1第一单元血栓与止血临床基础应用知识在生理情况下,血液在血管中流动,既不会溢出血管壁而出血,也不会在血管内发生凝固而导致血栓的形成。出血与血栓形成是机体正常的止血与抗凝血及纤溶功能动态平衡失调所致的一种病理生理过程。止血是机体对于血管损伤发生的生理反应。按生理性止血可分为一期止血(主要涉及血管和血小板)、二期止血(主要涉及凝血因子和抗凝蛋白)和纤维蛋白溶解。第一节凝血系统一.血管壁的止血作用1.血管收缩:可直接引起血流减慢、血管损伤处的闭合、血管断端的回缩以及出血的终止。2.激活血小板:使血小板发生粘附聚集最终形成血小板血栓而达到止血的作用。3.凝血系统的激活4.局部血液粘稠度的增加二.血小板的止血作用1.粘附、聚集在血管破损处,形成白色血栓2.释放活性物质促进血小板聚集增强血管收缩3.促进凝血过程4.血块收缩,形成稳固血栓5.维持血管壁的完整性,毛细血管的通透性三.凝血因子的作用凝血因子也称凝血蛋白,其中除了Ca2+外,都是蛋白质。正常血液中处组织因子分布在全身组织外,都可在血浆中找到。目前公认的凝血因子共14个按罗马字命名有12个,以及高分子量激肽原(HMWK),激肽释放酶原(PK),大多数由肝脏产生,其中II、VII、IX、X合成依赖于维生素K,并且在正常的生理情况下,所有的因子都处于无活性的状态。凝血因子21.内源性凝血途径:是指参与凝血的因子全部来自正常血液中的凝血蛋白和Ca2+。主要包括因子XII、XI、IX、VIII2.外源性凝血途径:是指凝血的因子不完全来自血液中,部分由组织中进入血液。包括因子VII3.共同凝血途径:在内原、外源凝血途径中,X因子被活化为Xa。包括X、V、II、I四.检测方法(一)凝血酶原时间(PT)1.采用凝固法,待测血浆加入带有组织活酶和钙离子混合物,最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需的时间,来测定PT外源性凝血系统的筛检实验,其正常与否取决于因子Ⅶ、Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ(凝血酶原)和Ⅰ(纤维蛋白原)在血浆中的水平,是当前监测口服抗凝治疗的主要实验室指标。2.PT结果的报告方式:S(秒数):正常参考范围(11-14)秒INR(国际标准化比值),正常参考值为0.8-1.243.INR=PTRISI,PTR=(患者PT/正常人群均值PT)1)国际标准化比值(INR)报告PT,可纠正由不同仪器、试剂所造成结果差异和变化,实现实验室间结果的标准化和可比性2)国际敏感度指数(ISI):敏感性不同的组织凝血活酶在检测中能获得相同结果,所制定的共同敏感性指标3)规定试剂生产厂商的产品必须标有ISI;ISI愈接近1.0,试剂愈敏感,仪器也有特有ISI(二)活化部分凝血酶原时间(APTT)1.采用凝固法,待测血浆加入活化部分凝血活酶溶液,纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需时间;内源性凝血因子筛检试验,其延长或缩短分别反映凝血因子XII、XI、IX、VIII、X、V、II、I血浆水平的减低或增高。2.APTT结果的报告方式:S(秒数):正常参考范围27~45秒(三)凝血酶时间(TT)1.采用凝固法,待测血浆加入标定的凝血酶溶液,纤维蛋白原转变为纤维蛋白,测定凝固所需的时间;TT检测广泛应用于监控高分子量肝素抗凝及纤维蛋白溶解治疗,筛选纤维蛋白原紊乱及一些严重的纤维蛋白原缺乏病症。2.TT结果的报告方式:S(秒数):正常参考范围20秒(四)纤维蛋白原含量(FIB)1.在高浓度凝血酶作用下(clauss法),血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白,从而形成血凝块。血浆的凝血酶凝固时间和纤维蛋白原含量成反比2.FIB结果的报告方式::含量(g/l):正常参考范围2-4g/l3第二节抗凝血系统抗凝血系统对血液凝固系统的调节,可使其改变凝血性质,减少纤维蛋白的形成、降低各种凝血因子的活化的水平。