DeltaVision 高分辨率活细胞成像系统

DeltaVision高分辨率活细胞成像系统GEHealthcareLifeSciences更高的灵敏度得益于精密和高效的光路，以及领先的还原型反卷积成像技术，DeltaVision将宽场显微镜的分辨率和灵敏度提高到新的水平，成为目前最灵敏的显微镜系统之一。对细胞内囊泡等微小结构和微弱荧光优秀的探测能力极大地拓展了科研工作的广度和深度。DeltaVision强大的信号收集和处理能力，成就了非凡的图像品质。更少的光损伤和光淬灭由于灵敏度得以显著提高，即使是微弱的激发光，系统也可以收集到足够的荧光信号。光损伤和光淬灭不再是长时间活细胞和微弱信号观察的障碍。更快的速度最高可达300fps的成像速度，像钙火花之类的快速生理生化过程也能全程展现。还原真实的定量结果极高的光线收集效率和出色的还原型反卷积技术，将每一个荧光信号还原到它应在的位置，不仅提高了图像质量，也得到了更加真实的结果，是图像定量分析的基础。智能化的系统焦点飘移和细胞的运动是长时间活细胞观察的梦魇。DeltaVision特有的细胞跟踪(CellTracking)和实时自动对焦功能使得更长时间的活细胞观察不再困难。无需过多维护图形处理工作站基于Linux系统，更适合处理多线程任务，并且大大降低侵染病毒的风险。人性化的softWoRx软件非常易用，用户只需经过短时培训，即可发挥软件的大部分功能。整个系统无一易损耗部件，长寿命固态光源使您彻底摆脱光源经常更新和光路重新校准的烦恼。DeltaVision成像系统的显著特点HIV病毒通过微管蛋白进入细胞核由芝加哥大学DavidMcDonald提供秋枫叶片，表皮下100微米厚由API的KylaTeplitz和KathrynBuchanan提供有丝分裂期的染色体由Scripps研究所SamanthaZeitlin和KevinSullivan提供由mCherry-tubulin和GFP-cb标记的HeLa细胞由科罗拉多大学JenniferDeLuca提供获得高品质图像的关键因素高度均一的光学系统无论汞灯还是氙灯，其发射光强的时间和空间稳定性都较差，造成荧光信号在时间和空间上的定量都难以获得满意的结果。DeltaVision专有的硬件和软件设计，使激发光在空间上更加均匀，光强探测器实时测量激发光强度，并对图像进行修正，奠定了真实图像和定量结果的基础。传统显微镜光路DeltaVision独有均一照明光路光纤照明单元InsightSSI™固态照明光源DeltaVision提供专用于活细胞成像的固态SSI光源。同激光光源相比，SSI的光强更加稳定，波长选择范围更广，覆盖从紫外到近红外的各个区段，且光线更加均匀。通过TTL实现激发光的快速开关及不同波长之间的快速切换，开关及切换时间达到令人惊叹的10微秒以下。SSI光源仅在照射的瞬间开启，图像采集完毕后立即关闭，不仅有效降低对样品的光损伤，更使自身寿命得到大幅延长。InsightSSITM组合7色固态光源波长(nm)荧光蛋白平均功率(mW)可使用染料举例■381-399BFP55DAPI,Hoechst,AlexaFluor350,Dylight350,CF350,CascadeBlue,LuciferYellow,AMCA,CellTrackerBlue■426-450CFP85PacificBlue■461-489GFP,EGFP54FITC,AlexaFluor488,Dylight488,CF-488,OregonGreen488,CalciumGreen,Fluo-3,Fluo-4,CellTrackerGreen■505-515YFP22AlexaFluor532■529-556OFP,RFP,DsRed85TRITC,Cy3,AlexaFluor546,AlexaFluor555,AlexaFluor568,Dylight549,CF555,MitoTrackerOrange■563-588mCherry89AlexaFluor568,AlexaFluor594,Dylight594,MitotrackerOrange,LysoTrackerRed,CellTrackerRed■621-643-48Cy5,Cy5.5,APC,AlexaFluor647,AlexaFluor635,AlexaFluor660,Dylight633,Dylight649,CF633,CF647分裂中的酵母由贝勒医学院JanosDemeter和ShelleySazer提供原始图像反卷积后3D还原型反卷积显微镜的分辨率和图像的对比度取决于物镜收集的光学信息。显微镜光路中衍射和折射现象的存在，使得样品信号的位置和强度都发生了变化，降低了系统的分辨率和图像的质量。API作为对显微图像进行反卷积处理早期的实践者，将显微镜的硬件设计和后期软件处理完美地结合在一起，树立了显微镜反卷积技术的新标准。XLK2细胞内的肌动蛋白和微管，反卷积后荧光信号强度明显提高NanoMotionTMIII载物台技术参数Z轴X,Y轴绝对精度0.6um每扫13um绝对精度10.0um每行走25mm2.0um每扫100um单向可重复性±0.1um单向可重复性±0.2um步进精度5nm步进精度20nm最大行程1mm最大行程25mm(X)x25mm(Y)或25mm(X)x50mm(Y)标准运动速度1000um/s标准运动速度2000um/sNanoMotion™全自动3D载物台在3D扫描和多点拍摄中，载物台的精度和可重复性是决定能否准确成像的重要指标。API引以为傲的NanoMotion™III精确定位技术结合高超的制造工艺，造就了业界为数不多的兼具极高精度与可重复性的载物台，使DeltaVision系统的协调性与速度达到了新境界。NanoMotion全自动3D载物台softWoRx™图像获取和处理软件功能强大的softWoRx与API高性能的硬件系统完美结合，构成智能化的DeltaVision显微成像系统。用户可以在softWoRx工作站上一站式完成多维图像的采集、3D可视化、分析和处理。softWoRx拥有人性化的界面，即使非常复杂的工作也可以轻松应对。从图像获取、分析处理到数据存储提供完整的软件解决方案多点观察在细胞生物学研究中，获得的形态观察结果往往需要统计学的支持，这就需要观察大量的细胞以扩大样本数量。DeltaVision通过快速、准确的访问预先设定的多个坐标点，使得多点观察尤其是快速成像中的多点观察成为可能。softWoRx基本功能图像获取·支持多达五个荧光通道和一个透射光通道同时采集·标准3D光学切片采集·自动对焦·延时拍摄·多点拍摄、细胞跟踪·多视野拼接图像处理·自动反卷积运算·支持批量化、队列化图像处理·支持多种图像及影片输出格式3D可视化与分析·交互式3D重构·图像数据统计·几何学和强度自动测量·4D物体运动轨迹定量分析·FRET分析·FRAP分析·3D或4D共定位分析OAI™（Z轴连续扫描）在观察快速运动的细胞内动态过程时，获得多层的3D光学切片与快速成像不可兼得。DeltaVision特有的OAI™Z轴连续扫描技术，在单张照片的曝光时间内，通过载物台的连续移动，获得三维空间的所有光学信息并投射在二维平面上，解决了三维和快速不可兼得的问题，尤其适合研究三维空间内细胞和亚细胞的快速运动。光学切片Z轴实时连续扫描延光轴方向投影反卷积与采集多层图像不同，实时Z轴扫描在载物台的一次连续运动过程中只采集一幅图像，并在瞬间创建3D投影softWoRx软件家族·softWoRx·softWoRxSuite·softWoRxExplorer·softWoRxDMS基于Linux的图像分析处理软件基于Windows的图像分析处理软件多平台的图像浏览和处理软件图像数据管理软件细胞跟踪高倍镜下样品的移动是活细胞观察中一个难以逾越的障碍。DeltaVision通过对细胞形状和荧光信号强度的实时观测，自动跟踪细胞的运动，使细胞始终处于视野的中央，即使长达数天的观察也不会出现样品脱离视野的情况。