第六篇-芳酸类药物分析

芳酸及其酯类药物的分析典型药物鉴别试验含量测定练习与思考杂质检查第六章基本要求基本要求一、掌握水杨酸类、苯甲酸类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。二、熟悉其他芳酸类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。一、水杨酸类（一）典型药物结构第一节典型药物分类与理化性质OHCOOH水杨酸（salycylicacid）SACOOHOCOCH3阿司匹林（aspirin)ASACOONaOHNH2对氨基水杨酸钠（sodiumaminosalicylate)OCOCOOHOH双水杨酯（salsalate)COONHCOCH3OCOCH3贝诺酯（benorilate)1.酸性SA(PKa2.95)、ASA(PKa3.49)、双水杨酯均有酸性。2.溶解性:均为固体。除钠盐溶于水，其余不溶。3.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。4.芳伯氨基和酚羟基特性：5.水解特性：ASA、双水杨酯及其制剂应检查水杨酸,对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。（二）主要理化性质（一）典型药物结构苯甲酸及其钠盐(benzoicacid）二、苯甲酸类COOH(Na)COOC2H5OH羟苯乙酯(ethylparoben)SO2COOHN(CH2CH2CH3)2丙磺舒(probenecid)NHCOOHCH3CH3甲芬那酸(mefenamicacid)（二）主要理化性质1.溶解性:均为固体。除钠盐溶于水，其余不溶。2.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。3.具有酚羟基特性：4.分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸；丙磺舒分解为SO25.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基，可用NaOH直接滴定测定其含量。三、其他芳酸类(一)典型药物结构ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯（clofibrate）CHCH3COOHCHCH2CH3CH3布洛芬（ibuprofen）(二)主要理化性质1.溶解性：水中不溶，有机溶剂溶解，氯贝丁酯为液体；布洛芬为固体。2.UV和IR特征吸收光谱：基于分子结构中具有苯环和特征基团。一、与三氯化铁反应含有酚羟基药物可与FeCl3反应；能与FeCl3反应不一定含酚羟基.第二节鉴别试验OHRAr-OH+FeCl3紫堇色铁配位化合物pH4~61.直接反应SA在中性或弱酸性条件下，与FeCl3生成紫堇色配位化合物赭色苯甲酸（中性或碱性水溶液）+FeCl3COOHCOOOHOFeFe+4FeCl3()23+12HCl6丙磺舒与NaOH成钠盐后，在pH5.0~6.0中与FeCl3生成米黄色布洛芬与高氯酸羟胺，N，N’-双环基己羧二亚胺及高氯酸铁反应，即显紫色[JP（14）方法]。基于分子中-COOH的结构。2.水解或分解后与三氯化铁反应ASA水解成SA后与FeCl3反应，成紫堇色二、重氮化-偶合反应凡是分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物均可反应。Ar-NH2Ar-NH-COCH3NaNO2+HClAr-N2ClH2OpH=7ˉpH7pH7ˉˉOHAr-N=N-Ar-N=N-Ar-N=N-SO3HSO3H-OH-OHNHCH2CH2NH21.直接反应对氨基水杨酸钠2.水解后反应贝诺酯具有潜在芳伯氨基3.甲芬那酸与对-硝基苯重氮盐在NaOH介质中偶合产生橙红色。CH3CH3NHCOOHCOOHNHCH3CH3NaOHNNO2NNN++NO2+K2Cr2O7深蓝色棕绿色甲芬那酸+H2SO4黄色绿色荧光[JP(14)△三、氧化反应1.ASA酸水解生成SA和CH3COOH：SA的mp为156℃～161℃。2.双水杨酯水解生成SA：SA的mp为158℃。3.氯贝丁酯碱水解后与盐酸羟胺生成异羟肟酸盐，在弱酸条件下再与三氯化铁反应生成紫色的异羟肟酸铁。四、水解反应1.苯甲酸盐加热分解生成苯甲酸升华物，可用于鉴别。2.丙磺舒与NaOH熔融分解成Na2SO3,经硝酸氧化成Na2SO4。3.丙磺舒加热分解，生成SO2气体，有臭味五、分解产物反应1.测定λmax；λmin。例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml；λmax；265nm,273nm;λmin。245nm,271nm。2.在λmax处测定一定浓度供试液的吸收度A。