抗凝血系统包括细胞抗凝和体液抗凝两方面,细胞抗凝的作用主要包括血管内皮细胞合成和分泌抗凝物质、光滑内皮阻止血小板活化和纤维蛋白沉积的抗凝作用,以及单核-巨噬细胞对活化凝血因子清除作用等。一.检测项目介绍1.抗凝血酶III(AT-III)抗凝血酶III(AT-III)是主要的生理性血浆抗凝物质,尤其对抗凝血酶具有很强的灭活作用,AT-III缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一。AT-III能够抑制FIIa、FVIIa、FIXa、FXa、FXIa、FXIIa以及纤溶酶、胰蛋白酶、激肽释放酶等。2.蛋白C系统蛋白C(PC)是一种无促凝活性、依赖于维生素K的蛋白质,蛋白C系统除了蛋白C还包括蛋白S(PS)、血栓调节蛋白(TM)\等。蛋白C系统是微循环血栓形成的主要血液凝固调节物质。3.组织因子途径抑制物(TFPI)组织因子途径抑制物(TFPI)可以抑制凝血因子的活性,参与调节TF-VIIa参与的凝血作用,TFPI是抗凝血中主要的调节物质,可以直接抑制活化的FX(Xa),并以依赖FXa的形式在Ca2+存在条件下抑制TF/VIIa复合物。二.检验方法(AT-III)采用发色底物法:将过量的凝血酶加入待测血浆,与血浆中的AT-III形成1:1的复合物,使之丧失转化纤维蛋白原为纤维蛋白的酶活性,剩余凝血酶作用于发底物,裂解出产色基团,显色的深浅与AT-III活性成负相关。4第三节纤维蛋白溶解系统纤维蛋白溶解系统简称纤溶系统,是纤溶酶原在特异性激活物的作用下转化为纤溶酶,从而降解纤维蛋白和其他蛋白质的过程。其主要作用是将沉积在血管和间质内的纤维蛋白溶解而保持血管及腺体管道的通畅、血管新生、防止血栓形成,或使已形成的血栓溶解,血流复通。一.纤溶系统的启动二.纤溶系统的降解产物1.FDP(纤维蛋白/纤维蛋白原的降解产物)纤维蛋白(原)被纤溶酶降解的产物的统称,包括X、Y、D、E等片段。FDP对血液凝固和血小板的功能均有一定的影响,其中所有的碎片均有可抑制血小板的聚集和释放反应。2.D-Dimer是交联纤维蛋白被纤溶酶降解产生的多种片段,包括D-D二聚体、YY二聚体、复合物1(DD/E)复合物2(DY/YD)复合物3(YY/DXD)等。3.FDP和D-二聚体最大的区别之一是,FDP可以以纤维蛋白原为底物,而D-二聚体是以纤维蛋白为作用底物,因此,在原发性纤溶时D-二聚体水平并不增高,而FDP水平增高,在其他一些病理情况下,如DIC时,两者的变化基本相同。5三.检验方法免疫透射比浊法:当含有D-二聚体的血浆与含有D-二聚体特异性单克隆抗体的乳胶颗粒发生抗原抗体凝集反应时,凝集程度与血浆中的D-二聚体浓度成正比,并通过相应波长下的测量,由于凝集引起的浊度的变化,进行D-二聚体的测定。6第四节临床意义一.血栓与止血筛查试验的应用(一)二期止血缺陷筛查试验的应用1.APTT和PT均正常,若有明显的延迟性出血,见于遗传性和获得性因子XIII缺乏症。2.APTT延长和PT正常多数是由于内源性凝血途径缺陷所引起的出血性疾病。3.APTT正常PT延长多数是由于外源性凝血途径缺陷所引起的出血性疾病。如遗传性和获得性因子VII缺乏症。4.APTT和PT都延长多数是由于共同途径的一个或多个凝血因子缺陷所致3的出血性疾病,如遗传性和获得性的因子X、V缺乏症。(二)纤溶活性亢进筛查试验的应用纤维蛋白(原)降解产物测定(FDP)和D-二聚体测定(D-D)1.FDP正常,D-D正常:多数为正常人,提示无纤溶过度现象。2.FDP阳性,D-D正常:多数为FDP的假阳性或原发性纤溶症。3.FDP正常,D-D阳性:多数为FDP假阴性或继发性纤溶症4.FDP阳性,D-D阳性:多数为继发性纤溶症,常见于DIC二.出血性疾病中的应用(一)血友病血友病是一组由于遗传性凝血因子VIII或IX基因缺陷导致的激活凝血酶的功能发生障碍所致的出血性疾病。包括血友病A(或称血友病甲),因子VIII缺乏症;血友病B(或称血友病乙),因子IX缺乏症。