹林原料药（A）阿司匹林栓剂（D）阿司匹林肠溶剂（B）A．两步酸碱滴定法B．直接酸碱滴定法C．两者皆是D．两者皆不是1.苯甲酸钠的测定（D）2.盐酸的测定（B）3.酸碱滴定法（C）4.阿司匹林片的测定（A）***阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（C）A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠E.醋酸苯酯***水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是（D）A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1***两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（B）A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点E.有利于第二步滴定***能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有（ABC）A．苯甲酸钠B．水杨酸C．对乙酰氨基酚D．氢化可的松E．丙酸睾酮***采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（A）A.防止反应产物的干扰B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化C.消除酸碱性杂质的干扰D.防止样品水解E.以上都不对***采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与