例如：羟苯乙酯，5μg/mlλmax=295nm;A=0.483.在λmax处测定供试液的百分吸收系数。例如：贝诺酯在λmax=240nm;E1%1cm=730~760六、紫外吸收光谱法4.在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收度比值法）例如：对氨基水杨酸钠10μg/ml;A265/A299=1.50~1.56再例如：甲芬那酸14μg/ml;A278~280/A348~352=1.15~1.30七、红外吸收光谱法水杨酸的红外吸收图谱3700~2900cm-1N-H、O-H1660cm-1C=O1610,15701480,1440C=C775cm-1Ar-H第三节特殊杂质检查ASA中特殊杂质的检查1.溶液的澄清度主要检查Na2CO3中不溶物，有苯酚；醋酸苯酯；水杨酸苯酯；乙酰水杨酸苯酯。ASA溶解因此ASA溶液应澄清。2.游离水杨酸检查利用SA可与FeCl3呈色，用比色法检查。3.易炭化物检查主要检查ASA中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质。采用与标准比色液比色的方法检查。一、酸碱滴定法（一）直接滴定法基于本类药物-COOH；可用碱直接滴定，如ASA的含量测定，其原理如下：第四节含量测定1.原理：2.条件：在中性乙醇中，以酚酞作指示剂；摩尔比为1:1。3.应用：药物Pka3-6时。多国药典用于阿司匹林、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬测定；USP和BP还用于甲芬那酸的测定。COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O（二）水解后剩余滴定法1.ASA含量测定原理：条件：水溶液2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2OCOOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa具体试验：I份NaOHI份NaOHVVOVo-V相当于ASA消耗硫酸的ml数ASA%=(Vo–V)×F×T/W×100%2.羟苯乙酯的含量测定2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2OCOOC2H5HO+NaOHCOONaHO+C2H5OH（三）两步滴定法二、亚硝酸钠滴定法对氨基水杨酸钠有芳伯氨基,在HCl中与NaNO2发生重氮化反应Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2Cl+NaCl+2H2O因此可用亚硝酸钠滴定法测定其含量，此法在下章重点讨论。三、双相滴定法是指在水相和有机相中的滴定。如苯甲酸钠的含量测定：生成的苯甲酸不溶于水，终点pH突跃不明显，不易观察。苯甲酸在乙醚中易溶，在水相中加入乙醚将滴定中产生的苯甲酸萃取入醚层。因此用双相滴定可使反应完全终点明显。COONa+HClCOOH+NaCl（一）直接紫外分光光度法丙磺舒片的测定：Ch.P在HCl中，采用百分吸收系数法。BP在盐酸-乙醇,采用百分吸收系数法.USP用氯仿提取后，采用对照品比较法。四、紫外分光光度法（二）离子交换-紫外分光光度法氯贝丁酯及其制剂Ch.P(2010)采用酸碱滴定法；当含有酸性杂质对氯酚时，可采用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，在甲醇溶液中，226nm波长处，采用对照品比较法。（三）柱分配色谱-紫外分光光度法USP(24)采用此法同时测定ASA胶囊中ASA和SA。Ch.P(2010)ASA的胶囊剂的含量测定采用此法。USP（24）ASA片、对氨基水杨酸钠、甲芬那酸、布洛芬、丙磺舒等及其制剂，采用此法。五、HPLC法阿司匹林栓剂含量测定（离子抑制色谱法）练习与思考[A型题]1．阿斯匹林中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.砷盐C.水杨酸D.苯甲酸E.苯酚2．对氨基水杨酸钠中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯酚[B型题]A.FeCl3反应B.水解后FeCl3反应C.AgNO3反应D.重氮化-偶合反应E.麦芽酚反应1.阿斯匹林2.水杨酸3.SMZ4.苯甲酸钠BADAA.直接酸碱滴定法B.两步酸碱滴定法C.亚硝酸钠溶液滴定法D.HPLC法E.双相滴定法5.苯甲酸钠6.阿斯匹林7.阿斯匹林栓剂8.对氨基水杨酸钠EBDC[X型题]1.直接能与FeCl3产生颜色反应的药物有A。水杨酸B.盐酸普鲁卡因C.对氨基水杨酸钠D.对氨基酚E.阿斯匹林2.能发生重氮化-偶合反应的药物有A。水杨酸B.阿斯匹林C.对氨基水杨酸钠D.对氨基酚E.盐酸普鲁卡因