实验室的检查:(1)血小板计数(2)出血时间(BT)(3)凝血酶原时间(PT)—外源性凝血途径(4)活化部分凝血酶原时间(APTT)—内源性凝血途径(5)凝血酶时间(6)纤维蛋白原(Fg)(二)弥散性血管内凝血(DIC)弥散性血管内凝血(DIC):是由于多种病因所引起的血栓与止血病理生理改变的一个中间环节,是体内有血小板聚集,病理性凝血酶生成,纤维蛋白在微血管中沉积,形成广泛的微血栓。在此过程中,消耗大量的血小板和凝血因子,使凝血活性减低,同时通过内激活途径引发继发性纤溶亢进。因此出现了广泛的微血栓病性凝血障碍和出血症状。三.血栓与止血检验在血栓性疾病中的应用1.深静脉血栓症(DVT):是由于静脉血流瘀滞(如长期卧床),静脉损伤等原因导致的静脉血流缓慢或停滞而形成血栓和栓塞2.肺栓塞(PE):静脉中的血栓游离脱落后堵塞肺动脉,导致急性或慢性肺循环障碍。二者总称为静脉血栓栓塞症(VTE)7第二单元安装调试第一节拆箱一.仪器包装仪器包装为:纸箱包装、塑料底托及四道打包带打包(见图1)图1二.箱内物品:箱内物品包括仪器、随机资料、随机附件(见图2)图281.随机资料包括:(见图3)A、产品使用说明书B、测试软件(光盘)C、顾客装机培训验收单D、保修卡E、装箱单F、合格证图32.随机附件包括:(见图4、图5、图6、图7)A、数据线(USB线)B、数据线(RJ45网线)C、电源线D、地线(备用)E、测试杯盘F、废液桶G、排水管H、搅拌子I、试管架组件J、SFT特殊清洗液(5瓶)K、缺液报警装置L、满液报警装置M、通针器N、保险管O、备用试剂瓶P、杯盘托架图4CEKLJ9图5图6图7IPPBADGHO10第二节安装一.安装条件1.工作环境:15℃≤工作温度≤30℃工作电压及允许误差:220V±22V频率:50Hz功率:450VA2.空间要求:仪器使用室间尺寸:高:705mm宽:698mm长:1020mm最大高度(打开上盖):1140mm3.包装与配件:包装无破损,对照清单检查随机资料和附件二.安装要求1.网电源必须具有保护接地端,网电源电压稳定、地线不带电,周围无强磁干扰设备2.整套设备所需工作台尺寸:左右150cm×前后75cm三.安装步骤1.平稳安放仪器、电脑、打印机2.从仪器底部四角“搬运位置”处抽出4根金属棒,4人手握金属棒,可搬运到工作台上(见图8)图8前后左右共四个抽拉把手113.拆除固定装置:1)仪器内部视图(见图9)图92)解除Y方向固定装置(见图10、图11)图10图113)解除X方向固定装置(见图12)图12Y方向左侧2个固定端Y方向右侧2个固定端X方向固定端Y方向固定端Z方向固定泡沫X方向2个固定端124)解除Z方向固定装置(见图13)图135)解除固定抓杯器移动的装置(见图14)图144.载入试管架(见图15)图15固定杯钩的为两块泡沫固定杯钩的为两块泡沫拆除Z方向固定泡沫135.安装测试杯盘(见图16、图17)1)打开左侧门2)调整测试杯盘出杯方向(杯盘的安装方向为逆时针),将测试杯盘的中心孔插入送带轴上3)安装杯盘托架并锁紧测试杯盘4)将测试杯盘的卷带轮顺序通过上滑轮、下滑轮,将第一个测试杯完全进入到进杯通道内5)使卷带轮端通过压杯盖,并锁紧压杯盖6)将卷带轮装入收带轮上,锁紧收带轮的挡板,逆时针旋转收带轮7)关闭左侧门图16图17测试杯盘杯盘托架上滑轮压杯盖收带轮下滑轮14第三节仪器连接一.连线(见图18、图19)1.连接计算机主机、显示器、键盘、鼠标、打印机之间连接线及电源线2.将电源线连接到SF-8100的电源插座3.将RJ45网线的一端接至SF-8100通讯口的网口,另一端接至计算机网络接口4.将读卡器USB数据线一端接至SF-8100的通讯口的USB口,另一端接至计算机USB接口图18图19连接电源线连接到电脑网口连接到电脑USB口电源插座读卡器USB接口网线接口此处为保险管电源开关15二.管路连接(见图20、图21)1.在仪器右侧按“”标识指示,将进水管一端接在仪器标有“清洗液”的水嘴上,另一端放在清洗桶中2.将排水管一端接到仪器右侧“废液”指示的水嘴上,将排水管另一端插入废液桶中3.将清