延时观测过程中细胞跟踪示意图。在第3个时间点，ROI区域内细胞的中心接触到了所设置的移动阈值边界（白色圆圈），载物台会移动细胞，使其中心保持在ROI区域内。■细胞周期研究■细胞骨架研究■微生物研究■亚细胞器研究■蛋白运输■钙离子浓度实时测量DeltaVision经典应用举例旋节螺神经生长过程中微丝蛋白的分布绿色为微丝蛋白。由纽约州立大学水牛城分校Cohan提供细胞核中Cajalbody的分裂过程绿色为Cajalbody，红色为Cajolbody的特异蛋白——Fibrillarin。由邓迪大学AngusI.Lamond提供枯草杆菌的细胞膜融合过程中SpoIIIE的动态变化绿色的为SpoIIIE，红色为细胞膜，蓝色的为DNA。红色和绿色分别为细胞膜不透过性染料和细胞透过性染料。由加州大学圣迭戈分校MarcD.Sharp和KitPogliano提供酵母细胞周期中着丝粒和纺锤体的动态变化红色为染色体，绿色为微管蛋白，紫色为着丝粒。由华盛顿大学酵母资源中心提供分泌蛋白从胞内向胞外运输的过程绿色为微管蛋白，红色为分泌蛋白，蓝色为囊泡。由Scripps研究所MatthiasM.Falk提供当刺激到来时，细胞内钙离子浓度升高，并把刺激传递给相邻的细胞，引起相邻细胞离子浓度的升高丰富的配置选项定制专属于您的成像系统UltimateFocus™自动对焦系统在长时间的拍摄中，保证焦点的稳定非常重要。DeltaVision除了在软件中提供的自动对焦功能外，更提供了基于硬件的物理自动对焦系统，无需激发样品，通过实时跟踪盖玻片和样品之间的界面，保证样品始终维持在焦平面上。焦平面盖玻片介质（空气、水、油）红外激光物镜UltimateFocus自动对焦系统工作原理简图全自动微孔板载物台可自动扫描96孔到1536微孔板，并对采集到的图像进行自动分析。搭载全自动微孔板载物台的DeltaVision是进行药物筛选、发现信号分子等高通量筛选实验的绝佳工具。全自动微孔板载物台，可兼容微孔板模式和常规模式PA-GFP类似于光淬灭和恢复，光激活和光转换是研究荧光分子运动的一个利器。光激活荧光分子在未被激活时不会发出荧光，被激光激活后会发出荧光。通过观察荧光分子的扩散状况，即可知道该荧光分子的运动速度和方向。FRAP通过观察荧光信号被淬灭后，目标区域的荧光信号恢复情况，可知道荧光信号的动力学特性，如荧光分子的移动速度等。DeltaVision的X4激光模块使得光淬灭和延时拍摄之间的时间间隔极短，大大增加了FRAP等光动力学应用的准确性。DeltaVisionElite应用拓展当配备X4激光器模块后，DeltaVisionElite将具有更加强大的功能，完成诸如全内反射荧光成像（TIRF）、光漂白恢复（FRAP）、光激活（PA-GFP）等激光诱导相关研究应用。TIRF通过仅仅照射样品100-200nm厚的区域，TIRF可以大幅增强图像的信噪比，取得更好的对比度和清晰度。LDL受体和v-SNARE参与到蛋白的定向运输中红色为LDL受体，绿色为v-SNARE。由洛克菲勒大学SanfordM.Simon等提供TIRFEpifluorescence环境控制箱合适的温度、湿度及CO2流量是维持细胞正常生长的必要条件。DeltaVision通过人工环境箱精确控制这些条件，实现了对细胞长达600小时的连续观察。环境控制箱外观（不透明型）DeltaVisionElitepersonalDV基础配置显微镜基座OlympusIX71倒置荧光显微镜荧光照明InsightSSI™组合7色固态光源InsightSSI™标准4色固态光源(可选氙灯)激发光波长390/18nm,438/24nm,475/28nm,513/17nm,542/27nm,575/25nm,632/22nm390/18nm,475/28nm,542/27nm,632/22nm明场照明LED透射光源发射滤光片组标准6位电动滤光片转盘,活细胞6位